Дикий І.Л., Холупяк І.Ю., Шевельова Н.Ю. та ін. Мікробіологія

Подождите немного. Документ загружается.

201

íó. Ò³ëüêè â òàêîìó ðàç³ ìîæëèâ³ àíòèãåíçàëåæíà ³ìóííà ä³ÿ ³ îäåð-

æàííÿ ñèðîâàòîê. Òîìó äëÿ êîæíîãî àíòèãåíó ï³äáèðàþòü ÷óòëè-

âèé âèä òâàðèí. Ê³íü çà ñâîºþ âèäîâîþ àíòèãåíðåàêö³éíîþ ðåçè-

ñòåíòí³ñòþ áàãàòî â ÷îìó ïîä³áíèé äî ëþäèíè. Öå ç óðàõóâàííÿì

âèðîáíè÷èõ ïîòðåá (ìîæëèâîñò³ òðèâàëî¿ åêñïëóàòàö³¿, ùîð³÷íîãî

îäåðæàííÿ á³ëüøå 200 ë ñèðîâàòêè â³ä êîæíî¿ òâàðèíè) ³ º îá´ðóí-

òóâàííÿì ¿õ âèáîðó ÿê ïðîäóöåíòà äëÿ îäåðæàííÿ ñèðîâàòêîâîãî

ïðåïàðàòó.

Ïåðø³ åòàïè ðîáîòè: êàðàíòèí  ñïîñòåðåæåííÿ  äîá³ð. Ïî-

ò³ì ïðîâîäÿòü ãðóíä³ìóí³çàö³þ  óâåäåííÿ ìàëèõ äîç àíòèãåíó

ç óðàõóâàííÿì ïîÿâè â ñèðîâàòö³ ³ìóííèõ àíòèò³ë. ²ìóí³çàö³þ ³ ã³-

ïåð³ìóí³çàö³þ ïðîâîäÿòü çà öèêëàìè ç âèêîðèñòàííÿì ïåâíèõ ñõåì,

ÿê³ âðàõîâóþòü êðàòí³ñòü ââåäåííÿ àíòèãåíó, ³íòåðâàë ì³æ íèìè,

íàðîñòàííÿ äîç.

Ó ïî÷àòêîâîìó ïåð³îä³ åêñïëóàòàö³¿ äëÿ ³ìóí³çàö³¿ âèêîðèñòî-

âóþòü çíåøêîäæåí³ àíòèãåíè (àíàòîêñèíè ³ âàêöèíè). Ïðè âèðà-

æåí³é àíòèò³ëîïðîäóêö³¿ ïåðåõîäÿòü íà ââåäåííÿ íåçíåøêîäæåíèõ

àíòèãåí³â.

Ïðèíöèïîâà ñõåìà ³ìóí³çàö³¿ êîíÿ

×åðåç 45 äí³â ââîäÿòü ï/øê 510204080100120150 ìë

àíòèãåíó

Íà 7-ìó äîáó  ïðîáíå êðîâîïóñêàííÿ

Íà 10-òó äîáó  5 ë êðîâ³ (ó êîíÿ âñüîãî 25 ë êðîâ³)

Â³äïî÷èíîê 23 òèæí³

²ìóí³çàö³ÿ çà ñõåìîþ

45 öèêë³â ³ìóí³çàö³¿

Â³äïî÷èíîê 23 ì³ñ

1012 öèêë³â ³ìóí³çàö³¿

Òîòàëüíå êðîâîïóñêàííÿ (1015 ë)

Îòðèìàíó êðîâ çáèðàþòü ó öèë³íäðè. Ï³ñëÿ çãîðòàííÿ ³ â³äî-

êðåìëåííÿ çãóñòêó óòâîðþºòüñÿ ïðîçîðà ÷àñòèíà  íàòèâíà ñèðî-

âàòêà. Äî íå¿ äîäàþòü êîíñåðâàíò (íàé÷àñò³øå õëîðîôîðì), ïðî-

ãð³âàþòü ïðè 60 °Ñ, îõîëîäæóþòü äî 68 °Ñ ³ â³äñòîþþòü. Ïðè öüîìó

â îñàä âèïàäàþòü íåñò³éê³ á³ëêè, ³ òèòð àíòèò³ë ó ñèðîâàòö³ ñòàá³ë³-

çóºòüñÿ. Ïîò³ì ñèðîâàòêó òèòðóþòü, òîáòî âèçíà÷àþòü ó í³é ðîçðà-

õóíêîâèé âì³ñò ³ìóííèõ àíòèò³ë. Ñèëó ñèðîâàòêè âèçíà÷àþòü ó ì³æ-

íàðîäíèõ îäèíèöÿõ (ÌÎ). Çà 1 ÌÎ ïðèéìàºòüñÿ òà ì³í³ìàëüíà ê³ëü-

ê³ñòü ñèðîâàòêè, ÿêà íåéòðàë³çóº âñòàíîâëåíó äîçó òîêñèíó.

Òèòðóâàííÿ ñèðîâàòîê ïðîâîäÿòü òðüîìà ìåòîäàìè: çà Ðàìîíîì

in vitrî; Åðë³õîì in vivo; Ðåìåðîì in vitro.

Ï³ñëÿ âèçíà÷åííÿ ê³ëüêîñò³ àíòèò³ë ó ñèðîâàòö³ ¿¿ î÷èùàþòü â³ä

áàëàñòîâèõ á³ëê³â-àëüáóì³í³â, ç ÿêèìè íå ïîâÿçàí³ ¿õ çàõèñí³ âëàñ-

òèâîñò³. Ïîò³ì ñèðîâàòêó ï³ääàþòü î÷èùåííþ ³ êîíöåíòðóþòü.

Êîíöåíòðàö³ÿ ñèðîâàòêè ´ðóíòóºòüñÿ íà âèä³ëåíí³ òà ðîç÷èíåíí³

âèä³ëåíèõ àêòèâíèõ ôðàêö³é ó ìåíøîìó îáñÿç³ ïîð³âíÿíî ç âèõ³ä-

202

íèìè  íàòèâíîþ ñèðîâàòêîþ. Öå äîçâîëÿº ââîäèòè â îðãàí³çì

ïðåïàðàòè ç ìåíøèì âì³ñòîì ÷óæîð³äíèõ äëÿ îðãàí³çìó ëþäèíè

á³ëê³â.

Ìåòîäè î÷èùåííÿ ³ êîíöåíòðàö³¿:

 ïðîïóñêàííÿ ÷åðåç ñèðîâàòêè íà õîëîä³ âóãëåêèñëîãî ãàçó,

ïðè öüîìó ãëîáóë³íè âèïàäàþòü â îñàä;

 âèñîëþâàííÿ ñèðîâàòîê íà õîëîä³ àìîí³þ ñóëüôàòîì ç ïî-

äàëüøèì ä³àë³çîì ³ ò. ä.

Íèí³ äëÿ î÷èùåííÿ ³ êîíöåíòðàö³¿ ñèðîâàòîê çàñòîñîâóºòüñÿ

ìåòîä «Ä³àôåðì-3». Ìåòîä ´ðóíòóºòüñÿ íà ôðàêö³îíóâàíí³ ñèðîâà-

òîê àìîí³þ ñóëüôàòîì; îáðîáö³ ¿õ ïåïñèíîì ç ïîäàëüøèì ä³àë³çîì

ïðîòÿãîì 4042 ãîä.

Äëÿ ä³àë³çó â ñèðîâàòîê óñòàíîâëþþòü ðÍ = 7,3. Äëÿ âèäàëåííÿ

áàëàñòîâèõ á³ëê³â, ùî çàëèøèëèñÿ, ñèðîâàòêó åìóëüãóþòü õëîðî-

ôîðìîì (30 % çà îáºìîì), ïðè öüîìó â îñàä âèïàäàº îñòàííÿ

ïîðö³ÿ áàëàñòîâèõ á³ëê³â. Õëîðîôîðì ïîò³ì âèäàëÿþòü öåíòðè-

ôóãóâàííÿì. Áëèçüêî 70 % ñèðîâàòêîâèõ á³ëê³â (³ìóíîëîã³÷íî

íåàêòèâíèõ) âèäàëÿºòüñÿ, à çàëèøàºòüñÿ ãëîáóë³íîâà ôðàêö³ÿ 

àíòèò³ëà.

