Новиков Д.К. (и др.). Медицинская микробиология

Подождите немного. Документ загружается.

331

Чувствителен к формалину, УФ-лучам. Имеют более длительный

цикл репродукции; отмечается строгий тропизм к паренхиматозным

клеткам печени; репродукция в культуре клеток не сопровождается

ЦПД.

Патогенез. Источник инфекции – больной человек. Путь пере-

дачи – фекально-оральный, чаще водный. Инкубационный период ва-

рьирует от 15 до 50 дней. Вирус с пищей, водой попадает в желудоч-

но – кишечный тракт, где репродуцируется в эпителиальных клетках

слизистой оболочки тонкой кишки и регионарных лимфатических уз-

лах. Далее возбудитель проникает в кровь, где он обнаруживается в

конце инкубационного периода и в первые дни заболевания.

Основная мишень действия вируса гепатита А – клетки печени,

в цитоплазме которых происходит репродукция. Гепатоциты могут

поражаться натуральными или естественными киллерами (ЕК), кото-

рые в активированном состоянии взаимодействуют с гепатоцитами,

вызывая их разрушение. Активация ЕК происходит в результате их

взаимодействия с интерфероном, индуцированным вирусом. Пораже-

ние гепатоцитов приводит к нарушению углеводного, белкового, пиг-

ментного обмена и сопровождается: желтухой, повышением фермен-

тов (альдолазы, аспартатаминотрансферазы).

Далее возбудитель с желчью попадает в просвет кишечника и

выделяется с фекалиями, в которых отмечается высокая концентрация

вируса в конце инкубационного периода и в первые дни болезни (до

желтухи).

Иммунитет после заболевания формируется пожизненный,

обусловлен вируснейтрализирующими антителами секреторными

IgA и клетками иммунной памяти. IgM исчезает из сыворотки че-

рез 3-4 месяца после начала заболевания, а IgG сохраняется года-

ми. 80% населения к 40 годам имеют АТ. Чаще болеют дети в воз-

расте до 14 лет.

Лабораторная диагностика

Вирусные частицы в фекалиях выявляют методом иммуноэлек-

тронной микроскопии, РИА, ИФА, ПЦР.

Чаще проводят серологический диагноз: определение Ig M в те-

чение первых 3-6 недель в сыворотке больного путем постановки

ИФА.

Специфическая профилактика. Применяют вакцину против ге-

патита А «Хаврикс», которая представляет собой стерильную суспен-

зию, содержащую вирус гепатита А (штамм НМ 175), инактивирован-

ный формальдегидом и адсорбированный на гидроксиде алюминия.

Вакцинный штамм вируса культивирован в диплоидных клетках че-

ловека MRS 5. Первичную вакцинацию проводят детям начиная с 12

332

месяцев, вводят одну дозу вакцины (0,5 мл), через 6-12 месяцев про-

водят ревакцинацию. Вакцина обеспечивает иммунитет не менее, чем

на 20 лет.

Для лечения используют гаммаглобулин.

20.1.4.3. Риновирусы

В настоящее время выделено более 100 серологических вариан-

тов, вызывающих ОРВИ и известных как «простудные вирусы». Их

разделяют на две большие подгруппы по способности к репродукции

в клетках приматов: вирусы группы Н размножаются и вызывают ци-

топатические изменения в ограниченной группе диплоидных клеток,

человеческого эмбриона и клетках Hela; вирусы группы М размно-

жаются и вызывают цитопатические изменения в клетках почек обе-

зьян и клетках Hela.

Антигенная структура. По структуре единственного типоспецифи-

ческого антигена выделяют 113 иммунологически разнородных групп

(рис.25). У человека риновирусная инфекция вызывает выработку

нейтрализующих АТ и состояние невосприимчивости на период, равный

двум годам. Иммунитет эффективен только против гомологичного

штамма.

Эпидемиология. Риновирусы распространены повсеместно,

подъем заболеваемости отмечается в холодный период. Основной

путь передачи – воздушно-капельный, резервуар – больной человек.

Клинические проявления. Инкубационный период – 2-5 суток, у

человека заболевание протекает в виде ОРВИ, реже бронхопневмо-

нии. У детей инфекции сопровождаются лихорадкой, у взрослых

подъем температуры наблюдается редко. Продолжительность заболе-

вания обычно составляет 7 суток.

