Эйхгорн Г. (ред.) Неорганическая биохимия. Том 1

Подождите немного. Документ загружается.

Металлоферменты.

463

Недавно было сообщено о необычном влиянии Ca

+, Mn

+ и

+ на кинетические свойства глутаматдегидрогеназы, выделен-

ной из Blastocladiella emersonii [146, 147]. Эти двухвалентные ка-

тионы являются сильными активаторами восстановления а-кето-

глутарата, но слабыми ингибиторами окисления глутамата. Такие

направленные эффекты, по-видимому, связаны с регуляторными-

свойствами этого фермента и не доказывают, что ионы двухва-

лентных металлов принимают непосредственное участие в ката-

лизе. Регулярные эффекты одновалентных катионов также наблю-

дались для некоторых дегидрогеназ [148, 149], хотя подобные эф-

фекты более свойственны пиридиннуклеотидзависимым окисли-

тельным декарбоксилазам (разд. 4).

Хотя большинство дегидрогеназ полностью активно и без до-

бавления ионов двухвалентных металлов, были обнаружены неко-

торые полиолдегидрогеназы, для которых необходима активация

добавлением Mg

+ или Mn

+ [150—153]. Нет работ по выяснению

роли иона металла в каталитическом механизме этих металлакти-

вируемых дегидрогеназ.

4. ПИРИДИННУКЛЕОТИДЗАВИСИМЫЕ ОКИСЛИТЕЛЬНЫЕ

ДЕКАРБОКСИЛАЗЫ

Описан ряд ферментов, катализирующих окислительное декар-

боксилирование р-оксикислот и требующих активации добавлени-

ем M

+. Этот тип реакции проиллюстрирован ниже для фермента

декарбоксилирования яблочной кислоты (ь-малат-фермента)

[154—157]:

L-малат + НАД+ (НАДФ+) ч=> пируват + CO

+ НАДН (НАДФН) + H

(10)

Аналогичные реакции катализируются р,р-диметилмалатдегидро-

геназой [158], р-изопропилмалатдегидрогеназой [159], НАД+- и

НАДФ+-зависимой изоцитратдегидрогеназой [160—164] и гомо-

изоцитратдегидрогеназой [165]. Сходные реакции, катализируе-

166] и оксалогликолят вос-

, протекают без добавления

мые 6-фосфоглюконатдегидрогеназой

становительной декарбоксилазой [167"

ионов двухвалентных металлов, однако неизвестно, содержат ли

сами ферменты связанные металлы.

Хотя прямые доказательства роли ионов двухвалентных метал-

лов в металлзависимых окислительных декарбоксилазах в настоя-

щее время отсутствуют, некоторые предварительные данные под-

тверждают, что ион металла участвует исключительно в образова-

нии мостикового комплекса фермент — M

+ — субстрат. Во-пер-

вых, НАДФ+ и НАДФН образуют связь с ь-малат-ферментами и

в отсутствие M

+. Степень и сродство связывания НАДФ+ не за-

464

Г лава

висят от добавления Mn

+, и наблюдаемая константа диссоциации

комплекса E — НАДФН согласуется с константой, определенной

на основании изучения начальных скоростей [168, 169]. Во-вто-

рых, комплекс Mn

+— изоцитрат обеспечивает защиту НАД+-за-

висимой изоцитратдегидрогеназы от инактивации п-хлормеркур-

фенилсульфонатом, но ни изоцитрат, ни НАД+ ни сами по себе,

ни в присутствии Mn

+, ни в его отсутствие такую защиту не обес-

печивают [170]. В-третьих, некоторые из этих ферментов также

катализируют металлзависимое декарбоксилирование аналогич-

ных кетокислот, например оксалоацетата ( ь-малат-фермент) [155,

Рис. 14.2. Возможная роль ионов M

+ в реакциях, катализируемых пиридиннук-

леотидзависимыми окислительными декарбоксилазами. Приведенный механизм

предложен Бойером [176] для L-малат-фермента.