Ïðîçîðó ð³äèíó, ùî çàëèøèëàñÿ, ñòåðèë³çóþòü ô³ëüòðàö³ºþ;

òèòðóþòü; âèïðîáîâóþòü íà ï³ðîãåíí³ñòü, íåøê³äëèâ³ñòü ³ ñòåðèëü-

í³ñòü; ðîçëèâàþòü â àìïóëè, çàïàþþòü, íàêëåþþòü åòèêåòêó.

ÎÄÅÐÆÀÍÍß ²ÌÓÍÎÃËÎÁÓË²Í²Â

²ìóíîãëîáóë³íè ñïðÿìîâàíî¿ ä³¿ ãîòóþòü ³ç ñèðîâàòêè

êðîâ³ äîáðîâîëüö³â, ÿê³ ï³ääàþòüñÿ ñïåö³àëüí³é ³ìóí³çàö³¿ ïðîòè

ïåâíîãî âèäó ³íôåêö³¿. Òàê³ ïðåïàðàòè ì³ñòÿòü âåëèêó ê³ëüê³ñòü

àíòèò³ë  γ-ãëîáóë³íè ïðîòè ãðèïó, ñêàçó, â³ñïè, êë³ùîâîãî åíöå-

ôàë³òó, ïðàâöÿ, ñòàô³ëîêîêà, ³ìóíîãëîáóë³í Å, àíàô³ëàêòè÷íà ôðàê-

ö³ÿ IgD.

²ìóíí³ ñèðîâàòêè àáî ³ìóíîãëîáóë³íè ñë³ä ââîäèòè äóæå îáå-

ðåæíî, òîìó ùî ìîæóòü ñïîñòåð³ãàòèñÿ ðåàêö³¿ ó âèãëÿä³ àíàô³ëàê-

òè÷íîãî øîêó, ñèðîâàòêîâî¿ õâîðîáè ³ ò. ä. Ùîá óíèêíóòè öüîãî,

ïðåïàðàò óâîäÿòü çà ìåòîäîì Áåçðºäêè:

 ïåðåä óâåäåííÿì ñèðîâàòîê âèçíà÷àºòüñÿ ³íäèâ³äóàëüíà ÷óò-

ëèâ³ñòü äî ÷óæîð³äíîãî á³ëêà. Äëÿ öüîãî ñèðîâàòêó ðîçâîäÿòü 1 : 100,

â îáºì³ 0,1 ìë óâîäÿòü ï³äøê³ðíî;

 ÷åðåç 20 õâ, ÿêùî ðåàêö³ÿ íåãàòèâíà, óâîäÿòü 0,1 ìë íåðîçâå-

äåíî¿ ñèðîâàòêè;

 ÷åðåç 3060 õâ óâîäÿòü óñþ ïðèçíà÷åíó äîçó.

ßêùî ïðè ââåäåíí³ äåñåíñèá³ë³çàö³éíî¿ äîçè 0,1 ìë ðåàêö³ÿ

ïîçèòèâíà (ïàïóëà 1 ñì, ïî÷åðâîí³ííÿ), ñèðîâàòêó ðîçâîäÿòü âñþ

³ ââîäÿòü äóæå îáåðåæíî ç ³íòåðâàëàìè 2030 õâ ó äîçàõ 0,5; 2; 5 ìë

³ ò. ä. Ïðè öüîìó íàïîãîòîâ³ ìàº áóòè ðîç÷èí àäðåíàë³íó (1 : 1000).

203

ÅÓÁ²ÎÒÈÊÈ

²íòåíñèâíà õ³ì³çàö³ÿ íàâêîëèøíüîãî ñåðåäîâèùà, íàñè-

÷åííÿ éîãî êñåíîá³îòèêàìè àêòóàë³çóº ïðîáëåìó äèñáàêòåð³îç³â.

Êñåíîá³îòèêàìè (â³ä ãðåö. xenos  ÷óæèé) íàçèâàþòü õ³ì³÷í³ ðå÷î-

âèíè íåïðèðîäíîãî, ñèíòåòè÷íîãî ïîõîäæåííÿ (ó òîìó ÷èñë³ ë³-

êàðñüê³ ïðåïàðàòè, çàñîáè ïîáóòîâî¿ õ³ì³¿, îòðóòîõ³ì³êàòè, ïðîäóê-

òè ïðîìèñëîâîãî çàáðóäíåííÿ ³ ò. ³í.), ÿê³ ìàþòü á³îëîã³÷íó àêòèâ-

í³ñòü ³ ñïðîìîæí³ ïîðóøóâàòè ì³êðîá³îöåíîçè îðãàí³çìó ëþäèíè

³ òâàðèí, çóìîâëþþ÷è äèñáàêòåð³îçè. Äèñáàêòåð³îçè  öå ê³ëüê³ñí³

³ ÿê³ñí³ çì³íè ñêëàäó, âëàñòèâîñòåé ³ àñîö³àòèâíèõ â³äíîñèí àâòî-

ôëîðè â åêîñèñòåìàõ ëþäñüêîãî îðãàí³çìó.

Åôåêòèâíèì ñïîñîáîì êîðåêö³¿ ì³êðîáíî¿ åêîëîã³¿ ð³çíèõ åêî-

ñèñòåì îðãàí³çìó, íàñàìïåðåä êèøå÷íèêó, º éîãî çàñåëåííÿ åóá³î-

òèêàìè  áàêòåð³àëüíèìè ïðåïàðàòàìè ç æèâèõ ïðåäñòàâíèê³â

íîðìàëüíî¿ ì³êðîôëîðè. Çàñòîñóâàííÿ á³îïðåïàðàò³â º òðàäèö³é-

íèì ë³êóâàëüíî-ïðîô³ëàêòè÷íèì íàïðÿìîì â³ò÷èçíÿíî¿ ìåäèöè-

íè. Éîãî ñóòòºâà ïåðåâàãà ïåðåä õ³ì³îòåðàï³ºþ  ïîâíà ô³ç³îëî-

ã³÷í³ñòü äëÿ îðãàí³çìó ëþäèíè ³ â³äñóòí³ñòü áóäü-ÿêî¿ ïîá³÷íî¿ ä³¿,

õàðàêòåðíî¿ äëÿ ñèíòåòè÷íèõ àíòèì³êðîáíèõ ïðåïàðàò³â òà àíòè-

á³îòèê³â.

Ïèòàííÿ ïðî ïîçèòèâíó ðîëü êèøêîâî¿ ì³êðîôëîðè âèíèêëî

ùå â ÷àñè Ëó¿ Ïàñòåðà, ÿêèé 1885 ðîêó âèñëîâèâ äóìêó ïðî ¿¿ ìîæ-

ëèâå ïîçèòèâíå çíà÷åííÿ äëÿ îðãàí³çìó. Ïî÷àòîê ðîá³ò ç äîñë³-

äæåííÿ ì³êðîáíîãî àíòàãîí³çìó ïîâÿçàíî ç ³ìÿì ². ². Ìå÷íèêîâà,

ç éîãî ³äåºþ áîðîòüáè ç ãíèëüíèìè êèøêîâèìè áàêòåð³ÿìè çà äî-

ïîìîãîþ ìîëî÷íîêèñëèõ êóëüòóð. Ìå÷íèêîâñüêå êèñëå ìîëîêî

(ëàêòîáàöèë³í) ÿâëÿëî ñîáîþ ìîëîêî, çàêâàøåíå êóëüòóðàìè áîë-

ãàðñüêî¿ ïàëè÷êè (Lactobacillus bulgaricum), âèä³ëåíî¿ ç éîãóðòó,

³ ìîëî÷íîêèñëîãî ñòðåïòîêîêà. Ïîäàëüøèì êðîêîì ó öèõ äîñë³-

äæåííÿõ çÿâèëàñÿ ïðîïîçèö³ÿ À. Ãàðòüº, ÿêèé 1910 ðîêó â Ïåòåð-

áóðç³ çàïðîïîíóâàâ çàñòîñîâóâàòè àöèäîô³ëüíå ìîëîêî, çàêâàøåíå

àöèäîô³ëüíîþ ïàëè÷êîþ, âèä³ëåíîþ ç êèøå÷íèêó. Ó 1900 ðîö³

Ò³ññüº âïåðøå îïèñàâ âèÿâëåí³ íèì ó êèøå÷íèêó íîâîíàðîäæå-

íèõ ä³òåé ãðàìïîçèòèâí³ áåçñïîðîâ³ ïàëè÷êè ³ íàçâàâ ¿õ á³ô³äî-

áàêòåð³ÿìè.

