Журнал. Биотехнология. Теория и практика

Подождите немного. Документ загружается.

УДК 578.831

ВИРУСЫ ГРИППА ПТИЦ И ИХ ПАТОГЕННОСТЬ ДЛЯ ЧЕЛОВЕКА

К.Х. Жуматов

kainar60@yahoo.com

ДГП «Институт микробиологии и вирусологии» РГП «ЦБИ» КН МОН РК, г.Алматы

Биотехнология. Теория и практика. № 20092

Введение

Характеристика возбудителей гриппа

и вызываемых ими инфекций

Дикие птицы, преимущественно водного

и околоводного комплексов, являются

естественным резервуаром вируса гриппа А.

Возбудители всех трех гриппозных

пандемий ХХ века (Н1N1 - 1918-1919 гг.;

Н2N2 – 1956-1957 гг.; Н3N2 – 1968-1969 гг.)

содержали в своей структуре компоненты,

полученные из этого генофонда. В

настоящее время высокопатогенный грипп

птиц (ВПГП) Н5N1 является панзоотичным

только для орнитофауны, но представляет

угрозу общественному здравоохранению,

так как по данным ВОЗ отмечено более 400

случаев заболевания с 240 летальными

исходами [1]. Хотя вирус редко передается от

зараженных птиц к человеку, существует

опасность, что он сможет приобрести

способность распространяться среди людей

и вызвать пандемию. Особое беспокойство

вызывает необыкновенно высокая

смертность при гриппе Н5N1, которая в

случае превращения возбудителя в

контагиозный для человека вариант

приведет к тяжелым последствиям. В этой

связи следует отметить, что некоторые

вирусы низкопатогенного гриппа птиц

(НПГП) также инфицируют человека, эти

обстоятельства объясняют актуальность

изучения всех аспектов эволюции и

циркуляции этих возбудителей в популяциях

млекопитающих животных.

Грипп у человека вызывается оболочеч-

ными, содержащими негативную, одно-

цепочную РНК вирусами семейства

Orthomyxoviridae, которые класси-

фицируются на роды А, В и С на основе

антигенных различий внутренних белков [2,

3]. Геном вируса гриппа А состоит из восьми

сегментов кодирующих синтез поверх-

ностных гликопротеидов - гемагглютинина

(НА) и нейраминидазы (NА), матриксных

полипептидов М1 и М2, неструктурных

белков NS1 и NS2, нуклеокапсида (NР),

полимераз (РВ1, РВ2, РА) и белка F2 [4]. В

естественных условиях вирус гриппа А,

помимо человека, является устойчивым,

эндемичным возбудителем для свиней,

лошадей и собак, а также вызывает

спорадические инфекции у морских

млекопитающих, норок, кошек, тигров и

леопардов[5].

Грипп проявляется в виде высоко-

контагиозного острого респираторного

заболевания с частыми осложнениями.

Ежегодно возникающие эпидемии уносят от

300000 до 500000 жизней, при пандемиях

количество летальных исходов по разным

подсчетам составило приблизительно 1 млн.

в 1957-1958 гг. и до 50 млн. во время

опустошительной «испанки» в 1918-1919 гг.

[6-8]. Только в США количество

госпитализаций по причине гриппа

превышает 200000 и смертельных случаев

36000 в год [9, 10].

Вред здоровью человека наносят

преимущественно вирусы гриппа А, каждый

из которых относится к определенному

подтипу с различными сочетаниями НА и

NА. В популяциях диких птиц распрос-

транены вирусы со всеми известными 16

антигенными разновидностями НА и 9 – NА.

Среди людей в последние годы широко

циркулируют лишь вирусы гриппа подтипов

Н1N1, Н1N2, Н3N2 и серотипа В, при этом

Биотехнология. Теория и практика. № 20092

эпидемические сезоны с доминированием

по

дтипа Н3N2, как правило, отличаются

большим уровнем госпитализации и

смертности, нежели в случае вирусов Н1N1

и В [11, 12]. Возбудители гриппа человека

возникают постоянно и непредсказуемо в

ходе антигенного дрейфа, в результате

которого точковые мутации при репликации

гена НА вызывают аминокислотные замены

на поверхности кодируемого белка и

изменяют его антигенные свойства.

Сравнительно небольшое количество

аминокислотных замен приводит к

возникновению нового для иммунной

системы хозяина измененного штамма,

который вытесняет предшествующий

вариант; таким образом, социркуляция

антигенно отличных штаммов одного

подтипа происходит лишь в течение

короткого времени. Антигенный дрейф

вызывает сезонные эпидемии различной

степени тяжести, происходящие большей

частью в холодные периодыгода.

Высокая частота мутаций характерна для

всех РНК-вирусов и обусловлена главным

образом полимеразным комплексом,

который не обладает активностью ДНК

полимераз устранять ошибки при

копировании генетических матриц [13, 14].

