Шендрик А.Н. Химия белка. Структура, свойства, методы исследования

Подождите немного. Документ загружается.

4.6.4.1 Процедура хроматографирования белков методом ионообменной

хроматографии…………………………………………………………………..….256

4.6.5 Аффинная хроматография………………………………………………...…261

4.7 Масс-спектрометрия электронного удара…………………………………….266

4.7.1 Требования к пептидам анализируемым методом масс-спектрометрии....266

4.7.2 Методы подготовки пробы для масс-спектрометрии…………………...…267

4.7.3 Общие принципы масс-спектрометрического определения

аминокислотной последовательности…………………………………………….270

4.7.4 Фрагментации первичных молекулярных ионов пептидов…………….....271

4.7.5 Введение в пептид дейтериевой метки…………………………………..…274

4.8 Электронная микроскопия……………………………………………………..275

4.8.1 Подготовка и “окрашивание” образцов…………………………………….278

4.8.1.1 Оттенение………………………………………………………………...…279

4.8.1.2 Трехмерная электронная микроскопия………………………………...…281

4.8.1.3 Молекулярная электронная микроскопия……………………………...…282

4.9 Рентгеноструктурный анализ………………………………………………….284

4.9.1 Электромагнитные волны и их свойства……………………………………285

4.9.2 Физические основы РСА……………………………………………………..287

4.9.3 Характеристическое рентгеновское излучение…………………………….288

4.9.4 Дифракция рентгеновских лучей на кристаллах………………………...…289

4.9.5 Проблема начальных фаз в РСА…………………………………………….294

4.9.6 Особенности РСА белков…………………………………………………....296

ГЛАВА 5 Синтез пептидов……………………………………………………...…308

5.1 Методы защиты аминогруппы……………………………………………...…310

5.1.1 Защитные группы уретанового типа……………………………………..…314

5.1.2 Алифатические защитные группы уретанового типа…………………...…316

5.1.3 Защитные группы алкильного типа………………………………………....318

5.2 Защита карбоксильной группы……………………………………………..…320

5.2.1 Этерификация……………………………………………………………...…320

5.2.2 Гидразидная группа……………………………………………………….....323

5.2.3 Защита карбоксильной группы путем солеобразования…………………..324

5.3 Методы синтеза пептидов……………………………………………………..324

5.3.1 Метод смешанных ангидридов…………………………………………...…324

5.3.1.1 Хлорангидридный метод…………………………………………………..324

5.3.1.2 Смешанные ангидриды с моноэфирами угольной кислоты…………….325

5.3.2 Азидный метод…………………………………………………………….....325

5.3.3 Пептидный синтез с использованием активированных эфиров…………..327

5.3.4 Пептидный синтез с использованием соединений с

кратными С-N и C-C связями……………………………………………….……..329

5.3.4.1 Карбодиимиды……………………………………………………………...329

5.3.4.2 Цианамиды………………………………………………………………….329

5.3.4.3 Этоксиацетилен……………………………………………………….…….330

5.3.5 Активированные соединения ряда гетероциклических амидов……..……331

5.3.5.1 Имидазолидный метод……………………………………………………..331

5.3.6 Активация путем образования производных оксазола…………………....332

5.3.7 Синтез пептидов путем активирования аминогруппы…………………….333

5.3.8 Получение пептидов с помощью ферментов……………………………....334

5.4 Рацемизация аминокислот в пептидном синтезе…………………………….334

Литература……………………………………………………………………….…336