156], оксалосукцината (НАДФ+-зависимая изоцитратдегидрогена-

за) [171, 172]. Возможно, реакции протекают на том же активном

центре, что и окислительное декарбоксилирование р-оксикислот

[164, 169], хотя кинетический анализ не доказывает в послед-

нем случае промежуточного образования ни свободной, ни фер-

ментсвязанной кетокислоты [16, 169]. Даже если декарбоксили-

рование кетокислот и протекает по другому пути, необходимость

иона металла указывает на участие во всех реакциях комплекса

E — M

+ — субстрат по аналогии с металлзависимыми оксало-

ацетатдекарбоксилазами (разд. 5). В-четвертых, было установле-

но [169, 173] значительное связывание Mn

+ ь-малат-ферментом

и изучение НАД+-зависимой изоцитратдегидрогеназы показало,

что комплекс M

+ — изоцитрат действительно является субстра-

том этого фермента, в то время как центр активации специфичен

для свободного изоцитрата [173а]. Для НАДФ+-зависимой изо-

цитратдегидрогеназы наблюдалась заметная взаимосвязь между

кажущейся KA ДЛЯ M

+ И кажущейся Км для изоцитрата [174].

Интересно, что последний фермент характеризуется относительно

широкой специфичностью активации ионами металлов и что наи-

более эффективным активатором является Zn

+ [174].

Все эти факты согласуются с механизмом, предложенным Бойе-

CHjCOCOOH

Металлоферменты

465

ром [176] для малат-фермента, изображенным на рис. 14.2. В со-

ответствии с этим механизмом электрофильный характер иона

металла способствует снижению электронной плотности на

а-углеродном атоме и переносу гидридного иона на НАДФ+. Та-

ким образом, ион металла должен ускорять согласованные дегид-

рирование и декарбоксилирование. Роль, отведенная иону металла

на рис. 14.2, аналогична предложенной Штейнбергером и Вестгей-

мером [177] для каталитического декарбоксилирования р-кетокис-

лот. Вытекающая из этого механизма структура комплекса M

+ —

L -малат отличается, однако, от структуры, наблюдаемой для свя-

зывания [Мп(Н

0)б]

ь-малатом [178], и это означает, что при-

сутствие фермента может изменять структуру образующегося ком-

плекса M

+ — малат.

Необходимо заметить, что анализ НАД+-связанной изоцитрат-

дегидрогеназы из сердца свиньи на содержание связанных ионов

металла показал отсутствие значительных количеств Mg, Ca, Cr,

Mn, Fe, Со, Ni, Cu, Zn, Mo и Cd в этом ферменте [178а]. Возмож-

но, что ингибирование этого фермента CN- происходит в резуль-

тате образования аддукта НАД-цианид [170]. Ситуация, анало-

гичная вышеописанной для декарбоксилирования р-кетокислот не-

которыми окислительными декарбоксилазами, наблюдалась и для

металлзависимой изомероредуктазы, которая катализирует восста-

новительную конденсацию с алкильной миграцией как стадию в

ходе биосинтеза валина и изолейцина [179].

Этот фермент также катализирует НАДФН- и М

-зависимую изо-

меризацию а-окси-р-кетоизовалерата в а-ацетолактат, однако нет

доказательств участия а-ацетолактата в качестве промежуточного

соединения в реакции [179] и не определена также роль иона ме-

талла в этой реакции.

Ферменты, содержащие биотин как кофактор, катализируют

три родственные друг другу реакции. Биотинкарбоксилазы ката-

лизируют карбоксилирование а-кетокислот и ацильных производ-

ных кофермента А [180, 181]:

а-ацетолактат + НАДФН < > а,Р-диоксиизовалерат + НАДФ

(H)

5. ФЕРМЕНТЫ МЕТАБОЛИЗМА CO

5.1. Биотинсодержащие ферменты

Е—биотин

-f-

АТФ + HCOi"

Е—биотин~С O

+ АДФ + POJ- (12)

пируват

или

I пропионил-КоА

(13)

30—2451

466

Г лава

Метилмалонил-КоА-оксалоацетаттранскарбоксилаза катализирует

транскарбоксилирование между кетокислотами и ацильными про-

изводными кофермента А [182].

E—биотин + метилмалонил-КоА < >. E—биотин~С0

+ пропионил-КоА (14]

E—биотин~С0

+ пируват < > E—биотин + оксалоацетат (15)

Биотикдекарбоксилазы также катализируют декарбоксилирование

кетокислот и ацильных производных кофермента А [183, 184]:

'оксалоацетат пируват

E—биотин

-f-

{ или .< > E—биотин~С0

метилмалонил-КоА

или (16)

пропионил-КоА

E—биотин~С0

< > E—биотин+ CO

(17)

Для участия биотинкарбоксилаз в реакции синтеза, когда из АТФ

и НСОз образуется комплекс E — биотин~ CO

[уравнение (12)],

необходимо добавление M

+. Роль ионов металла в реакции (12)

будет рассмотрена в разд. 12, посвященном синтетазам.