Òåîð³ÿ ³ ïðàêòèêà ñó÷àñíî¿ áàêòåð³îòåðàï³¿ ïîâÿçàíà ç òà-

êèìè ³ìåíàìè â³ò÷èçíÿíèõ ó÷åíèõ, ÿê Ë. Ã. Ïåðåòö, Á. ². Áëàí-

êîâ, Î. Â. ×àõàâà, Á. À. Øåíäåðîâ, À. À. Ëåíöíåð, ². À. Ñèòíèê,

Ñ. ². Êëèìíþê.

Çíà÷íå ïîøèðåííÿ ð³çíèõ ôîðì äèñá³îòè÷íèõ ñòàí³â, îáóìîâ-

ëåíèõ ïîðóøåííÿì åâîëþö³éíî ñôîðìîâàíèõ á³îëîã³÷íèõ çâÿçê³â

ì³æ ìàêðîîðãàí³çìîì ³ íîðìàëüíîþ ì³êðîôëîðîþ, âèìàãàº ñòâî-

ðåííÿ àðñåíàëó â³äïîâ³äíèõ ë³êàðñüêèõ çàñîá³â äëÿ â³äáóäîâíî¿ òå-

ðàï³¿. Âîíà çàáåçïå÷óºòüñÿ áàêòåð³àëüíèìè ïðåïàðàòàìè, ñêëàä ÿêèõ

204

â³äáèâàº áàãàòîëàíêîâó ñòðóêòóðó íîðìàëüíîãî ì³êðîá³îöåíîçó

ëþäèíè. Äëÿ öèõ ö³ëåé âèêîðèñòîâóþòü á³îïðåïàðàòè, ùî âèïóñ-

êàþòüñÿ â³ò÷èçíÿíîþ ïðîìèñëîâ³ñòþ, ó ñóõ³é ôîðì³  á³ô³êîë, á³-

ô³äóìáàêòåðèí, êîë³áàêòåðèí, ëàêòîáàêòåðèí, à òàêîæ êóëüòóðè

àíòàãîí³ñòè÷íî àêòèâíèõ øòàì³â ó íàòèâí³é ôîðì³ (íà ìîëîö³) 

êèñëîìîëî÷í³ ïðîäóêòè êóëüòóð ëàêòîáàêòåð³é (L. acidophilum, L. fer-

mentun, L. plantarum, L. bulgaricum). Ëàêòîáàêòåð³¿ â ìîíîêóëüòóð³

àáî ð³çíèõ ñïîëó÷åííÿõ ç á³ô³äóìáàêòåð³ÿìè ñêëàäàþòü îñíîâè áà-

ãàòüîõ çàðóá³æíèõ á³îïðåïàðàò³â  àíòèá³îô³ëþñ, àöèäîô³ëþñ,

«Zyma», ñèíåðëàê, îðòîáàêòåð, îìí³ôëîðà ³ ò. ³í. Íà ï³äñòàâ³ ÷èñ-

ëåííèõ äîñë³äæåíü ó ö³é ãàëóç³ ñôîðìóëüîâàí³ îñíîâí³ ïðèíöèïè

ñòâîðåííÿ ñó÷àñíèõ åóá³îòèê³â.

ÎÑÍÎÂÍ² ÏÐÈÍÖÈÏÈ ÑÒÂÎÐÅÍÍß Ì²ÊÐÎÁÍÈÕ

Á²ÎÏÐÅÏÀÐÀÒ²Â

Äîâåäåíî, ùî íîðìàëüíà ì³êðîôëîðà ëþäèíè  öå ñêëàä-

íà ïîë³êîìïîíåíòíà åêîëîã³÷íà ñèñòåìà, êîæíèé ç³ ñï³â÷ëåí³â ÿêî¿

ñêëàäàº âàæëèâó ëàíêó â çàáåçïå÷åíí³ ñòàíó åóá³îçó. Öå âèçíà÷àº

äîö³ëüí³ñòü ñòâîðåííÿ ïîë³êîìïîíåíòíèõ á³îïðåïàðàò³â, ùî âêëþ-

÷àþòü ó ñâ³é ñêëàä ì³êðîîðãàí³çìè îáë³ãàòíîãî á³îöåíîçó ç ð³çíèì

ìåõàí³çìîì á³îëîã³÷íî¿ àêòèâíîñò³.

Ïåðñïåêòèâí³ñòü âèêîðèñòàííÿ òîãî àáî ³íøîãî âèäó ì³êðîîð-

ãàí³çì³â ó âèðîáíèöòâ³ á³îïðåïàðàò³â âèçíà÷àºòüñÿ, íàñàìïåðåä,

âèñîêîþ ÷àñòîòîþ ¿õ ïîøèðåííÿ ñåðåä çäîðîâèõ ëþäåé, ïî÷èíàþ-

÷è ç òðüîõ ðîê³â. Ùîäî êèøêîâî¿ ì³êðîôëîðè öèì êðèòåð³ÿì â³ä-

ïîâ³äàþòü, ó ïåðøó ÷åðãó, á³ô³äîáàêòåð³¿, ÿê³ ñêëàäàþòü íà 99 %

ì³êðîôëîðó êèøå÷íèêó çäîðîâîãî íåìîâëÿòè ³ íà 6090 %  äî-

ðîñëî¿ ëþäèíè. Ìåõàí³çì àíòàãîí³ñòè÷íî¿ ä³¿ á³ô³äîáàêòåð³é ïî-

âÿçàíèé ç òèì, ùî âîíè óòâîðþþòü îöòîâó ³ ìîëî÷íó êèñëîòè,

àíòèá³îòè÷í³ ðå÷îâèíè, ïåðåøêîäæàþ÷è ðîçìíîæåííþ ïàòîãåí-

íî¿ é óìîâíî-ïàòîãåííî¿ ôëîðè, à òàêîæ ñïðèÿþòü óñìîêòóâàííþ

â êèñëîìó ñåðåäîâèù³ â³òàì³íó D, çàë³çà, ³îí³â êàëüö³þ. ²íø³ 10 %

ñêëàäàþòü ëàêòîáàêòåð³¿, åøåðèõ³¿ ³ ò. ³í. Ñàìå ç ö³º¿ ïðè÷èíè á³î-

ïðåïàðàòè, ÿê³ óæå âèêîðèñòîâóþòüñÿ â ìåäè÷í³é ïðàêòèö³, ì³ñ-

òÿòü ïåðåë³÷åí³ âèäè áàêòåð³é. Îäíàê öèì äàëåêî íå âè÷åðïóþòüñÿ

ïåðñïåêòèâè ñòâîðåííÿ íîâèõ ïðåïàðàò³â åóá³îòèê³â, äîñèòü çãàäà-

òè, ùî, çà äàíèìè Á. À. Øåíäåðîâà, îñíîâó àâòîôëîðè ñêëàäàþòü

îáë³ãàòíî àíàåðîáí³ áàêòåð³¿, ñåðåä ÿêèõ ê³ëüê³ñòü âèâ÷åíèõ âèä³â

ó ëþäñüêèõ ì³êðîá³îöåíîçàõ ñêëàäàº ëèøå 750 % â³ä ¿õíüî¿ ñïðàâæ-

íüî¿ ê³ëüêîñò³.