Осложнения: хронический бронхит, синусит и воспаление сред-

него уха.

Лабораторная диагностика. Для выделения вируса используют

культуры клеток, которые заражают слизью носовых ходов. Индика-

ция по ЦПД, идентификация в РН, ПЦР.

20.1.4.4. Род Aphtovirus, вирус ящура

Афтовирусы представлены 7 серотипами вируса ящура, вызы-

вающего тяжелые эпидемии крупного рогатого скота и свиней.

Возбудитель впервые был выделен Леффлер и Фрош (1898). Чело-

век заболевает после контакта, а также при употреблении в пищу

сырого молока или плохо прожаренного мяса больных животных.

В некоторых продуктах (масло, жиры) вирусы могут сохраняться

до двух месяцев. Заболевание протекает сравнительно легко: инку-

333

бационный период составляет 2-18 суток. Далее на слизистой обо-

лочке полости рта появляется везикулярная сыпь. Возможно пора-

жение миокарда, паренхиматозных органов.

Возбудитель быстро распространяется при эпидемиях у скота.

Лабораторная диагностика включает выделение возбудителя в

культурах клеток и обнаружение специфических АТ в парных сыво-

ротках в РН и РСК. Также возможна постановка биологической про-

бы заражением морских свинок в кожу стопы: через 24-48 часов в ме-

сте заражения и в полости рта появляются везикулы.

20.1.5. Семейство реовирусов (Reoviridae)

Семейство Reoviridae включает:

I род Orthoreovirus – реовирусы человека 1, 2, 3 типов (серова-

риантов), респираторные энтеропатогенные вирусы сиротки.

II род – Rotavirus (от слова «колесо») – вирусы человека и жи-

вотных, вызывают гастроэнтериты, диареи у детей, подростков, сол-

дат.

III род Coltivirus (2 серотипа).

IV род Orbivirus (100 серотипов).

Вирионы имеют сферическую форму, диаметром 60-80 нм, ге-

ном образован двунитевой РНК, состоящей из 10-12 сегментов (рота-

вирусы имеют 11 сегментов). Геномная РНК и РНК-полимераза обра-

зуют сердцевину вириона. Вирусы имеют кубический тип симметрии

и состоят из 132 капсомеров.

В составе внутреннего и наружного капсидов обнаружено до 8

отдельных белков. Один их белков наружного капсида ответственен

за связывание со специфическим клеточным рецептором, является

гемагглютинином, придает типовую специфичность. С помощью дру-

гого белка вирус проникает в клетку хозяина.

20.1.5.1. Ротавирусы (Род Rotavirus)

Название рода связано со своеобразием морфологии (rota – ко-

лесо). Возбудитель был впервые обнаружен в 1973 г. Bischop в эпите-

лиальных клетках слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки

детей с острым гастроэнтеритом.

Морфология и свойства. Вирионы ротавирусов при электронно-

микроскопическом исследовании имеют вид колес диаметром 70 нм с

круговым ободком по периферии и отходящими от него внутрь спицами.

Они окружены наружным и внутренним капсидом, внутри которого со-

держится двунитчатая фрагментированная РНК (состоит из 11 сегмен-

тов), в сердцевине, кроме геномной РНК, располагается вирионная РНК-

полимераза. В составе вириона имеется 8 белков (VP1-VP8). Имеют ку-

334

бический тип симметрии, нет липидов – устойчивы к эфиру и детерген-

там.

По антигенным свойствам ротавирусы разделены на 4 серотипа.

Гликопротеин наружного капсида определяет гемагглютинирующие

свойства и типовую антигенную специфичность (VP-3). VP-6 белок

придает групповую специфичность, по групповым антигенам ротави-

русы подразделяются на 6 серогрупп: A, B, C, D, E, F.

Культивирование. Вирусы не культивируется в курином эмбри-

оне и организме экспериментальных животных. При заражении неко-

торых культур ткани (клетки почек зеленых мартышек) вирусы в них

репродуцируется не полностью, поскольку в цитоплазме собираются

лишь вирусные белки без продукции вирионов.

Устойчивы к факторам окружающей среды: эфиру, хлороформу,

ультразвуку, протеолитическим ферментам, при комнатной темпера-

туре сохраняются 7 месяцев.