Все три типа катализируемого биотинзависимыми ферментами

транскарбоксилирования а-кетокислот [реакции (13), (15) и (16)]

или ацилпроизводных кофермента А [реакции (13), (14) и (16)]

протекают через образование комплекса E — биотин ~ CO

. Пер-

вое указание на участие связанного с белком иона металла в био-

тинзависимом транскарбоксилировании кетокислот было сделано

на основании ЯМР-исследований пируваткарбоксилазы из пече-

ни цыпленка. Эти исследования пролили свет на роль ионов двух-

валентных металлов в отдельных стадиях реакций синтетаз [реак-

ция (12)] и показали присутствие связанной парамагнитной час-

тицы в ферменте, которая была идентифицирована как ион

марганца [185]. Дальнейшее изучение показало, что марганец яв-

ляется составным компонентом пируваткарбоксилазы и присутст-

вует в эквивалентных с биотином количествах [37, 185]. Следова-

тельно, пируваткарбоксилаза из печени цыпленка идентифициро-

вана и как первый металлофермент, содержащий марганец в

качестве природного иона металла, а также как первый металло-

биотиновый фермент [37, 185]. Впоследствии было показано, что

другие пируваткарбоксилазы, а также метилмалонил-КоА-окса-

лоацетаттранскарбоксилаза содержат связанные ионы металла

(табл. 14.1), а косвенные доказательства подтверждают, что свя-

занный ион металла может присутствовать в биотинзависимой

оксалатдекарбоксилазе [183]. Следовательно, ионы металлов, свя-

занные с белком, могут играть существенную роль в биотинзави-

симом транскарбоксилировании а-кетокислот. Хотя описаны окса-

латдекарбоксилазы, не содержащие биотина [28, 191], эти фер-

менты не проявляют каталитической активности без добавления

ионов двухвалентных металлов и, по-видимому, не катализируют

Металлоферменты

467

Таблица 14.1

Наличие связанных ионов металлов в различных биотинзависимых ферментах

Фермент

Источник

Связанный

ион металла

Литература

Пируваткарбоксилаза

Печень цыпленка

185

Печень цыпленка (цыплята,

лишенные Mn

Mg6

186

Печень индюка

187

Печень крысы

188

Печень теленка

Mg+Mn

187

Пекарские дрожжи

189

Метили а лони л-Ко

А- ок-

салоацетаттранскарбо-

ксилаза

Propionibacterium shermanii Co+Zn 190

Во всех случаях общее содержание связанного металла эквимолярно содержанию

биотина в ферменте, за исключением пируваткарбоксилазы из печени крысы.

® Пируваткарбоксилаза, выделенная из печени цыплят, выращенных при очень низкой

концентрации Mn, содержит Mn+Mg в том же соотношении, что и их содержание в корме.

стадию транскарбоксилирования, которая предшествует декар-

боксилированию [28].

Для объяснения роли ионов металла в декарбоксилировании и

биотинзависимом транскарбоксилировании оксалоацетата было

выдвинуто несколько предположений (см. рис. 14.3). На

основе данных по декарбоксилированию диметилоксалоацетата,

которое катализируется ионами M

+, Штейнбергер и Вестгеймер

[177] предложили механизм, применимый как для декарбокси-

лирования, так и для транскарбоксилирования кетокислот. В со-

ответствии с этим механизмом связывание иона металла карбо-

нилом и C-I карбоксилом кетокислоты стабилизирует енольный

продукт реакции (рис. 14.3, А). Предполагаемую структуру этих

комплексов подтверждает влияние добавок M

+ на ультрафиолето-

вые спектры некоторых кетокислот [193], однако другие доказа-

тельства [194] более согласуются с тем, что Мп

-оксалоацетат-

ный комплекс является С-1,С-4-дикарбоксилхелатным, а Mn

+ —

пируват — монодентатным комплексом, включающим в качестве

лиганда карбоксильную группу. Хотя последние исследования ок-

салоацетатдекарбоксилазы из мышц трески [195] и были интер-

претированы в соответствии с механизмом Штейнбергера — Вест-

геймера [196, 197], ни стереоспецифическое восстановление пиру-

вата в D-лактат [197], ни повышенная скорость обмена металь-

ных протонов пирувата [196], вызываемая присутствием фермента,

не исключает других механизмов.