Âàæëèâèì åòàïîì ñòâîðåííÿ áàêòåð³àëüíîãî ïðåïàðàòó º äîá³ð

âèðîáíè÷èõ øòàì³â ì³êðîîðãàí³çì³â çà ðÿäîì îçíàê: àíòàãîí³ñòè÷-

íî¿ àêòèâíîñò³ â óìîâàõ çì³øàíèõ ïîïóëÿö³é, íàáëèæåíèõ äî ïðè-

ðîäíèõ åêîëîã³÷íèõ, ³ ïîì³ðíîñò³ êèñëîòîòâîðåííÿ â ðîçðàõóíêó íà

âèÿâëåííÿ ñïðàâæíüî¿ àíòèá³îòè÷íî¿ àêòèâíîñò³. Õî÷à â ìåõàí³çì³

205

àíòàãîí³ñòè÷íî¿ àêòèâíîñò³ á³ô³äî- ³ ëàêòîáàêòåð³é ïðèéíÿòî íàäà-

âàòè âåëèêîãî çíà÷åííÿ êèñëîòîòâîðåííþ, ç ÷èì ³ ïîâÿçóþòü ¿õ

çàõèñíó ôóíêö³þ, ñó÷àñí³ äîñë³äæåííÿ íå âèÿâèëè ïðÿìî¿ êîðåëÿ-

ö³¿ ì³æ öèìè âëàñòèâîñòÿìè. Ùå ². ². Ìå÷íèêîâ ïðè âèâ÷åíí³ øòà-

ìó áîëãàðñüêî¿ ïàëè÷êè, âèä³ëåíî¿ ç éîãóðòó, óêàçóâàâ íà ó÷àñòü

â àíòàãîí³ñòè÷í³é àêòèâíîñò³ öüîãî ì³êðîáà ÿêî¿ñü ðå÷îâèíè,

íå ³äåíòè÷íî¿ ìîëî÷í³é êèñëîò³. Î÷åâèäíî, á³ëüø ñóòòºâå çíà÷åí-

íÿ â ìåõàí³çì³ àíòàãîí³ñòè÷íî¿ àêòèâíîñò³ êèñëîòîòâîðíèõ ì³êðî-

îðãàí³çì³â ìàº ïðîäóêóâàííÿ íèìè àíòèá³îòè÷íèõ ðå÷îâèí.

Ïðè äîáîð³ íåîáõ³äíîãî âèðîáíè÷îãî øòàìó âðàõîâóºòüñÿ éîãî

ïîâíà ãåíåòè÷íà õàðàêòåðèñòèêà, âàæëèâèìè º äîñë³äæåííÿ ïîçà-

õðîìîñîìíèõ ôàêòîð³â ñïàäêîâîñò³  ïëàçì³ä, ïîì³ðíèõ ôàã³â, ÿê³

ìîæóòü âèçíà÷àòè àíòèá³îòè÷í³ âëàñòèâîñò³ ì³êðîîðãàí³çì³â, à òà-

êîæ âèâ÷àþòüñÿ àäãåçèâí³ âëàñòèâîñò³ ì³êðîîðãàí³çì³â íà ñóáñòðàò³

ïðèðîäíèõ á³îòîï³â. Ïðè ðîçðîáö³ íîâèõ åóá³îòèê³â äëÿ â³äíîâëåí-

íÿ êèøêîâî¿ ì³êðîôëîðè ïîòð³áíî âèêîðèñòîâóâàòè øòàìè, çäàòí³

ïðèêð³ïëþâàòèñÿ äî ñëèçîâî¿ îáîëîíêè êèøå÷íèêó ³ æèòè â ìóöè-

í³, îñê³ëüêè äëÿ çàñåëåííÿ êèøå÷íèêó ì³êðîîðãàí³çìè ìàþòü,

ó ïåðøó ÷åðãó, êîëîí³çóâàòè ìóöèí òîâñòî¿ ³ òîíêî¿ êèøîê.

Ïîë³êîìïîíåíòí³ ì³êðîáí³ ñïîëóêè ìàþòü ôîðìóâàòèñÿ íà îñ-

íîâ³ ïðèðîäíîãî ñèíåðã³çìó âèä³â, øëÿõîì îäíî÷àñíîãî íàãðîìà-

äæåííÿ á³îìàñè ïðè çàãàëüíîìó êóëüòèâóâàíí³. Àêòóàëüíèì íà-

ïðÿìîì ó ïðîáëåì³ ñòâîðåííÿ íîâèõ á³îïðåïàðàò³â º êîìïëåêñó-

âàííÿ á³ô³äîáàêòåð³é ç êèøêîâèìè ïàëè÷êàìè, ÿêå ´ðóíòóºòüñÿ

íà ¿õíüîìó ïðèðîäíîìó ñèíåðã³çì³, à òàêîæ ç êèñëîòîòâîðíèìè

áàêòåð³ÿìè ðîäó Lactobacillus.

Âàæëèâèì ìîìåíòîì ó ñòâîðåíí³ ïðåïàðàò³â åóá³îòèê³â º îïòè-

ìàëüíèé âèá³ð ë³êàðñüêî¿ ôîðìè ³ çàñòîñóâàííÿ ñó÷àñíèõ ôàðìà-

öåâòè÷íèõ òåõíîëîã³é. Ðîçðîáêà íîâèõ á³îïðåïàðàò³â, ñòâîðåííÿ

ë³êàðñüêèõ ôîðì  òàáëåòîê, ì³êðîêàïñóë, ñâ³÷îê òà ³íøèõ áàçó-

ºòüñÿ íà âèêîðèñòàíí³ ïðèíöèï³â á³îôàðìàö³¿, ïîòåíö³þâàëüíî¿

³ ïðîòåêòèâíî¿ ä³¿ äîïîì³æíèõ ðå÷îâèí. Íàïðèêëàä, á³îëîã³÷íà àê-

òèâí³ñòü äîïîì³æíî¿ ðå÷îâèíè ç ãðóïè ïîõ³äíèõ ³íîçèíó ïîâÿçàíà

³ç çàì³ùåííÿì ìîëåêóë âîäè â ñòðóêòóð³ êë³òèííîãî á³ëêà â ïðîöåñ³

äåã³äðàòàö³¿, à òàêîæ ç³ çäàòí³ñòþ ñòèìóëþâàòè ð³ñò ì³êðîîðãàí³ç-

ì³â ïðè åíòåðàëüíîìó ââåäåíí³. Çàñòîñóâàííÿ äîïîì³æíèõ êîìïî-

íåíò³â ç áàãàòîôàêòîðíèì ìåõàí³çìîì ä³¿, ÿê³ âèêîíóþòü ðîëü ïðî-

òåêòîð³â íà ñòàä³ÿõ íàãðîìàäæåííÿ á³îìàñè, ¿¿ çíåâîäíþâàííÿ, çáå-

ð³ãàííÿ ³ ðåã³äðàòàö³¿, ñóòòºâî ï³äâèùóº åôåêòèâí³ñòü á³îïðåïàðàò³â.

Êð³ì òîãî, îáðàí³ ì³êðîáí³ êîìïîçèö³¿ ïðè âèðîáíèöòâ³ òà çáåð³-

ãàíí³ ïîâèíí³ ìàòè ñòàá³ëüí³ñòü.