Патогенез. Источник инфекции – больные люди с острой бес-

симптомной формой инфекции, а также вирусоносители.

Механизм заражения – фекально-оральный. Наиболее опасны

больные в первые 3-5 дней заболевания, когда в фекалиях накаплива-

ется максимальное количество вирусов.

Вирус размножается в клетках эпителия ворсинок тонкого ки-

шечника. Происходит разрушение клеток, что приводит к нарушению

пищеварительной и всасывательной функции тонкого кишечника,

снижению количества ферментов, уровня дисахаридов (мальтозы, са-

харозы, лактозы) и нарушению процесса всасывания простых сахаров.

Переходя в толстый кишечник, моно- и дисахариды создают повы-

шенное осмотическое давление, что препятствует всасыванию воды

из кишечного содержимого и приводит к поступлению в кишечник

воды из тканей. Усиливается перистальтика, возникает выраженная

диарея.

Клиника. Инкубационный период от 15 часов до 3-5 дней. Рота-

вирусы вызывают в 60% случаев острый гастроэнтерит у детей в воз-

расте от 1 года до 6 лет, а также внутрибольничные вспышки гастро-

энтерита в палатах новорожденных. Начало острое, появляется понос,

рвота, боли в животе, испражнения обильные, водянистые пенистые,

ярко-желтого цвета. По тяжести различают: легкие, среднетяжелые и

тяжелые формы в зависимости от выраженности диареи.

Лабораторная диагностика. Вирусные антигены в фекалиях опре-

деляют в ИФА, радиоиммунным методом, в реакции иммунофлуорес-

ценции. Электронной или более чувствительной иммуноэлектронной

микроскопией вирус выявляют в фекалиях больного через 7-8 дней от

начала заболевания (в 1 г фекалий обнаруживается 10

вирусных ча-

стиц).

335

Серодиагностика. Ставят РН, РСК, РТГА, ИФА с парными сы-

воротками.

Специфическая профилактика. Используется убитая вакцина.

Лечение ротавирусной диареи должно быть направлено на

устранение дегидратации, восстановление и поддержание нормально-

го водносолевого обмена.

20.1.6. Семейство рабдовирусов (Rhabdoviridae)

Семейство Rhabdoviridae включает более 60 вирусов, патоген-

ных для млекопитающих, рыб, насекомых. В семействе выделяют два

рода: Vesiculovirus и Lyssavirus. Наибольшую опасность для человека

представляет вирус бешенства.

Рабдовирусы имеют пулевидную форму, размером 75-180 нм;

спиральный тип симметрии, в состав генома входят однонитевая не-

фрагментированная (–)РНК. Наружная оболочка состоит из двойного

липидного слоя, включающего внешние поверхностные гликопротеино-

вые структуры. Мембрану образуют поверхностный гликопротеин (G) и

два негликозилированных белка (М

и М

). Нуклеокапсид дополняют

многочисленные копии протеина сердцевины (NP) и несколько копий

вирусной транскриптазы, репликативный цикл проходит в цитоплазме

клеток.

20.1.6.1. Вирус бешенства (Род Lyssavirus)

Бешенство – острая зоонозная инфекция ЦНС, возникающая

после укусов бешеных животных, сопровождающаяся дегенерацией

нейронов головного и спинного мозга. Без своевременно начатого по-

сле контакта с бешеным животным лечения летальность заболевания

составляет 100%.

Заболевание распространено повсеместно за исключением ост-

ровных государств.

Возбудитель относится к роду Lyssavirus (lyssa – бешенство).

Вирусная этиология бешенства доказана в 1903 г. П. Ремленже.

Различают следующие варианты вируса бешенства: типич-

ный, уличный вирус бешенства, который вызывает образование

специфических включений в цитоплазме – телец Бабеша-Негри;

вирус африканского собачьего бешенства; вирус американского

бешенства летучих мышей; вирус дикования оленей, песцов, лис;

фиксированный вирус бешенства (подвергнутый многократному

пассированию на лабораторных животных и не способный пора-

жать периферические нервы).