30*

468

Г лава

Рис. 14.3. Возможная роль ионов металла в биотинзависимом транскарбоксили-

ровании |3-кетокислот.

А — механизм Штейнбергера—Вестгеймера [177], модифицированный для декарбоксилирова-

ния оксалоацетата; Б — предложенный Стилсом [198] механизм, объясняющий роль М

в биотинзависимом транскарбоксилировании; В — механизм, предложенный Милдваном и др.

[201], объясняющий роль связанного марганца в реакциях, катализируемых пируваткарбок-

силазой. Этот механизм объединяет особенности как механизма Штейнбергера—Вестгеймера,

так и механизма Стилса и показывает двойственную роль иона металла; Г—механизм, пред-

ложенный Брюсом и Хегарти [210] и основанный на предположении, что комплекс E — бао-

тин~С0

образует О-карбоксильное производное.

Металлоферменты.

469

Второй механизм, применимый только для катализа ионами

еталлов биотинзависимого транскарбоксилирования, был впер-

ые предложен Стилсом [198] (рис. 14.3,5). Возможность этого

[еханизма была продемонстрирована в исследованиях, которые

оказали, что ионы двухвалентных металлов замедляют декар-

оксилирование 1М-карбоксиимидазолона-2, аналога l'-N-карбокси-

>иотина (связанного промежуточного продукта ферментативной

еакции) [199] и ускоряют реакцию эфиров N-карбоксиимидазо-

юна-2 с нуклеофилами [200]. Хотя эффекты, наблюдаемые в этих

шдельных исследованиях, и должны приводить к транскарбокси-

[ированию, нет доказательств координации остатка l'-N-карбокси-

шотина с ионом металла, связанным с белком [201]. Титриметри-

(еские и ЯМР-исследования взаимодействия M

+ с d-биотином и

^которыми его аналогами указывают на роль атома серы в об-

эазовании комплекса M

+— биотин в растворе [202].

В настоящее время информация, полученная при прямом ис-

следовании такого рода ферментов, главным образом вытекает из

изучения ЯМР-спектров пируваткарбоксилазы из печени цыплен-

ка. Так как в активном центре этого фермента присутствует свя-

занный металл Mn

+, метод ЯМР является идеальным для изуче-

ния роли иона металла, как и было предсказано Кон [21]. Эти

исследования рассмотрены в работах [203, 204], здесь же приве-

дено только краткое их изложение. Изучение скоростей релакса-

ции для взаимодействия Mn

+ — протоны воды [76] (разд. 2.3)

показало, что в реакциях пируваткарбоксилазы [реакция (13)]

только субстраты и ингибиторы стадии транскарбоксилирования

заметно взаимодействуют со связанным марганцем. Этот харак-

тер участия марганца в реакции пируваткарбоксилазы подтвер-

ждается изучением влияния связанного иона металла на скорости

ядерной магнитной релаксации протонов пирувата и оксалоацета-

та. Расчеты расстояний Mn

+ — протоны (из 1 /Г

1ДГ

) и константы

сверхтонкого взаимодействия (из 1 /Т

2М

И \/Т

) продемонстри-

ровали образование мостиковых комплексов фермент — Mn

+ —

пируват [205] и фермент — Mn

+ — оксалоацетат [194]. Кинети-

ческие свойства этих мостиковых комплексов согласуются с их

участием в общей реакции [194, 205]. Однако неопределенность

времени корреляции (т

) при взаимодействии комплекса Mn

+ —-

субстрат с протонами не позволила приписать точную структуру

этим мостиковым комплексам. В результате предварительных ис-

следований сделано предположение, что при взаимодействии ме-

тилмалонил-КоА-оксалоацетаттранскарбоксилазы с пируватом об-

разуется мостиковый комплекс фермент — Со

+ — пируват [190].

