Эглинтон Дж., Мэрфи М.Т.Дж. (ред.) Органическая геохимия

Подождите немного. Документ загружается.

предусматривает образование основной структуры, содержащей двойные

связи, кислые группы ОН и линейно расположенные скелетные элементы

фенилпропанового типа (C

- G

)

При окислении конечных цепей будут образовываться СООН-группы.

Кроме того, в результате деметилирования возможно образование элементов

о-диоксибензола, которые могут затем окисляться до хинонов, способных

к реакциям конденсации как в присутствии, так и при отсутствии амино-

соединений. Конечный продукт будет обладать уже небольшим сходством

с первоначальной молекулой лигнина.

В последние годы лигнинная теория подверглась существенным изме-

нениям. По современным представлениям гумусообразование является дву-

стадийным процессом, включающим распад всех компонентов растений,

в том числе и лигнина, на простые мономеры и полимеризацию мономеров

в высокомолекулярные полимеры. Водоросли, лишайники и мхи, которые

не содержат лигнина, также дают начало гуминовым веществам.

Большинство исследователей в настоящее время отдает предпочтение

биосинтетическим схемам, в основе которых лежит окислительная полимери-

зация фенольных составляющих. В качестве источников фенолов принима-

ются лигнин, дубильные вещества и компоненты клеток микроорганизмов.

В. Флейг [12] предложил следующую схему синтеза гуминовых кислот.

1. При гумификации растительных остатков лигнин высвобождается

от связи с целлюлозой и подвергается окислительному расщеплению с обра-

зованием простейших структурных единиц.

2. Боковые цепи этих структурных единиц окисляются, происходит

деметилирование, и образующиеся многоатомные фенолы под воздействием

полифенолоксидазы превращаются в хиноны.

3. Хиноны, как получающиеся из лигнина, так и синтезированные

микроорганизмами, реагируют с азотистыми соединениями, образуя темно-

окрашенные полимеры.

Ниже представлена схема образования гуминовых веществ при конден-

сации фенолов с аминокислотами на примере реакции между пирокатехи-

ном и глицином.

М. М. Кононова [3] при изучении процессов гумификации раститель-

ных остатков использовала комбинацию гистолого-микроскопических и

химических методов. Автор установил, что гуминовые вещества при воздей-

ствии на растительные ткани целлюлозных микробактерий образуются до

начала разложения лигнина. Ф. Паули [13] также наблюдал синтез гуми-

L J-C-CH=CH

J J-C-CH=CH-L J-C-CH=CH-

Il . Il

о о

'392

он

Л/'

I 1

ОН NH

-CH

-COOH

4Н

+ 4е

Конденсация промежуточных

продуктов реакции

Буроокр ашенные

азотистые

полимеры

Il п NH

-CH

-COOH

<у —^

COOH

Л/

У/

N-CH

-COOH

ОН

А/

К/

COOH

ОН CH-COOH

NII

Чч/

•N

CHO-COOH

-COOH

- COOH

новых веществ при воздействии микроорганизмов на растительные ткани,

не содержащие лигнина.

По мнению Р. Свейби и Дж. Ледда [14], молекулы гуминовых веществ

образуются из свободных радикалов (хинонов), получающихся фермента-

тивным путем внутри отмерших растительных или микробиальных клеток.

Однако автолитические ферменты функционируют только до тех пор, пока

не будут разрушены микробами клеточные стенки.

С середины прошлого столетия продолжает существовать гипотеза,

согласно которой в качестве источника образования гуминовых веществ

принимаются углеводы. Предполагается, что происходящие при этом реак-

ции аналогичны протекающим во время образования буроокрашенных поли-

меров при конденсации Сахаров и аминов (реакция Мейяра).

H-C=O

(CHOH)

Альдоза в

альдегидной

форме

R-N-H

(HCOH)

N-замещенный

глюкозиламин

RNH

+H+ ,

R-N-H

H-C-OH

(CHOH)

Продукт

присоеди-

нения

-R-N-H

нсюн

(HCOH)

CIi

Катион осно-

вания Шиффа

R-N

(CHOH)

Основание

Шиффа

R-N-H

HC-

(CHOH)

-H+

сон

(HCOH)

-I

Енольная

форма

N-замещенный

глюкозиламин

R-N-H

—> C=O

(HCOH)

N-замещенная

1-амино-1-

дезокси-2-

. кетоза, кето-

форма

Перегруппировка Амадори

Буроокрашенные азотис-

тые полимеры и сополи-

меры "

Дегидратация

Распад

Расщепление

'393

Основным возражением против этой гипотезы является незначительная

скорость реакции конденсации. Однако резкая смена окружающих условий

(замораживание и оттаивание, увлажнение и высушивание), а также при-

сутствие минеральных веществ, обладающих каталитическими свойствами,

могут способствовать конденсации. В древних отложениях фактор времени

играет меньшую роль. Ф. Стивенсон и С. Тило [15] нашли, что в некоторых

глубоководных морских отложениях количество органического азота, при-

сутствующего в форме аминокислот, уменьшается с увеличением возраста.