В 1885 г. Л. Пастер экспериментально обосновал способ ат-

тенуации, он провел 133 пассажа дикого, уличного вируса бешен-

336

ства через мозговую ткань кроликов и на 134 пассаже отметил из-

менение свойств исходного штамма – он утратил патогенность для

собак и человека, инкубационный период сократился до 5 дней, не

давал образование телец Бабеша-Негри, поэтому финкс-вирус ис-

пользовали в качестве вакцины.

Антигенная структура. Все варианты вируса имеют один анти-

генный тип. Внутренний нуклеопротеин обусловливает групповую

специфичность, выявляется в РСК, реакции преципитации в геле, им-

мунофлюоресценции. Гликопротеин внешней оболочки придает ти-

повую специфичность (рис.26), выявляется в реакции нейтрализации

и РТГА.

Культивирование. Вирус бешенства культивируют в мозговой

ткани белых мышей, сирийских хомяков, кроликов, крыс, овец, в ди-

плоидных клетках человека. У зараженных животных развиваются

параличи конечностей, затем они погибают. Вирус может быть адап-

тирован к первичным культурам тканей и куриным эмбрионам. В ци-

топлазме клеток обнаруживаются ацидофильные включения – тельца

Бабеша-Негри (впервые описаны В. Бабешем (1892) и А. Негри

(1903). Они являются специфическими для данного заболевания.

Резистентность. Вирус бешенства быстро погибает под дей-

ствием прямых солнечных лучей, УФ-лучей, фенола, хлорамина, йо-

да, формалина, при 56

С инактивация наступает в течении 60 минут,

при 100

С за 1 минуту. Длительно сохраняется при –20

С, в условиях

лиофилизации сохраняется годами.

Патогенез. Бешенство – инфекционное зоонозное заболева-

ние, которое возникает после укуса человека бешеными животны-

ми (лисы, шакалы, волки, летучие мыши, собаки, кошки, рыси). В

настоящее время заражение чаще всего происходит от лис и кошек.

Вирус передается при укусах и попадании слюны на поврежденные

кожные покровы и слизистую оболочку. В месте входных ворот

вирус остается несколько дней.

Первичная репродукция происходит в клетках мышечной и

соединительной ткани на месте укуса, а затем вирусные частицы

достигают окончаний чувствительных периферических нервов и

передвигаются по осевым цилиндрам и периневральным простран-

ствам (до 3 мм в час), поражая нейроны спинного и головного моз-

га, в том числе нервные узлы некоторых железистых органов, осо-

бенно слюнных желез (рис.27).

Происходит демиелинизация белого вещества, т.е. идет пере-

стройка мозговой ткани в связи с изменением в ней количества мие-

лина. Вирус репродуцируется в нейронах и в результате в цитоплазме

появляются тельца Бабеша-Негри, которые содержат вирусные нук-

337

леокапсиды. Особенно интенсивно поражаются нейроны аммонова

рога продолговатого мозга, клетки Пуркинье мозжечка, что ведет к

глубокому расстройству ЦНС.

Клинические проявления. Инкубационный период варьирует и

зависит от вирулентности штамма, места укуса, его массивности, от

различной скорости продвижения вируса по нервным стволам.

Наиболее опасны укусы в лицо, голову, т.к. в этом случае

наблюдается наиболее короткий инкубационный период (7-10 дней).

При укусах в нижние конечности инкубационный период длится до

1,5 месяцев. Длительность инкубационного периода при бешенстве

может колебаться от 7 дней до нескольких месяцев. В связи со спо-

собностью вируса бешенства персистировать в организме человека,

оставаясь не выявленным иммунной системой, может происходить

активация возбудителя под воздействием стрессовых факторов (хи-

рургического вмешательства, электрического разряда и др.). наряду с

инкубационным преиодом в несколько лет и затяжным клиническим

течением (от 3 недель до нескольких месяцев), описаны случаи, когда

длительность заболевания сокращалась до одного дня.

Продромальный период продолжается 2-4 дня. Основные симп-

томы в этой стадии заболевания: головная боль, тошнота, рвота, по-

вышение температуры тела, изменение кожной чувствительности у

входных ворот инфекции.