Для образования мостиковых комплексов пируваткарбоксила-

за — Mn

+ — субстрат был предложен внешнесферный механизм

SNI [206], так как кажущаяся скорость образования этих ком-

плексов приблизительно равна кажущейся скорости отхода моле-

470

Г лава

кул воды из координационной области связанного марганца [194

205]. Это заключение было основано на предположении, что на

блюдаемый отрицательный температурный коэффициент для \/Т

или 1/Тц, означает, что тм доминирует в общей скорости релакса

ции. Однако и Кон [82], и Шерд и Брэдбури [76а] указывают н.

то, что отрицательный температурный коэффициент для IIT

(IIT

) может быть также результатом доминирования T

, что яв

ляется наиболее вероятным объяснением для наблюдаемых в этоь

случае низких энергий активации [37, 205]. Эти две возможное™

можно различить (разд. 2.3), так как доминирование тм характе

ризуется равенством между 1 /T

и 1 IT

, в то время как при до

минировании T

1 IT

превышает IIT

. Последние СРП-исследова

ния показали, что доминирование T

предпочтительнее, чем та

(как предполагалось ранее [37]), в парамагнитном влиянии иг

скорость релаксации протонов воды в присутствии пируваткар

боксилазы, поскольку IIT

значительно превышает 1 /T

при тем-

пературах от 0 до 40

C [207]. Таким образом, величина (1,0-

•10

±0,5-10

с-'), рассматривавшаяся ранее как 1/т

[37], яв-

ляется всего лишь нижним пределом этого параметра. Аналогично

значение 1 /T

метальных протонов пирувата в присутствии пиру-

ваткарбоксилазы повсеместно превышает \/T

в том же темпера-

турном интервале, в котором T

(более предпочтительное, чем

тм) доминирует в значениях 1 /T

[205]. Однако в комплексе пи-

руваткарбоксилаза — оксалоацетат при низких температурах и

высоких энергиях активации 1 IT

метиленовых протонов оксало-

ацетата приближается к 1 IT

-, в связи с этим выдвинуто предпо-

ложение, что в данном случае тм доминирует в 1 JT

при темпера-

турах ниже 20

C [194].

В результате этих и других исследований марганца, связанно-

го пируваткарбоксилазой, был предложен механизм катализа этим

металлом (рис. 14.3, В) [201], в котором соединяются особенности

механизмов Штейнбергера — Вестгеймера и Стилса (рис. 14.3, Л

и Б). В соответствии с этим механизмом как карбонильная груп-

па пирувата, так и l'-N-карбоксильная группа остатка карбокси-

биотина являются лигандами связанного марганца, что позволяет

иону металла в результате его электрофильных свойств облегчить

и уход протона от метильной группы пирувата, и образование кар-

бониевого иона из l'-N-карбоксибиотинильного остатка. Так как

при инкубации

Н-пирувата с пируваткарбоксилазой в отсутствие

других компонентов реакции [201] не освобождаются значитель-

ные количества трития, возможно, что уход протона и перенос

карбоксила протекают по согласованному механизму, изображен-

ному на рис. 14.3, В. Недавно были продемонстрированы два фак-

та, предсказанных на основании этого согласованного механизма.

Во-первых, наблюдался значительный изотопный кинетический

эффект /%н/&т = 4,2, во-вторых, изучение карбоксилирования хи-

Металлоферменты.

471

альных пируватов показало, что карбоксилирование протекает

обращением конфигурации, т. е. карбоксильная группа находит-

я в цис-положении к отщепляющимся протонам [208]. Для окон-

ательной оценки механизма, приведенного на рис. 14.3, В, необ-

одимо, однако, выяснить структуры мостиковых комплексов фер-

;ент — Mn

+ — пируват и фермент — Mn

+ — оксалоацетат.

Согласованный механизм (рис. 14.3,5) также предполагает,

то промежуточное карбоксилированное производное в реакциях

!иотинкарбоксилазы имеет структуру l'-N-карбоксибиотина, как

[ было установлено на основании экспериментов по улавливанию

: использованием диазометана [209]. Однако недавно это заклю-

[ение было подвергнуто сомнению Брюсом и Хегарти [210] на

>снове приведенных ими модельных исследований, которые пока-

1али, что уреидный кислород является лучшим нуклеофилом, чем

феидный азот. Механизм, изображенный на рис. 14.3, Г, предло-

женный на основе этих модельных исследований [210], должен

решить многие проблемы, с которыми столкнулись в предыдущих

механизмах биотинзависимого транскарбоксилирования. Кроме

гого, можно ожидать, что промежуточное О-карбоксильное произ-

водное при метилировании перегруппировывается в N-карбоксиль-

ное [210].