По мнению авторов, это уменьшение обусловлено химическими реакциями

между сахарами и фенолами.

Таким образом, до сих пор нет достаточно удовлетворительной схемы

синтеза гуминовых веществ в природных условиях. В анаэробной обстановке

{болотах и т. д.) может преобладать путь образования из лигнина, а в некото-

рых лесных почвах большее значение будет иметь биосинтез из фенолов,

выщелачивающихся из лиственного подстила. Частые и резкие колебания

температуры, влажности и облучения почвенного слоя в условиях континен-

тального климата могут способствовать гумусообразованию по схеме Мейяра.

IV. МЕТОДЫ АНАЛИЗА ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ГРУПП

Гуминовые вещества представляют собой многофункциональные соеди-

нения, включающие карбоксильные группы, фенольные, спиртовые и эноль-

ные гидроксилы, оксихинонные, лактонные и эфирные группировки. Однако

данные по содержанию этих групп весьма разноречивы, а в ряде случаев

вообще отсутствуют доказательства существования той или иной группы.

Как отмечали П. Дюбах и Н. Мехта [2], при определении функциональных

групп приходится сталкиваться с многочисленными трудностями, связан-

ными с невозможностью довести реакцию до конца, адсорбцией реагентов,

нежелательным фракционированием во время анализа, чувствительностью

к воздействию кислоты и основания при высоких температурах, сходством

групп, влияющим на специфичность действия реагентов.

Ввиду того что кислотности различных групп могут частично совпадать,

следует быть очень осторожным при интерпретации результатов, получае-

мых методами, связанными с ионным обменом или величиной рК. Необхо-

димо учитывать, например, что многоосновные кислоты имеют несколько

констант диссоциации, которые уменьшаются по мере отщепления протонов.

Кроме того, замещенные фенолы часто диссоциированы в большей степени,

чем незамещенные.

А. Общая кислотность

Общая кислотность гуминовых веществ определяется химическими

методами и электрометрическим титрованием в неводных растворах. Наи-

более распространенным из химических методов является поглощение гидро-

окисью бария. Образец обрабатывают избытком Ba(OH)

, после чего непро-

реагировавшее основание оттитровывают стандартным раствором кислоты.

Если реакция проводится в присутствии кислорода, получаются завышен-

ные результаты. Основным преимуществом этого метода является его про-

стота; к сожалению, получаемые величины носят довольно условный харак-

тер. Для ряда замещенных фенолов и фенол-формальдегидных смол [15,

16], были найдены низкие значения содержания ОН-групп. В то же время

результаты, полученные для почвенных гуминовых веществ, полностью

совпадали с данными потенциометрического титрования [17, 18].

'394

Второй метод основан на определении количества ОСН

-групп после

метилирования образца диазометаном CH

- Метилирование обычно про-

водят в среде диэтилового эфира. Раньше в качестве растворителя исполь-

зовался сульфолан [19, 20]. С помощью диазометана можно заменять на

метильную группу подвижный атом водорода в различных структурах кис-

лого характера, включающих СООН-группы, N—Н-группы, фенольные

гидроксилы, а также в энольных соединениях и некоторых алифатических

спиртах. Однако фенольные гидроксилы, связанные водородной связью,

не могут вступать в реакцию с диазометаном. Кроме того, по данным В. Фар-

мера и Р. Моррисона [22] при каталитическом воздействии тяжелых метал-

лов происходят побочные реакции образования из диазометана полимерного

продукта полиметилена.

Содержание ОСН

-групп в образцах после метилирования определяют

известным методом Цайзеля. Можно также пользоваться методом Матера и

Про. В этом случае ОСН

-группа отщепляется в виде метанола; его отго-

няют и окисляют KMnO

до формальдегида, количество которого опреде-

ляют колориметрическим методом.