Вследствие поражения нервной системы отмечаются слезотече-

ние, расширение зрачков, потливость, обильное слюноотделение. У

больного отмечается болезненность при глотании, появляется чувство

страха, особенно при виде воды – водобоязнь (hydrophobia), что со-

провождается судорогами глотательных и дыхательных мышц. Про-

вокация повторных приступов наступает под влиянием незначитель-

ного дуновения ветра – аэрофобия, яркого света – фотофобия, гром-

кого разговора – акустикофобия; появляется агрессивность, буйство, в

финальной стадии параличи мышц конечностей, языка, лица. Смерть

наступает через 3-5 дней от начала заболевания от паралича дыха-

тельного и сосудодвигательного центров.

Лабораторная диагностика

Вирусоскопический метод (постмортальный), основан на обна-

ружении специфических ацидофильных включений телец Бабеша-

Негри в цитоплазме клеток аммонова рога, продолговатого мозга,

мозжечка. Готовят гистологические препараты и окрашивают по ме-

тоду Манна, Туревичу, Муромцеву.

Выявление вирусного антигена в пораженных тканях и в слюн-

ных железах проводят с помощью реакции иммунофлюоресценции,

ПЦР, ИФА.

338

Биологический метод проводят при отрицательных результатах

вирусоскопии. Материал – эмульсию мозга, слюну вводят внутрице-

ребрально белым мышам или кроликам. Они быстро погибают и при

вскрытии обнаруживают тельца Бабеша-Негри. Для идентификации

вируса ставят реакцию нейтрализации на белых мышах, ПЦР, ИФА.

Серологический метод диагностики используют только для

определения уровня иммунитета у людей и животных после вакцина-

ции, ставят РН. ИФА, РИА.

Профилактика

Неспецифическая – уничтожение бродячих собак, отстрел вол-

ков; специфическая – вакцинация.

Основой для вакцинных препаратов является штамм фикс-

вируса бешенства, полученный Л. Пастером после 133 пассажей

уличного вируса через мозговую ткань кроликов, который утратил

патогенные свойства для собаки и человека после высушивания и не

давал образования телец Бабеша-Негри. Использовали различные

мозговые вакцины из этого штамма, но они вызывали осложнения –

поствакцинальные аллергические энцефалиты.

В настоящее время применяется инактивированная культу-

ральная вакцина, полученная в культуре клеток почек сирийского хо-

мячка (на основе фикс-вируса бешенства) из штамма Внуково-32,

инактивированная ультрафиолетовыми лучами. Она менее реактоген-

на. При вакцинации в организме синтезируются вируснейтрализую-

щие антитела, которые обладают протективным действием до про-

никновения возбудителя в клетки ЦНС. Антирабическую вакцину

вводят внутримышечно в дельтовидную мышцу сразу после укуса, на

3-й, 7-й, 30-й и 90-й день. Детям вводят вакцину в мышцу бедра.

Разработаны вакцины, полученные методом генной инженерии.

При множественных укусах опасной локализации (голова, шея,

верхние конечности) вводят паралельно с вакциной гетерологичный

(лошадиный) либо гомологичный антирабический иммуноглобулин.

В качестве медикаментозной химиопрофилактики бешенства назна-

чают рифампицин.

20.1.6.2. Вирус везикулярного стоматита (Род Vesiculovirus)

Заболевание лошадей, крупного рогатого скота и свиней, ино-

гда людей, протекающие у них доброкачественно. Выделяют два ан-

тигенных варианта вируса. По эпидемиологии и экологии – типичный

арбовирус. Переносчики – различные комары, в организме которых

он размножается.

Клинически заболевание проявляется везикулярными высыпа-

ниями на слизистой оболочке рта, десен, глотки.

Лабораторная диагностика проводится по выделению вируса из

отделяемого везикул в куриных эмбрионах и культурах клеток.

339

Для идентификации ставят РИФ, РСК, ИФА, РИА.

Лечение симптоматическое.

20.1.7. Семейство тогавирусов (Togaviridae)

Семейство Togaviridae (toga – плащ, накидка) включает пред-

ставителей группы арбовирусов, которые передаются через укусы

членистоногих (комаров, клещей и др.). Обязательным условием при-

надлежности к арбовирусам является доказанная биологическая

трансмиссия определенному теплокровному хозяину и кровососущим

членистоногим.

Необходимо обязательно заражение переносчика (членистоно-

гого) на теплокровном инфицированном хозяине с последующей ре-

продукцией вируса в организме переносчика и передачей его через

определенный инкубационный период восприимчивому хозяину при

кровососании.