Àêòóàëüí³ äîñë³äæåííÿ ñïðÿìîâàí³ íà ïîäàëüøå çíèæåííÿ åôåê-

òèâíèõ äîç á³îïðåïàðàò³â ç æèâèõ áàêòåð³é. Â³äîìèé ôåíîìåí

«ô³ç³îëîã³÷íî¿ áàêòåð³ºì³¿», ÿêèé âèíèêàº ñë³äîì çà åíòåðàëüíèì

ââåäåííÿì áàêòåð³éíèõ ïðåïàðàò³â ç âèñîêîþ êîíöåíòðàö³ºþ

206

ì³êðîáíèõ ò³ë. Òîìó âàæëèâå çíà÷åííÿ ìàþòü óñåá³÷íå âèâ÷åííÿ

âèñîêîàêòèâíèõ âèðîáíè÷èõ øòàì³â ³ ñòâîðåííÿ íîâèõ ïðåïàðàò³â,

çàõèùåíèõ â³ä ðåã³äðàòàö³¿ â òîíê³é êèøö³.

ÑÓ×ÀÑÍ² ÅÓÁ²ÎÒÈÊÈ

Äëÿ â³äíîâëåííÿ íîðìàëüíî¿ ì³êðîôëîðè ³ á³îëîã³÷íî¿

ñàíàö³¿ áàêòåð³îíîñ³¿â ïàòîãåííèõ åíòåðîáàêòåð³é ïðàêòèêà ñó÷àñ-

íî¿ îõîðîíè çäîðîâÿ ìàº ó ñâîºìó ðîçïîðÿäæåíí³ â³ò÷èçíÿí³ á³î-

ïðåïàðàòè â ìîíîêóëüòóðàõ (ñóõ³ êîë³áàêòåðèí, á³ô³äóìáàêòåðèí

³ ëàêòîáàêòåðèí) ³ ç îäíèì äâîêîìïîíåíòíèì ñêëàäîì (á³ô³êîë).

Ö³ ïðåïàðàòè âèïóñêàþòü ó âèãëÿä³ á³îìàñè âèðîáíè÷èõ øòàì³â,

ë³îô³ë³çîâàíî¿ ó ôëàêîíàõ àáî àìïóëàõ.

Á³ô³äóìáàêòåðèí  ë³îô³ëüíî âèñóøåíà æèâà êóëüòóðà á³ô³äóì-

áàêòåð³é. Âèêîðèñòîâóºòüñÿ äëÿ ë³êóâàííÿ õðîí³÷íèõ ôîðì äèçåí-

òåð³¿ ³ ñàíàö³¿ øèãåëîíîñ³¿â, à òàêîæ äëÿ ë³êóâàííÿ äèñáàêòåð³îç³â,

âèêëèêàíèõ àíòèá³îòèêîòåðàï³ºþ.

Îñíîâîþ º âèðîáíè÷èé øòàì ¹ 1 Bifidobacterium bifidum. Öå

àíàåðîáí³ íåñïîðîòâ³ðí³ ãðàìïîçèòèâí³ ïàëè÷êè, â³äì³òíîþ ìîð-

ôîëîã³÷íîþ îçíàêîþ ÿêèõ º ðîçäâîºííÿ íà ê³íöÿõ êë³òèíè.

Íå ðîçð³äæóþòü æåëàòèí, íå óòâîðþþòü ãàçó ³ êàòàëàçó. Öóêðîë³-

òè÷íî àêòèâí³ ç óòâîðåííÿì îöòîâî¿ ³ ìîëî÷íî¿ êèñëîò. Âèÿâëÿþòü

àíòàãîí³ñòè÷í³ âëàñòèâîñò³ ñòîñîâíî øèãåë òà ³íøèõ ïàòîãåííèõ

åíòåðîáàêòåð³é.

Êîë³áàêòåðèí ñêëàäàºòüñÿ ç êèøêîâèõ ïàëè÷îê, àíòàãîí³ñòè÷íî

àêòèâíèõ â³äíîñíî øèãåë òà ³íøèõ åíòåðîáàêòåð³é. Ðåêîìåíäóºòü-

ñÿ ïðè õðîí³÷íèõ êîë³òàõ, êèøêîâèõ äèñáàêòåð³îçàõ, ñàíàö³¿ íîñ³¿â

åíòåðîïàòîãåííèõ áàêòåð³é.

Á³ô³êîë  êîìïëåêñíèé ïðåïàðàò ç êóëüòóð á³ô³äóìáàêòåð³é

³ êèøêîâî¿ ïàëè÷êè. Øèðîêî çàñòîñîâóºòüñÿ ó â³äíîâëþâàëüí³é

òåðàï³¿ ïðè êèøêîâèõ ³íôåêö³ÿõ.

Ëàêòîáàêòåðèí  ë³îô³ëüíî âèñóøåíà æèâà êóëüòóðà ìîëî÷íî-

êèñëèõ áàêòåð³é. Âèêîðèñòîâóºòüñÿ äëÿ ë³êóâàííÿ êèøêîâèõ äèñ-

áàêòåð³îç³â, ìîæå ïðèçíà÷àòèñÿ ïàðàëåëüíî ç àíòèá³îòèêàìè.

Äëÿ á³îëîã³÷íî¿ ñàíàö³¿ ïîðîæíèíè ðîòà ³ âåðõí³õ äèõàëüíèõ

øëÿõ³â çàñòîñîâóºòüñÿ øòàì 1Á, âèä³ëåíèé ç ðîòîâî¿ ïîðîæíèíè.

Îñíîâîþ º âèðîáíè÷³ øòàìè Lactobacillus fermentum ³ L. plantarum.

Íåñïîðîòâ³ðí³ êîðîòê³ ãðàìïîçèòèâí³ ïàëè÷êè, çºäíàí³ â ëàíöþ-

æêè, íåðóõîì³. L. fermentum ôåðìåíòóº ãëþêîçó ç óòâîðåííÿì ãàçó,

ðîçêëàäàº ëàêòîçó, ìàëüòîçó ³ ãàëàêòîçó, ñëàáî  ìàíîçó, ñàõàðîçó,

íå ðîçùåïëþº  ñîðá³ò, öåëþëîçó, ðàìíîçó, ñàë³öèí. L. plantarum

ôåðìåíòóº ãëþêîçó ç óòâîðåííÿì êèñëîòè áåç ãàçó, ðîçêëàäàº ðàì-

íîçó, ñàõàðîçó ³ ãàëàêòîçó, ñëàáêî  ñîðá³ò, ìàëüòîçó, ëàêòîçó, ñà-

ë³öèí ³ ìàí³ò. Âèÿâëÿº àíòàãîí³ñòè÷íó àêòèâí³ñòü ïðîòè øèãåë,

åíòåðîïàòîãåííèõ êèøêîâèõ ïàëè÷îê, çîëîòàâîãî ñòàô³ëîêîêà,

ïðîòåÿ.

207

Ïðåïàðàòè ç æèâèõ êóëüòóð ëàêòîáàöèë âèä³â ïëàíòàðóì ³ àöè-

äîô³ëþñ (ó òàáëåòîâàí³é ôîðì³), ÿê³ äîïîìàãàþòü ñêîðèãóâàòè

³ íîðìàë³çóâàòè ïîðóøåíèé ì³êðîáíèé öåíîç, ìîæóòü çíàéòè øè-

ðîêå çàñòîñóâàííÿ â ñòîìàòîëîã³¿, ó êîìïëåêñíîìó ë³êóâàíí³ çàïàëü-

íèõ çàõâîðþâàíü ñëèçîâî¿ îáîëîíêè ðîòà.

Ó Ðîñ³¿ ðîçðîáëåíèé íîâèé ë³êóâàëüíî-ïðîô³ëàêòè÷íèé ïðåïà-

ðàò  àíòðàöèäíèé á³ô³ëàêò, ÿêèé ì³ñòèòü á³ô³äîáàêòåð³¿, ëàêòîáà-

êòåð³¿ ³ ë³çîöèì. Öåé ïðîäóêò ïîðÿä ç³ ñïðîìîæí³ñòþ íîðìàë³çóâà-

òè ì³êðîåêîëîã³þ êèøå÷íèêó ³ ï³äâèùóâàòè ì³ñöåâ³ çàõèñí³ ìåõà-

í³çìè òðàâíîãî òðàêòó, ìàº àíòðàöèäí³ âëàñòèâîñò³ ³ çàñòîñîâóºòüñÿ

ïðè ãàñòðîåíòåðîëîã³÷íèõ çàõâîðþâàííÿõ.