Такого рода ошибки происходят постоянно и

приводят к появлению т.н. квази-видовой

популяции, которая никогда не бывает

генетически однородной [15, 16]. Квази-

виды РНК-содержащих вирусов, возможно,

возникли как механизм, обеспечивающий

широкий спектр субпопуляций, которые

могут быть способны к адаптации в новых

условиях окружающей среды, что имеет

огромное значение для эволюции

возбудителей гриппа. Среди циркули-

рующих субпопуляций вируса гриппа Н5N1

показано наличие форм резистентных к

антивирусным препаратам задолго до их

применения. Так, в настоящее время

эффективность ремантидина при

инфицировании человека сезонными

вариантами вируса гриппа Н3N2 и

современным вирусом Н5N1 минимальна,

поскольку устойчивые популяции уже

являются предоминантными, или же быстро

ими становятся в условиях селектирующего

давленияхимиопрепарата [17].

возбудителей гриппа. Среди циркули-

рующих субпопуляций вируса гриппа Н5N1

показано наличие форм резистентных к

антивирусным препаратам задолго до их

применения. Так, в настоящее время

эффективность ремантидина при инфици-

ровании человека сезонными вариантами

вируса гриппа Н3N2 и современным

вирусом Н5N1 минимальна, поскольку

устойчивые популяции уже являются

предоминантными, или же быстро ими

становятся в условиях селектирующего

давленияхимиопрепарата [17].

Другим механизмом естественной

вариабельности вируса гриппа А служит

антигенный шифт, при котором происходит

полная смена НА и/или NA и возникают

вирусы, способные вызывать крупные

эпидемии и пандемии. Это происходит в

результате реассортации, когда два различ-

ных вируса при инфицировании одной

клетки-хозяина обмениваются генными

сегментами с образованием потомства ново-

го подтипа. В случае если сформировав-

шийся вирус получает комбинацию генов,

позволяющую ему вызывать тяжелое

вариабельности вируса гриппа А служит

антигенный шифт, при котором происходит

полная смена НА и/или NA и возникают

вирусы, способные вызывать крупные

эпидемии и пандемии. Это происходит в

результате реассортации, когда два

различных вируса при инфицировании

одной клетки-хозяина обмениваются

генными сегментами с образованием

потомства нового подтипа. В случае если

сформировавшийся вирус получает

комбинацию генов, позволяющую ему

вызывать тяжелое заболевание вместе со

способностью легко передаваться от

человека к человеку, он потенциально может

вызвать пандемию [18].

Показано, что рекомбинация человечес-

ких и птичьих вирусов гриппа привела к

появлению возбудителей, ответственных за

пандемии 1957–1958 гг. и 1968–1969 гг. [19,

20]. Эти вирусы имели гены как человечес-

кого, так и птичьего происхождения. Долгое

время считалось, что пандемический вирус

гриппа H1N1 1918–1919 гг. также возник в

результате реассортации, однако недавние

Другим механизмом естественной

Биотехнология. Теория и практика. № 20092

заболевание вместе со способностью легко

пере

даваться от человека к человеку, он

потенциально может вызвать пандемию [18].

Показано, что рекомбинация человечес-

ких и птичьих вирусов гриппа привела к

появлению возбудителей, ответственных за

пандемии 1957–1958 гг. и 1968–1969 гг. [19,

20]. Эти вирусы имели гены как человечес-

кого, так и птичьего происхождения. Долгое

время считалось, что пандемический вирус

гриппа H1N1 1918–1919 гг. также возник в

результате реассортации, однако недавние

исследования свидетельствуют о «птичьем»

происхождении всех его восьми генов,

что предполагает возможное прямое

инфицирование им человека и адаптацию к

нему [21, 22].

установлено, что реснитчатые клетки

эпителия дыхательных путей человека

содержат связанные сиаловые

кислоты; этот факт объясняет способность

птичьих вирусов Н5N1 и других

реплицироваться в них, несмотря на свою

видовую рецепторную специфичность [27,

28]. Показано, что ортомиксовирусы в

дополнение к описанным структурам

прикрепляются также к таким соединениям,

как сульфозированные и сиализированные

гликаны. Выявление всего спектра

рецепторов хозяйских клеток, с которыми

они взаимодействуют и различия в

способности вирусов гриппа А при-

крепляться к ним до внедрения в клетки

позволит лучше понять процессы меж-

видовой передачи.

Богатые сиаловой кислотой муцины

респираторного тракта обеспечивают еще

один барьер против вирусов гриппа, так как

они могут препятствовать их контакту с

чувствительными клетками. В свою очередь

NА вируса, расщепляя сиаловую кислоту в

составе муцина, позволяет ему избежать

такой «ловушки» и после взаимодействия с

соответствующими рецепторами проник-

нуть внутрь клетки путем энодоцитоза.