Таким образом, было однозначно продемонстрировано участие

связанного с белком иона металла в биотинзависимом транскар-

боксилировании кетокислот. Поэтому можно ожидать, что сходную

роль ион металла будет играть в аналогичных реакциях ацильных

производных кофермента А. Однако до сих пор не было получено

доказательств присутствия связанного с белком иона металла в

какой-либо из изученных ацетил-КоА-карбоксилаз [201], хотя в

этой области до сих пор не было проведено сколько-нибудь де-

тальных исследований. К тому же метилмалонил-КоА-оксалоаце-

таттранскарбоксилаза содержит, скорее всего, только 1 г-атом

связанного металла на остаток биотина [190], а не 2 г-атома, как

следовало бы ожидать в том случае, если ионы металла присутст-

вуют как в центре связывания ацил-КоА, так и в центре связыва-

ния кетокислоты [реакции (13) и (14)] [210а]. Эти исследования

содержат явный парадокс, так как дейтерообмен протекает более

медленно в метильных группах ацетил-КоА [211] и обычных аце-

тилтиоэфирах [212], чем в метальной группе пирувата в тех же

условиях [212], что указывает на меньшую степень активации тио-

эфиров. Однако возможно, что для реакций, катализируемых

ацил-КоА-карбоксилазами, степень активации метильных (или

метиленовых) групп, по которым протекает связывание CO

, мо-

жет и не играть роли, поскольку для некоторых ферментов не

наблюдалось первичного кинетического изотопного эффекта [213,

214], хотя карбоксилирование и протекает с обращением конфи-

гурации [213].

472

Г лава

5.2. Ферменты карбоксилирования

фосфоенолпирувата

Описаны три фермента, катализирующих гомологичные peai

дии карбоксилирования ФЕП в присутствии иона двухвалентног

металла, например Mn

ФЕП + НДФ + CO

оксалоацетат + НТФ (U

ФЕП + POf- + CO

<—>- оксалоацетат + P

- (IS

ФЕП + НСОз • оксалоацетат + POJ- (2С

Все эти реакции заключаются в нуклеофильной атаке по фосфо

рильной группе ФЕП, в таутомерном сдвиге двойной связи i

в присоединении электрофила к атому С-3 ФЕП [8]. Различи!

состоит в природе используемого акцептора фосфорила, которьи.

может быть НДФ (ФЕП-карбоксикиназа) [реакция (18)] [215]

POiJ (ФЕП-карбоксифосфотрансфераза) [реакция (19)] [216]

или H

O (ФЕП-карбоксилаза) [реакция (20)] [217]; могут также

быть различными карбоксилирующие агенты (CO

или НСОз]

[218, 219]. ФЕП-карбоксилирующие ферменты также гомологич-

ны с реакцией, катализируемой пируваткиназой [220]:

ФЕП + АДФ + H+ т—>• пируват + АТФ (21)

Эту гомологию подчеркивает и тот факт, что в отсутствие CO

ФЁП-карбоксифосфотрансфераза катализирует фосфоролиз ФЕП

[221]:

ФЕП+ POJ-+H+ •<—>- пируват + P

- (22)

Степень гомологичности проиллюстрирована изучением механиз-

ма действия этих ферментов [222]. Во-первых, результаты изуче-

ния начальных скоростей пируваткиназы [35, 38, 223] и ФЕП-кар-

боксикиназы [222, 224] согласуются с тем фактом, что для этих

двух ферментов безразличен порядок добавления субстратов и

+. Этот вывод подтверждается и изучением связывания, в ре-

зультате которого показано образование кинетически важных

комплексов ФЕП, M

+ и НДФ для пируваткиназы и ФЕП-карбо-

ксикиназы [37, 55, 222], а также комплексов Mn

+ с ФЕП-карбо-

ксилазой [222]. И пируваткиназа [225], и ФЕП-карбоксикиназа

[222] также образуют комплексы более высокого порядка типа

E — МНДФ~ — M

+, которые проявляют каталитические свойст-

ва, аналогичные свойствам комплекса E — МНДФ

. Во-вторых,

комплексы E — Mn

+, образованные ФЕП-карбоксикиназой, пиру-

ваткиназой или ФЕП-карбоксилазой, заметно увеличивают влия-