П. Дюбах и др. [23, 24] применяли для определения активного водорода

в почвенных гуминовых веществах диборан B

, способный реагировать

со стерически блокированным водородом. Метод основан на определении

количества выделяющегося H

и, по мнению авторов, не зависит от вели-

чин рК. Для почвенных фульвокислот было получено хорошее совпадение

результатов по определению общей кислотности данным методом и методом

осаждения Ba(OH)

Реактив Гриньяра, метилмагнийиодид CH

MgI, по-видимому, не пред-

ставляет большой ценности для анализа гуминовых веществ. В случае

углей многообещающие результаты были получены при использовании

алюмогидрида лития LiAlH

[25].

Б. Карбоксильные !группы

Для определения СООН-групп в гуминовых веществах широко исполь-

зуется кальций-ацетатный метод [17, 18, 26, 27]. Получаемые результаты

не являются строго количественными, так как метод основан на реакции

ионного обмена, а гуминовые вещества помимо СООН-групп содержат сильно-

кислые ОН-группы. Например, многие замещенные фенолы вступают в реак-

ции обмена с ионами Ca

[16, 17]. П. Дюбах и др. [23], а также Ф. Мар-

тин и др. [24] при исследовании серии гуминовых препаратов из почв на-

шли, что расхождение между величинами, полученными для содержания

СООН-групп методом хемосорбции и вычисленными по разности между

активным водородом (определен с помощью диборана), и общим количест-

вом ОН-групп становятся все более значительными по мере увеличения

содержания гидроксильных групп в исходных образцах.

В случае гуминовых веществ к неточным результатам могут привести

также реакции образования хелатных соединений.

Другой метод определения СООН-групп основан на метилировании и

последующем омылении образующихся метиловых эфиров. Для метилирова-

ния обычно используют диазометан CH

и метиловый спирт в присутствии

сухого хлористого водорода или серной кислоты. Однако в последнем слу-

чае, по заключению В. Фармера и Р. Моррисона [22], реакция этерифика-

ции идет не до конца. Д. Бартон и М. Шнитцер [30] в качестве метилиру-

ющего агента применяли смесь йодистого метила и окиси серебра.

'395

Количество образующихся метиловых эфиров можно определить по

результатам последующего омыления, замеряя либо количество отогнан-

ного метанола, либо понижение содержания ОСН

-групп [31]. Последний

метод (ввиду сложности количественного выделения продуктов омыления)

распространен меньше. Хорошие результаты дают методы, основанные на

титровании не израсходованной при омылении щелочи стандартным раство-

ром кислоты.

Дж. Райт и М. Шнитцер [18] для определения количества СООН-групп

в гуминовых веществах применяли йодометрический метод, основанный на

реакции ионного обмена. Результаты, получаемые этим методом, завышен-

ны (по сравнению с кальций-ацетатным методом) и, по мнению JI. Блома

[21], почти невоспроизводимы.

Известно, что ароматические кислоты декарбоксилируются при нагре-

вании с хинолином в присутствии соответствующего катализатора. Приме-

нение этого метода при анализе почвенных гуминовых веществ дало резуль-

таты, сопоставимые с данными, полученными кальций-ацетатным методом

[18]. На этом основании был сделан вывод, что большая часть СООН-групп

•связана с ароматическими кольцами. Однако следует иметь в виду, что CO

может также выделяться из а-оксиалифатических кислот.

Косвенным путем содержание СООН-групп можно определить по раз-

ности между общей кислотностью и количеством кислых ОН-групп. Оче-

видно, что полученные при этом результаты будут содержать ошибки опре-

делений обоих методов.

В. Общее содержание гидроксильных групп

Для определения общего содержания ОН-групп в гуминовых веществах

наиболее часто используются следующие два метода: метилирование диме-

тилсульфатом (CH

)

и ацетилирование уксусным ангидридом. В первом

случае образец многократно обрабатывается диметилсульфатом в щелочном

растворе, после чего в полученном осадке определяют количество OCH

трупп по методу Цайзеля [31]. Предполагается, что метилируются только

фенольные и спиртовые гидроксилы; СООН-группы не этерифицируются.

С диметилсульфатом могут реагировать и слабокислые фенольные гидрок-

силы, не способные метилироваться диазометаном CH

- Это свойство было

использовано при определении в гуминовых кислотах ОН-групп, связанных

водородной связью. К сожалению, результаты, полученные с помощью

диметилсульфата, трудно интерпретировать в связи с побочными реак-

циями, возможными в сильнощелочном растворе.