Арбовирусы – возбудители облигатно-трансмиссивных вирус-

ных болезней, то есть заболеваний, в жизненном цикле возбудителей

которых обязательно присутствовие членистоногого переносчика.

В составе семейства входятболее 90 вирусов. Для человека па-

тогенны представители 2-х родов: альфавирус, рубивирус, который не

относится к арбовирусам.

К трансмиссивным зоонозам вирусной природы, которые

встречаются в Беларуси относятся клещевой энцефалит, лихорадка

Западного Нила, лихорадка Синдбис, Тахиня и др.

Структура и свойства. Все тогавирусы содержат (+)РНК, ли-

нейную, однонитевую, обладающую инфекциозностью. Они имеют

сферическую форму с диаметром частиц 60-65 нм, кубический тип

симметрии, содержат группоспецифический антиген, который свя-

зан с нуклеокапсидом и видовой, типоспецифический антиген вхо-

дит в состав гликопротеинов внешней оболочки и является ге-

магглютинином. Вирусы содержат липиды в составе суперкапсида,

поэтому чувствительны к эфиру.

Культивирование. Тогавирусы хорошо размножаются в желточ-

ном мешке куриного эмбриона, культурах клеток, где вызывают ЦПД

в виде частичной дегенерации монослоя, и в организме эксперимен-

тальных животных при внутримозговом способе заражения. У живот-

ных отмечается поражение ЦНС, развиваются параличи конечностей,

заболевание заканчивается гибелью животных.

Резистентность. Тогавирусы чувствительны к эфиру и другим

детергентам, а также к формалину, низким значениям РН, ультра-

фиолетовому облучению, инактивируются при 56

С в течение 30

340

минут. Длительно сохраняются в замороженном и лиофилизиро-

ванном состоянии.

20.1.7.1. Альфавирус

Род альфавирусов включает 26 видов, из них 12 патогенны для

человека. Основные возбудители – вирусы восточного американского

энцефаломиелита лошадей, западного американского энцефаломие-

лита лошадей, венесуэльского энцефаломиелита лошадей, Семлики,

Синдбис, карельской лихорадки, Чикунгунья.

20.1.7.2. Вирус краснухи (Род Rubivirus)

Вирус краснухи относится к роду Rubivirus. Структура и хими-

ческий состав такие же, как у всех тогавирусов.

Антигены: нуклеопротеин, связан с капсидом, выявляют в РСК;

наружный антиген, связан с суперкапсидом, выявляют в реакции ге-

магглютинации.

Свойства. Вирус обладает гемагглютинирующей, гемолитиче-

ской и нейраминидазной активностью. Размножается в первичных и

перевиваемых культурах ткани, где дает включения в цитоплазме кле-

ток. ЦПД возникает непостоянно.

Вирус неустойчив во внешней среде, легко разрушается под

действием УФ лучей и многих химических веществ.

Патогенез. Краснуха – высококонтагиозная инфекция, рас-

пространена повсеместно, чаще болеют невакцинированные дети 3-

6 лет, но могут болеть и взрослые. Источник инфекции – больной

человек и вирусоноситель. Входными воротами для возбудителя

является слизистая оболочка верхних дыхательных путей. После

заражения воздушно-капельным путем вирус попадает в лимфати-

ческие клетки шейных, затылочных, заушных лимфоузлов, в кото-

рых происходит первичная репродукция вируса. Далее вирус про-

никает в лимфу и кровь и разносится по организму. При заражении

беременной может поражать плод (рис. 28).

Клиника. Продолжительность инкубационного периода состав-

ляют 11-22 дня. Характерные симптомы болезни: повышение темпе-

ратуры тела, мелкопятнистая несливающаяся сыпь розового цвета

(ruber – красный) по всему телу, которая возникает на неизмененном

фоне кожи; отмечается припухание заднешейных лимфатических уз-

лов, могут быть боли в суставах, мышцах. Осложнения – энцефалиты.

Возможно внутриутробное заражение от матери плода, так как

вирус обладает эмбриотоксическим действием. Он адсорбируется на

клетках эмбриональной ткани и вызывает пороки развития и гибель

плода. Отмечаются: пороки сердца, поражение органа зрения, пора-

жение органа слуха, поражение костей черепа. При инфицировании