Вслед за этим происходит понижение рН в

эндоцитозной везикуле и сплавление ее

мембраны с вирионной. Этот процесс

осуществляется с помощью консерватив-

ного участка НА называемого белком

слияния, который выходит на арену после

расщепления синтезированной молекулы

НА0 на тяжелую (НА2) и легкую (НА1) цепи

[29, 30].

Репликация возбудителя начинается в

ядре с помощью трех полимеразных белков

путем создания положительных РНК-

матриц для синтеза вирусных полипептидов

и негативных копий РНК, которые будут

упакованы во вновь образующиеся вирусные

частицы [31]. Их высвобождение во время

отпочкования от поверхности хозяйской

клетки происходит благодаря энзиматичес-

кой активности вирионной NА, которая

расщепляет вирусные агрегаты и ускоряет

выход инфекционного потомства [32]. Таким

образом, совместная эволюция НА и NА

вирусов гриппа А человека и птиц

-2,-3-

Проникновение вирусов гриппа

человекаи птиц в клетку

Все больные гриппом инфицируют

окружающих воздушно-капельным и кон-

тактными путями, имеют различную клини-

ческую симптоматику в зависимости от воз-

раста, наличия хронических заболеваний и

связанных с гриппом осложнений. Установ-

лено, что на начальном этапе заболевания

НА соединяется с концевой сиаловой (N-

ацетилнейраминовой) кислотой рецепторов

клеток гладкого эпителия респираторного

тракта человека, которая связана с галакто-

зой при помощи связи. В противо-

положность этому НА птичьих вирусов

гидролизует сиаловую кислоту с

галактозной связью [23]. До недавнего

времени считалось, что эти различия в

рецепторной специфичности вирусов грип-

па человека и птиц обуславливают видовой

барьер клетки-хозяина, предотвращающий

инфицирование людей птичьими вирусами.

Однако события, связанные с вспышкой

ВПГП Н5N1 в 1997 г. в Гонконге, дали

импульс дальнейшим исследованиям,

которые значительно продвинули знания о

концевых сиаловых рецепторах в тканях

респираторного тракта человека. Показано,

что эпителиальные клетки терминальных

бронхиол и альвеол несут остатки сиаловой

кислоты как с так и с

галактозными связями, и вирус ВПГП Н5N1

способен реплицироваться в тканевых куль-

-2,6

-2,-3-

-2,6, -2,-3-

турах легкого человека [24-26]. Более того,

Биотехнология. Теория и практика. № 20092

направлена на достижение соответствия с

рецепт

орной специфичностью клеток-

мишеней [33].

вызывал смерть на моделях мышей и

куриных эмбрионов, хорошо размножался

в эпителиальных клетках бронхов

человека. При этом удаление любого из

генов всегда приводило к снижению

вирулентности на мышах [37]. При

картировании 14 аминокислотных замен

у высоко- и низкопатогенного вирусов

Н7N7, выделенных в Нидерландах

в 2003 г., выявлена определяющая роль

гена НА в распространении вируса ВПГП

по различным тканям, помимо этого

показано, что основным маркером

патогенности служил лизин в позиции

627 белка РВ2 [38]. Продукты NS гена

являются регуляторами многих

внутриклеточных процессов - сплайсинга

РНК, связывания полипептида М1,

внутриядерного транспорта белков,

кэппирования и полиаденилирования

клеточной и РНК, ингибирования

индукции интерферона [2, 39]. Вариации

в любом из них могут влиять на ход

репликации и, как следствие, на

патогенные свойства. Показано усиление

вирулентности вирусов гриппа птиц для

куриных эмбрионов вследствие двух

аминокислотных замен в Ns2, и для

цыплят в случае одной замены в

положении 149 белка NS1 [40, 41].

Клинически вирулентность вирусов

гриппа птиц определяется по критериям

Всемирной организации здоровья

животных (в прошлом OIE), согласно

которым возбудители ВПГП

характеризуются внутривенозным

индексом патогенности на 6-недельных

цыплятах >1, 2, или же вызывают 75%

смертность у 4-6-недельных цыплят,

зараженных внутривенно. Вирусы

подтипов Н5 и Н7 с меньшими

показателями, тем не менее, должны

быть проверены на наличие в сайте

расщепления молекулы НА

множественных основных аминокислот.

Если эти участки сходны с таковыми

у других патогенных вирусов, то

проверенные изоляты также относят

к высокопатогенным. Низкопатоген-

ными являются все вирусы гриппа птиц,

не отвечающие описанным критериям [42].

Вирулентность вирусовгриппа птиц

Основным условием и показателем

вирулентности штаммов вируса гриппа А

служит чувствительность их к действию

протеаз хозяйских клеток. НА продуцирует-

ся в виде одного белка НА0 и для

приобретения инфекционности должен

разделиться на Н2 и Н1 субъединицы. Этот

процесс требуется для активации белка

слияния и происходит в межклеточном

пространстве под воздействием трипсино-

подобных ферментов, которые узнают

аргинин в сайте расщепления НА.