Â ²íñòèòóò³ ì³êðîá³îëîã³¿ ³ â³ðóñîëîã³¿ ÍÀÍ Óêðà¿íè (Êè¿â) ðîç-

ðîáëåíî ñåëåêö³éîâàí³ øòàìè ìîëî÷íîêèñëèõ áàêòåð³é ç âèñîêèìè

àíòàãîí³ñòè÷íèìè é àäãåçèâíèìè âëàñòèâîñòÿìè. Íà ¿õíüîìó ï³ä-

´ðóíò³ ñòâîðåíî ë³êóâàëüíî-ïðîô³ëàêòè÷í³ ïðåïàðàòè, ïðîïîíîâà-

í³ ïðè äèñáàêòåð³îçàõ, ñóäèííèõ ïàòîëîã³ÿõ, ä³àáåò³  ãåðîëàêò

³ «Áóðÿêîâèé íàï³é». Îñíîâîþ ãåðîëàêòó º ñòðåïòîñàí  ìîëî÷-

íèé ñòðåïòîêîê. «Áóðÿêîâèé íàï³é»  ïðîäóêò ôåðìåíòàö³¿ áóðÿ-

êîâîãî ñîêó ñïåö³àëüíèìè øòàìàìè ìîëî÷íîêèñëèõ áàêòåð³é, ì³ñ-

òèòü ìîëî÷íó êèñëîòó, â³òàì³íè ãðóïè Â, àì³íîêèñëîòè, ïðèðîäí³

àíòèîêñèäàíòè.

Âèêîðèñòàííÿ ìîëî÷íîêèñëèõ ëàêòîáàêòåðèíó, á³îëàêòó, «Íà-

ðèíå», «Ìàöîí³» òàêîæ ïîêàçàëî ¿õ åôåêòèâí³ñòü ÿê ë³êóâàëüíî-

ïðîô³ëàêòè÷íèõ ïðåïàðàò³â ó êîìïëåêñí³é òåðàï³¿ äèñáàêòåð³îç³â

ð³çíî¿ ëîêàë³çàö³¿.

²ç çàðóá³æíèõ åóá³îòèê³â äëÿ ðåãóëþâàííÿ ð³âíîâàãè êèøêîâî¿

ì³êðîôëîðè ó â³ò÷èçíÿí³é ìåäèöèí³ âèêîðèñòîâóºòüñÿ ðÿä êàïñóëü-

íèõ ïðåïàðàò³â. Ñåðåä íèõ: á³ô³ôîðì (Äàí³ÿ), ÿêèé ì³ñòèòü Bi-

fidobacterium longum ³ Enterococcus faecium; áàêòîñóáòèë (ÑØÀ), ùî

ñêëàäàºòüñÿ ç ÷èñòî¿ êóëüòóðè Bacillus subtilis; ôëîí³â³í ÁÑ (ICN

Pharmaceuticals Inc.), ùî ÿâëÿº ñîáîþ êóëüòóðè B. subtilis ³ B. cereus;

ë³íåêñ (Ñëîâåí³ÿ) ³ç âì³ñòîì ìîëî÷íîêèñëèõ áàêòåð³é, ñò³éêèõ äî

àíòèá³îòèê³â òà ³íøèõ õ³ì³îòåðàïåâòè÷íèõ çàñîá³â  Lactobacillus

acidophilus, Bifidobacterium infantis, Streptococcus faecium.

Ïåðñïåêòèâíèì º ïðåïàðàò ó âèãëÿä³ îðàëüíèõ êðàïåëü Õ³ëàê

ôîðòå (Àâñòð³ÿ)  êîíöåíòðàò ïðîäóêò³â á³îñèíòåçó ãðàìïîçèòèâ-

íèõ ³ ãðàìíåãàòèâíèõ ñèìá³îíò³â êèøêîâî¿ ôëîðè, ïðîïîíîâàíèé

äëÿ â³äíîâëåííÿ àâòîôëîðè, íîðìàë³çàö³¿ pÍ, âîäíî-ñîëüîâîãî áà-

ëàíñó êèøå÷íèêó ³ ñòèìóëÿö³¿ ñèíòåçó åï³òåë³àëüíèõ êë³òèí êèø-

êîâî¿ ñò³íêè.

ÎÑÍÎÂÈ ²ÌÓÍÎÁ²ÎÒÅÕÍÎËÎÃ²¯

Á³îòåõíîëîã³ÿ  íàóêà ïðî âèêîðèñòàííÿ á³îëîã³÷íèõ

ïðîöåñ³â, âëàñòèâèõ ì³êðîîðãàí³çìàì, êóëüòóðàì òêàíèí ðîñëèí

³ òâàðèí, ó òåõí³ö³ òà ïðîìèñëîâîìó âèðîáíèöòâ³.

208

Îñíîâí³ ðîçä³ëè á³îòåõíîëîã³¿:

 êë³òèííà ³íæåíåð³ÿ;

 ã³áðèäîìí³ òåõíîëîã³¿;

 ãåííà ³íæåíåð³ÿ;

 ³íæåíåðíà åíçèìîëîã³ÿ;

 ³íæåíåðíà ³ìóíîëîã³ÿ.

²ìóíîá³îòåõíîëîã³ÿ (³íæåíåðíà ³ìóíîëîã³ÿ)  ðîçä³ë á³îòåõíî-

ëîã³¿, ùî ðîçðîáëÿº àñïåêòè îäåðæàííÿ ³ìóíîá³îëîã³÷íèõ ïðåïàðà-

ò³â (àíòèò³ë òà ¿õ ôðàãìåíò³â, âàêöèí, àäþâàíò³â, ³ìóíîäåïðåñàíò³â

³ ò. ä.) íà îñíîâ³ ïðîìèñëîâîãî îñâîºííÿ äîñÿãíåíü ñó÷àñíî¿ ìîëå-

êóëÿðíî¿ ³ìóíîëîã³¿.

Ñó÷àñíó á³îòåõíîëîã³þ õàðàêòåðèçóþòü ÿê á³îòåõíîëîã³þ íà îñ-

íîâ³ ãåííî¿ ³íæåíåð³¿. Ä³éñíî, öå îñíîâíèé øëÿõ, ÿêèé âèêîðèñòî-

âóºòüñÿ äëÿ ñïðÿìîâàíî¿ ìîäèô³êàö³¿ á³îîáºêò³â ó ðåçóëüòàò³ ââå-

äåííÿ øòó÷íî ñòâîðåíèõ ãåíåòè÷íèõ ïðîãðàì.

Ðîçð³çíÿþòü òðè ð³âí³ ãåííî¿ ³íæåíåð³¿:

Ø ãåííà  ïðÿìå ìàí³ïóëþâàííÿ ðåêîìá³íàíòíèìè ÄÍÊ, ÿê³

âêëþ÷àþòü îêðåì³ ãåíè;

Ø õðîìîñîìíà  ìàí³ïóëÿö³ÿ ç âåëèêèìè ãðóïàìè ãåí³â àáî

ö³ëèìè õðîìîñîìàìè;

Ø ãåíîìí³  ïåðåíåñåííÿ óñüîãî àáî á³ëüøî¿ ÷àñòèíè ãåíåòè÷-

íîãî ìàòåð³àëó â³ä îäí³º¿ êë³òèíè äî ³íøî¿.