Более широко применяется второй метод (ацетилирование). Судя по

результатам, полученным JI. Бломом и др. [21], а также Г. Багнером и

Ф. Стивенсоном [32], в более ранних исследованиях использовался, веро-

ятно, слишком короткий реакционный период. По непонятным причинам

содержание ацетила в гуминовых кислотах, метилированных диазометаном

и омыленных перед ацетилированием, оказалось выше, чем для неметили-

рованных образцов [32].

Ввиду того что СООН-группы также ацетилируются уксусным ангид-

ридом (образование смешанных ангидридов), следует вводить поправку на

количество COOH, определенное каким-либо другим способом. Кроме того,

этот метод, по-видимому, не учитывает возможности образования цикличе-

ских ангидридов во время ацетилирования [20, 32].

С уксусным ангидридом могут реагировать первичные и вторичные

амины, а также сульфогидрильные группы. Однако, по мнению Дж. Райта

'96

и М. Шнитцера [18], влияние этих соединений незначительно. Ацетилиро-

вание, проведенное в восстановительных условиях (выявление ассоцииро-

ванных фенолов), дало неубедительные результаты [33].

Количественную оценку содержания ОН-групп по методу ацетилиро-

вания можно получить посредством гидролиза либо добавлением избытка

реагента и титрованием образующейся уксусной кислоты [18, 29], либо самих

производных щелочью [24, 31, 32]. Однако, по заключению Jl. Блома и др.

[21], а также Ф. Мартина и др. [24], определение непрореагировавшего

уксусного ангидрида дает ненадежные результаты. С. Фридманом и др. [34]

недавно предложен новый метод определения ОН-групп в угле, основан-

ный на образовании эфиров типа триметилалкилоксисиланов ROSi(CH

)

Некоторые сильно ассоциированные фенолы количественно образовывали

такие эфиры в условиях анализа. В случае применения этого метода к гу-

миновым кислотам и родственным пигментам необходимо вводить поправки

на образование эфиров за счет карбоксильных групп. Кроме того, гуми-

новые вещества могут содержать азотистые функциональные группы, спо-

собные образовывать эти производные.

Г. Фенольные гидроксильные группы

По методу Убальдини исследуемое вещество нагревают в спиртовом

растворе КОН. При этом образуются калиевые соли за счет карбоксильных

и фенольных гидроксильных групп. Затем через раствор пропускают CO

образующий с ионами калия из фенольных гидроксилов K

, количество

которого определяют титрованием. Однако неспецифичность реакции и воз-

можность гидролиза при обработке горячим спиртовым раствором KOH

являются серьезными недостатками этого метода. К сожалению, для гуми-

новых кислот и фульвокислот отсутствуют сведения, которые дали бы воз-

можность сопоставить данные, полученные этим и другими методами.

Метод, основанный на реакции сочетания фенольных ОН-групп с солями

диазония, применим, по мнению С. Мошопедиса [19], только в том случае,

если эти группы находятся в орто- и пара-положении.

Косвенные методы определения фенольных ОН-групп заключаются

в анализе образцов, метилированных CH

. Однако таким путем можно

определить только те фенольные гидроксилы, которые имеют достаточно

кислый характер, чтобы реагировать с CH

. Известно, что оксихиноны

типов /, II и III метилируются с большим трудом из-за высокой устойчи-

вости кольцевых структур, образующихся за счет водородной связи.

/0x

iiV

Il о Il I и /V

YY /V^ \/\/

сп

1 II III

Поэтому, пока не будет решен вопрос относительно наличия оксихинонов

в гуминовых веществах, результаты, получаемые при анализе метилиро-

ванных производных или вычисленные по разности между общей кислот-

ностью и количеством СООН-групп, не следует рассматривать как показатели

содержания фенольных ОН-групп.

'397

Д. Спиртовые гидроксильные группы

До сих пор нет удовлетворительных методов для определения спиртовых

ОН-групп в гуминовых веществах. Использование косвенных методов при-

водило к разноречивым результатам. Так, М. Шнитцер со своими сотруд-

никами [17, 18, 27, 29] сообщил о наличии в гуминовых кислотах и фульво-

кислотах довольно больших количеств спиртовых ОН-групп. Эти значения

были получены путем вычитания фенольных ОН-групп, также вычисленных

по разности (общая кислотность минус количество СООН-групп, определен-

ное кальций-ацетатным методом), из общего количества ОН-групп, полу-

ченного методом ацетилирования.

С другой стороны, П. Дюбах и др. [23] и Ф. Мартин и др. [24] не смогли

обнаружить спиртовых ОН-групп по разности между активным водородом,

определенным с помощью диборана, и общей кислотностью, определенной

посредством поглощения гидроокисью бария. При экстрагировании гумино-

вых веществ из почвы в присутствии кислорода Дж. Райт и М. Шнитцер [18]

отметили увеличение количества спиртовых ОН-групп и уменьшение C=O

групп. По мнению авторов, это изменение обусловлено кето-енольной пере-

группировкой.

Другие окислительные изменения проявлялись в виде незначительного

понижения фенольных ОН-групп и одновременного повышения СООН-групп.

Большинство методов, которые используются для определения групп

C=O в гуминовых веществах, основано на образовании производных при

реакции с такими реагентами, как гидроксиламин, фенилгидразин, 2,4-ди-

нитрофенилгидразин и семикарбазид. Оксихиноны указанных выше типов

(/—III) не всегда реагируют с этими веществами. После проведения реакции

измеряют либо повышение содержания азота в производных [21, 29, 30],

либо количество непрореагировавшего реагента [18, 35].

Недостатком всех методов, основанных на получении производных,

является то обстоятельство, что применяемые реагенты могут вступать

в реакцию не только с группой C=O. Например, известно, что гуминовые

кислоты при взаимодействии с аммиаком образуют вещества, которые не

гидролизуются. JI. Блом и др. [21] установили, что гидроксиламин и фенил-

гидразин дают завышенные результаты для содержания групп C=O в гуми-

новых кислотах углей.

Относительно новый метод определения групп ^C=O основан на вос-

становлении их до —CH

OH с помощью борогидрида натрия NaBH

. Вос-

становление проводится в щелочном растворе, и водород, выделяющийся

из непрореагировавшего NaBH

, замеряют манометрически. Метод считается

весьма специфичным для групп C=O. Данные, полученные Ф. Мартином

и др. [24] для некоторых гуминовых кислот и фульвокислот, ока-

зались хорошо сопоставимыми с результатами других методов, описан-

ных выше. ,

Определить группы C=O в хинонах более сложно, что связано с широ-

ким диапазоном их реакционной способности. М. Шнитцер и С. Скиннер [33],

используя методы редуктометрического титрования и восстановительного

ацетилирования, не смогли обнаружить хиноны в почвенных фульвокис-

лотах.

Е. Карбонильные группы

'398

Увеличение количества азота после метилирования диазометаном ука

зывает на возможность присутствия концевых колец 1,4-хинонов (от 30

до 110 мг-экв/100 г).

HC=N

/NH

0=<^^>=° +

\Z/

= 0

\ /

Как известно, диазометац присоединяется к концевым хиноидным коль-

цам с образованием пиразолиновых колец. Однако увеличение содержания

азота не следует считать неопровержимым доказательством присутствия

1,4-хинонов, так как CH

может также присоединяться к другим связям,

например к олефиновым двойным связям. При обработке гуминовых кислот

углей диазотироваНной сульфаниловой кислотой С. Мошопедис [19] получил

водорастворимые продукты присоединения. По мнению автора, образование

этих продуктов возможно как по свободно радикальному механизму с уча-

стием хиноидных структур, так и в результате обычного азосочетания с фе-

нольными структурами. Первая из этих реакций рассматривается как доми-

нирующая.

Ж. Эфирные группы

Практически во всех гуминовых кислотах и фульвокислотах при ана-

лизе по методу Цайзеля были обнаружены в небольших переменных коли-

чествах группы OCH

(см. раздел V).

Кислород, не входящий в группы СООН, ОН, C=O и OCH

, часто рас-

сматривался как существующий в виде неопределенных простых эфирных

связей. Это положение было отвергнуто П. Дюбахом и Н. Мехтой [21, пока-

завшими, что для некоторых гуминовых кислот потребовались бы в этом

случае 4 эфирные связи на каждое ароматическое кольцо. По предположению

авторов, часть кислорода в невыявленной форме связи содержится в исклю-

чительно устойчивых хинонных и лактонных группировках.

V. РАСПРЕДЕЛЕНИЕ КИСЛОРОДСОДЕРЖАЩИХ

ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ГРУПП

Материал, приведенный в предыдущих разделах, показывает, насколько

трудно интерпретировать данные по содержанию различных функциональ-

ных групп в гуминовых кислотах и родственных пигментах. Причиной этого

является не только отсутствие стандартных методов извлечения, фракциони-

рования и очистки этих групп, но также и неспецифичность многих анали-

тических методов. Тем не менее собрано достаточное количество данных,

позволяющих сделать ряд предварительных выводов об относительном рас-

пределении кислородсодержащих функциональных групп.