Ó ñó÷àñíîìó ðîçóì³íí³ ãåííà ³íæåíåð³ÿ âêëþ÷àº â îñíîâíîìó

òåõíîëîã³þ ðåêîìá³íàíòíèõ ÄÍÊ. Ùî ñòîñóºòüñÿ äâîõ ³íøèõ ð³â-

í³â, òî õðîìîñîìíà ³íæåíåð³ÿ ÿê ìåòîä ìîäèô³êàö³¿ á³îîáºêò³â â³-

ä³ãðàº äðóãîðÿäíó ðîëü, à ãåíîìíà  â³äïîâ³äàº òîìó, ùî íèí³ ïðè-

éíÿòî ïîçíà÷àòè ÿê êë³òèííà ³íæåíåð³ÿ. Äî ðîá³ò ó ãàëóç³ ãåííî¿

³íæåíåð³¿ âêëþ÷àþòü ÷îòèðè îñíîâí³ åòàïè:

1. Îäåðæàííÿ ïîòð³áíîãî ãåíà.

2. Âáóäîâóâàííÿ ãåíà â ãåíåòè÷íèé åëåìåíò (âåêòîð), çäàòíèé

äî ðåïë³êàö³¿.

3. Ââåäåííÿ ãåíà, ùî âõîäèòü äî ñêëàäó âåêòîðà, â îðãàí³çì-

ðåöèï³ºíò.

4. ²äåíòèô³êàö³ÿ (ñêðèí³íã ³ ñåëåêö³ÿ) êë³òèí, ÿê³ çäîáóëè áà-

æàíèé ãåí (ãåíè).

1. Îäåðæàííÿ ïîòð³áíîãî ãåíà:

Ø âèä³ëåííÿ éîãî ç ÄÍÊ;

Ø õ³ì³êî-ôåðìåíòàòèâíèé ñèíòåç;

Ø â³äòâîðåííÿ íà îñíîâ³ ³çîëüîâàíî¿ ìàòðè÷íî¿ ÐÍÊ çà äîïî-

ìîãîþ ÐÍÊ-çàëåæíî¿ ÄÍÊ-ïîë³ìåðàçè (ðåâåðòàçè).

Âèä³ëåííÿ ãåí³â ³ç ÄÍÊ. ²çîëüîâàíó ÄÍÊ ï³ääàþòü ôðàãìåíòàö³¿,

âèêîðèñòîâóþ÷è ðåñòðèêö³éí³ åíäîíóêëåàçè (ðåñòðèêòàçè), ÿê³ êà-

òàë³çóþòü ðîçùåïëåííÿ ÄÍÊ íà ä³ëÿíêàõ, ùî ìàþòü ïåâí³ ïîñë³-

äîâíîñò³ íóêëåîòèä³â. Òåïåð â³äîìî á³ëüøå 400 ðåñòðèêòàç, ÿê³ ï³-

çíàþòü 85 ð³çíèõ íóêëåîòèäíèõ ïîñë³äîâíîñòåé.

209

Óòâîðåí³ ôðàãìåíòè íóêëåîòèäíî¿ ïîñë³äîâíîñò³ ìîæóòü áóòè:

 ïðèºäíàí³ äî âåêòîðà, ïîïåðåäíüî îáðîáëåíîãî ò³ºþ æ ðåñò-

ðèêòàçîþ;

 ïåðåòâîðåí³ ç ë³í³éíî¿ ìîëåêóëè â ê³ëüöåâó øëÿõîì çøèâàí-

íÿ âçàºìíî êîìïëåìåíòàðíèõ ê³íö³â çà äîïîìîãîþ ðåñòðèêòàç.

Ìåòîä âèä³ëåííÿ ãåí³â ³ç ÄÍÊ ìàº ðÿä ñóòòºâèõ âàä:

 âàæêî ï³ä³áðàòè ðåñòðèêòàçè, ÿê³ äîçâîëÿþòü âèð³çóâàòè

ç ÄÍÊ ñàìå òó ä³ëÿíêó, ùî â³äïîâ³äàº ïîòð³áíîìó ãåíó;

 ïîðÿä ³ç ïîòð³áíèì ãåíîì ôðàãìåíòè ÄÍÊ, ÿê ïðàâèëî, âêëþ-

÷àþòü çàéâ³ íóêëåîòèäí³ ïîñë³äîâíîñò³, ÿê³ ñòâîðþþòü ïåðåøêîäè

äëÿ âèêîðèñòàííÿ ãåíà;

 ðåñòðèêòàçà ìîæå â³äð³çàòè ÷àñòèíó íóêëåîòèäíîãî ëàíöþæ-

êà ãåíà, ó ðåçóëüòàò³ ÷îãî ãåí óòðà÷àº ôóíêö³îíàëüíó ïîâíîö³í-

í³ñòü.

Õ³ì³êî-ôåðìåíòàòèâíèé ñèíòåç º âàæëèâîþ àëüòåðíàòèâîþ «âè-

ð³çàííþ» ãåí³â ç íàòèâíî¿ ÄÍÊ çà äîïîìîãîþ ðåñòðèêòàç. Â³í âêëþ-

÷àº õ³ì³÷íèé ñèíòåç êîðîòêèõ (816-ëàíêîâèõ) îäíîëàíöþæêîâèõ

ôðàãìåíò³â ÄÍÊ (îë³ãîíóêëåîòèä³â) çà ðàõóíîê ïîåòàïíîãî óòâî-

ðåííÿ åô³ðíèõ çâÿçê³â ì³æ íóêëåîòèäàìè ³ çøèâêó îë³ãîíóêëåîòè-

ä³â ì³æ ñîáîþ çà äîïîìîãîþ ÄÍÊ-ë³ãàçè ç óòâîðåííÿì äâîëàí-

öþæêîâèõ ïîë³íóêëåîòèä³â.

Öåé ìåòîä äàº ìîæëèâ³ñòü òî÷íî â³äòâîðèòè ì³í³ìàëüíî íåîá-

õ³äíó ïîñë³äîâí³ñòü íóêëåîòèä³â ³ óíèêíóòè ïðîáëåì, ïîâÿçàíèõ

ç åë³ì³íóâàííÿì çàéâèõ íóêëåîòèäíèõ ïîñë³äîâíîñòåé ó ôðàãìåí-

òàõ ÄÍÊ. Êð³ì òîãî, º ìîæëèâ³ñòü ââåäåííÿ â ãåíè ä³ëÿíîê ï³çíà-

âàííÿ ð³çíèõ ðåñòðèêòàç, ðåãóëÿòîðíèõ ïîñë³äîâíîñòåé ³ ïîä.

Äëÿ õ³ì³êî-ôåðìåíòàòèâíîãî ñèíòåçó ãåí³â ïîòð³áíà íàÿâí³ñòü

ïîâíî¿ ³íôîðìàö³¿ ïðî éîãî íóêëåîòèäíó ïîñë³äîâí³ñòü, òîìó âè-

êîðèñòàííÿ ìåòîäó îáìåæåíå ìîæëèâîñòÿìè îäåðæàííÿ òàêî¿ ³í-

ôîðìàö³¿. Çà äîïîìîãîþ öüîãî ìåòîäó ñòâîðåí³ ãåíè À- ³ Â-ëàíöþ-

ã³â ³íñóë³íó, ïðî³íñóë³íó ³ ò. ³í.

Ôåðìåíòàòèâíèé ñèíòåç ãåí³â íà îñíîâ³ âèä³ëåíî¿ ç êë³òèíè ìàò-

ðè÷íî¿ ÐÍÊ  íàéá³ëüø ïîïóëÿðíèé ìåòîä ñèíòåçó ãåí³â. Çâîðîòíà

òðàíñêðèïòàçà (ðåâåðòàçà) êàòàë³çóº ñèíòåç íèòêè ÄÍÊ, êîìïëå-

ìåíòàðíî¿ ì-ÐÍÊ. Îòðèìàíó îäíîëàíöþæêîâó ÄÍÊ, íàçâàíó êîì-

ïëåìåíòàðíîþ ÄÍÊ, âèêîðèñòîâóþòü ÿê ìàòðèöþ äëÿ ñèíòåçó äðóãî¿

íèòêè ÄÍÊ ³ç çàñòîñóâàííÿì ÄÍÊ-ïîë³ìåðàçè.