Для гуминовых кислот было установлено высокое содержание карбо-

ксильных групп. Основанием послужило соответствие данных, полученных

путем восстановления дибораном [23, 24] и декарбоксилирования хиноли-

ном [18], и результатов анализа по методам, основанным на реакции ионного

обмена или кислотности (хемосорбция и метилирование — омыление). Зна-

чительное содержание СООН-групп было также подтверждено с помощью

инфракрасной спектроскопии (см. раздел VI). Однако в связи с несопостави-

мостью методов определения фенольных гидроксилов, спиртовых гидрокси-

лов и групп C=O все публикуемые данные об этих группах следует прини-

'399

)£; выю

о _

° № 2.

H Cri О л

та В О ®

Ф О H 2

g S

05 CD ~

та ч й

H Г",

О H ® О

Ю и I о

0 н-н

S % » ч

^ к та

л Я ф и

S S "

со О я

овмй

S S S *

2 й к 2

° § a w

В Tl

и -P та

1 ® к g

OjjgH

я 5 "к

H S

ю и В

аз £

w i. ^ Cr

л г я 5

в g О *

F А » И

В Й в

HMmo

g да H

в S й р

Ф Ф I X

SJB2Яg

а очя

о 5 -

со Я

га я^н

оо о

'Явя"*

2 BB » § И S= g „о

•вав^а^яа^З

в о

а 3 о в gIи;

g O

Bgg>gS I

^sAIgf

SBS

^siiasioggs

w-B

« s

^ J-ч ^ "

С* la

<oo

со

В B SSto

BgKpgsS an

SsreSsSH

g в ~

H OgRgw

чв-ш

S--SS

Biu я

га

p-W

« ^B

2 _

«ЙгаЗ-ВО

"=! Я H

2 Он и га

пойв-дач

SSfSf

SgSSISgf

i°sgll »а§о

« «

°>га

S а

геоов.вз

з-а

O^ в

S —й

BraggBSm

SOORMO

Г^Й ^

gHgSsa

га

SB--OISM

I ИТ

it-

JN JN

-T

--T

-T

-I^

-S

ч'иЪмчо

н*- 00

|£- tO

Oo со Oo to оо оз

О О О О

ГО OO СЛ СО OO

M Со M M СО Оз

JNie- со со

со

СО OO СО JN СЛ

О О О О

СЛ

со со

* о

ТЭ

Ssk

Iч!ва^

"а

HHH

д Я

со ф И

- - в

- . -о

to Ф

со M

CO со со со

JN ОЗ СЛ —-J

СЛ OO СЛ

OOOO

M СЛ JN JN

СО —1 н=- СО

О осп О

со со Iso

OOlM

О О

СЛ

СО h*

W-

00 СО СО

OOOO

S * H

Не?»'-.

я S 1 £

to®

Кислород*,

Общая кислот-

ность,

мг-экв/100

Кислые

ОН-группы,

мг-экв/100

Слабокислые

спиртовые

ОН-группы,

мг-экв/100

Группы C

= O,

мг-экв/100

Группы OCH

мг-экв/100

*а

за

5 «

Э °

о= 5:

в=

а Я

О s

W -И

®21£

И !«I

ф 1

W *<

о=

нй

И M^

о Й

Cd CD

Й х

X Я

ох

•J

•

и °

>е< о

О та Д

я V-

Eplg

И О

W НО

Ogw

PQgV

§•3

СО g

И H

5 н

й о

S M И

CD Ц СО

3 ® О

Й H

и CD ох

• И

1-3

№

й м

w й

О 03

Я в

H -S

° S

V-

M И

№

O -

CD В

Ja й

5 ^

S 11

та

H £

Ci S

° H

w E

й ®

О 3

ИЗ

•з S

"й § § S

й ^

o\g „

^ a г

й Я

CD VcJ

•а °

оз Д я

~ ' Isi

я*

§ *

оз ^

н H

та

м сЗ

"в*

s и

V- №

S И

S я

03 CD

та 5

CD X

•ч

Э И X

В о

й M

оз "S

й -

CD 3

H О

та

м и

03 О

H H

6- о

о й

й о

та

w о

о W

та

и 2

со н

» Й

о ®

ах

м й

H §

й в

та

§ S

s Я

о S OX

- ф Й

о о

H я

Я Cd

S §

в S

к и

х E

>-3

3 H

оз H

X И

>4 V-

® g

M S

Э м

ф и

й ф

V-

s т