Ïåðåâàãà ðîçãëÿíóòîãî ìåòîäó ïîëÿãàº â òîìó, ùî ãåí âèõîäèòü

áåç ³íòðîí³â (íåçíà÷íèõ íóêëåîòèäíèõ ïîñë³äîâíîñòåé). Êð³ì òîãî,

ëåãøå ñòâîðèòè óìîâè, êîëè êë³òèíà àêóìóëþº ïîòð³áíèé âèä

ì-ÐÍÊ, í³æ â³äáèðàòè ãåí ³ç ñóì³ø³ ôðàãìåíò³â ÄÍÊ. Âåëèêèì

óñï³õîì ó çàñòîñóâàíí³ öüîãî ìåòîäó º îäåðæàííÿ â 1979 ðîö³ ãåíà

ãîðìîíó ðîñòó ëþäèíè  ñîìàòîòðîï³íó.

2. Ââåäåííÿ ãåíà ó âåêòîð. Ãåí, îòðèìàíèé òèì àáî ³íøèì ñïî-

ñîáîì, ì³ñòèòü ³íôîðìàö³þ ïðî ñòðóêòóðó á³ëêà, àëå ñàì íå ìîæå

210

ðåàë³çóâàòè öþ ³íôîðìàö³þ. Ïîòð³áí³ äîäàòêîâ³ ìåõàí³çìè, ùî êå-

ðóþòü ä³ºþ ãåíà, òîìó ïåðåíåñåííÿ ãåíåòè÷íî¿ ³íôîðìàö³¿ â êë³òè-

íó çä³éñíþºòüñÿ â ñêëàä³ âåêòîð³â. Âåêòîðè  öå, ÿê ïðàâèëî, ê³ëü-

öåâ³ ìîëåêóëè, çäàòí³ äî ñàìîñò³éíî¿ ðåïë³êàö³¿. Ãåí ðàçîì ç âåêòî-

ðîì óòâîðþº ðåêîìá³íàíòíó ÄÍÊ.

Êîíñòðóþâàííÿ ðåêîìá³íàíòíèõ ÄÍÊ çä³éñíþºòüñÿ in vitro.

Ê³ëüöåâà ìîëåêóëà âåêòîðà ðîçìèêàºòüñÿ ðåñòðèêòàçîþ. Íåîáõ³ä-

íî, ùîá îòðèìàíà ë³í³éíà ìîëåêóëà ÄÍÊ ì³ñòèëà ê³íö³, êîìïëå-

ìåíòàðí³ ê³íöÿì, ùî ââîäèòüñÿ ÄÍÊ. Êîìïëåìåíòàðí³ ê³íö³ âåê-

òîðà ³ ãåíà, ùî ââîäèòüñÿ, çøèâàþòü ÄÍÊ-ë³ãàçîþ ³ îòðèìàíó ðå-

êîìá³íàíòíó ÄÍÊ çà äîïîìîãîþ ò³º¿ æ ÄÍÊ-ë³ãàçè çíîâó çàìèêàþòü

ç óòâîðåííÿì ºäèíî¿ ê³ëüöåâî¿ ìîëåêóëè.

Ðîçð³çíÿþòü äâà îñíîâí³ êëàñè âåêòîð³â  â³ðóñè ³ ïëàçì³äè.

Âàæëèâîþ ïðîáëåìîþ, ùî âèíèêàº ïðè âèêîðèñòàíí³ â³ðóñ³â

ÿê ãåíåòè÷íèõ âåêòîð³â, º àòåíóàö³ÿ  îñëàáëåííÿ ¿õ ïàòîãåííîñò³

äëÿ õàçÿ¿íà, ùîá çàðàæåí³ â³ðóñîì êë³òèíè âèæèâàëè ³ ìîãëè ïåðå-

äàòè ïîòîìñòâó çì³íåíó ãåíåòè÷íó ïðîãðàìó. Âåëèêå çíà÷åííÿ äëÿ

á³îòåõíîëîã³¿ ìàº çäàòí³ñòü â³ðóñ³â øâèäêî òðàíñïîðòóâàòèñÿ ç êë³-

òèíè â êë³òèíó. Öÿ âëàñòèâ³ñòü â³äêðèâàº ìîæëèâ³ñòü ãåíåòè÷íî¿

ìîäèô³êàö³¿ ñîìàòè÷íèõ êë³òèí äîðîñëîãî îðãàí³çìó. Ó öüîìó â³ä-

íîøåíí³ â³äêðèâàþòüñÿ ïåðñïåêòèâè ë³êóâàííÿ ñïàäêîºìíèõ çà-

õâîðþâàíü ëþäèíè øëÿõîì óâåäåííÿ â³ðóñ³â, ùî ðîçíîñÿòü â³äñóò-

í³ ãåíè ïî âñ³õ êë³òèíàõ ëþäñüêîãî îðãàí³çìó.

Ïëàçì³äè  àâòîíîìí³ ñàìîðåïë³ö³éîâàí³ ãåíåòè÷í³ îäèíèö³.

Íàéá³ëüøå çàñòîñóâàííÿ â ãåíí³é ³íæåíåð³¿ çíàéøëè áàêòåð³àëüí³

ïëàçì³äè (îñîáëèâî ïëàçì³äè Escherichia coli). Áàêòåð³àëüí³ ïëàçì³-

äè ïîä³ëÿþòü:

 íà êîíþãàòèâí³ (ïåðåíîñÿòü ãåíåòè÷íó ³íôîðìàö³þ â³ä êë³-

òèíè äî êë³òèíè øëÿõîì êîíþãàö³¿ áàêòåð³é);

 íåêîíþãàòèâí³ (ïåðåäàþòüñÿ â³ä îäí³º¿ êë³òèíè äî ³íøî¿ çà-

ñîáîì ìåõàí³çìó áàêòåð³àëüíî¿ òðàíñôîðìàö³¿).

Ïåðåíåñåííÿ íåêîíþãàòèâíèõ ïëàçì³ä øëÿõîì êîíþãàö³¿

ìîæëèâå ò³ëüêè â òîìó ðàç³, ÿêùî ³ñíóº ïëàçì³äà-ïîì³÷íèê, ñïðî-

ìîæíà äî ñàìîñò³éíîãî òðàíñïîðòó. Äåÿê³ ïëàçì³äè çäàòí³ äî àìïë³-

ô³êàö³¿, òîáòî óòâîðþþòü ó êë³òèí³ âåëèêó ê³ëüê³ñòü êîï³é, ùî ð³ç-

êî ï³äâèùóº ð³âåíü ôåíîòèïîâîãî âèðàæåííÿ ãåí³â.

Ïðè êîíñòðóþâàíí³ âåêòîð³â äîñë³äíèê ââîäèòü ó íüîãî ä³ëÿí-

êè ï³çíàâàííÿ ðåñòðèêòàç, à òàêîæ ãåíè-ìàðêåðè, ùî êîäóþòü ëåã-

êî ðîçï³çíàâàí³ îçíàêè.

Íàéá³ëüøó çàö³êàâëåí³ñòü âèêëèêàþòü êîñì³äè  ïëàçì³äè, äî

ñêëàäó ÿêèõ óâåäåíà ä³ëÿíêà ÄÍÊ ôàãà λ E. coli, â³äïîâ³äàëüíèé

çà óïàêóâàííÿ ÄÍÊ ó ôàãîâó ÷àñòèíêó. Òàê³ ïëàçì³äè çäàòí³ ïåðå-

äàâàòè äóæå âåëèêèé îáñÿã ãåíåòè÷íî¿ ³íôîðìàö³¿.

3. Ïåðåíåñåííÿ ãåí³â ó êë³òèíè îðãàí³çìó-ðåöèï³ºíòà. Ïåðåäà÷à

ãåí³â, âáóäîâàíèõ ó ïëàçì³äó, çä³éñíþºòüñÿ øëÿõîì òðàíñôîðìà-

ö³¿, êîíþãàö³¿ ³ òðàíñôåêö³¿.