Считается, что распространение вируса

НПГП по тканям во многом зависит от

содержания этих ферментов в респиратор-

ном и кишечном трактах [34]. При наличии в

сайте расщепления множественных

основных аминокислот (лизина и аргинина)

он становится доступным фуринам и другим

протеазам, присутствующим в большинстве

клеток организма. НА вирусов ВПГП

расщепляется на Н1 и Н2 на стадии сборки и

поэтому они являются инфекционными

после высвобождения из клетки [35]. Эти

свойства позволяют им реплицироваться в

различных типах клеток, включая ткани моз

га, сердца, скелетных мышц, поджелудоч

ной железы, что приводит к разнообразным

поражениям органов-мишеней и смерти

инфицированных птиц [36].

Эффективная репликация и патогенность

вируса гриппа А обуславливается взаимо-

действием всех вирусных белков достигае-

мым в ходе естественной эволюции, и

каждый из них играет свою специфическую

роль. Показано, что координированная

экспрессия вирусных белков в составе

вируса Н1N1 1918 г. придала этому возбуди-

телю уникальные вирулентные свойства.

Ряду исследователей с помощью обратной

генетики удалось генерировать вирус,

несущий все восемь кодирующих РНК-

сегментов пандемического вируса 1918 г.

Полученный вариант, в отличие от

аналогичных современных штаммов,

реплицировался в отсутствии трипсина,

Биотехнология. Теория и практика. № 20092

Выделение вирусов гриппа птиц от

чело

века

Хотя вирус ВПГП Н5N1 впервые

изолирован от домашних птиц в 1959 г.,

инфицирование им человека не отмечалось

вплоть до 1997 г., когда в Гонконге умер 3-

летний мальчик с диагнозом – синдром Рея,

острая гриппозная пневмония. Из

трахеального отделяемого больного на

клетках МДСК был выделен вирус гриппа

птиц А(H5N1). В течение 1997 г. заразилось

18 человек, шестеро из которых скончались

[43-45]. Следующие два новых случая

«птичьего» гриппа Н5N1 с одним летальным

исходом зарегистрированы лишь в феврале

2003 г. в Гонконге, после чего возбудитель

стал распространяться в другие регионы

[46]. По данным ВОЗ, в период с 2003 по

2008 гг. он вызвал среди населения 14 стран

(Азербайджана, Камбоджи, Китая, Джибути,

Египта, Индонезии, Ирака, Лаоса, Мьянмы,

Нигерии, Пакистана, Таиланда, Турции,

Вьетнама) более 400 случаев тяжелого

заболевания с 240 летальными исходами.

Инфекция характеризуется пневмонией,

часто прогрессирующей до острого респи-

раторного дистресс-синдрома и поражения

многих органов; смертность при гриппе

Н5N1 по–прежнему превышает 60% [1].

При молекулярно-биологическом

исследовании в геноме вируса H5N1,

выделенного от человека в Турции в начале

2006 г., обнаружены мутации, приведшие к

аминокислотным заменам в НА (положения

227, 153), и полимеразном белке (позиция

667). Эти изменения, впервые выявленные

одновременно в структуре двух белков,

свидетельствуют, с одной стороны, о

постепенной адаптации птичьего вируса

H5N1 к человеку, с другой о недостаточном

его эпидемическом потенциале для передачи

отчеловека к человеку[47].

Анализ ситуации по гриппу Н5N1

показал, что он носит преимущественно

зоонозный характер, а главным фактором

риска для здравоохранения служит прямой

контакт с инфицированными птицами, в

Азербайджане заболевание человека

связывается с разделкой погибшего лебедя

[48-50]. В шести случаях в Китае контактов с

пораженными птицами не отмечено, но

заболевшие лица до появления клинических

признаков посещали городские птичьи

рынки, что свидетельствует об их

потенциальной роли в передаче возбудителя

населению [51].

Со времени открытия вирус гриппа Н5N1

выделялся от диких птиц только спора-

дически, однако в мае 2005 г. он явился

причиной эпизоотии и гибели более 6000

диких птиц на озере Кукунор в Китае. С 2003

по 2008 гг. вирус гриппа подтипа Н5N1

вызвал случаи инфицирования авифауны в

более чем 45 государствах мира и нанес

огромный урон птицеводству. Вспышка

гриппа Н5N1 на территории СНГ впервые

зарегистрирована летом 2005 года в Сибири;

в июне 2006 г. на озере Упсу-Нур на границе с

Монголией погибло более 4000 птиц,

преимущественно больших поганок. Вызы-

вает интерес выделение штаммов высоко-

патогенного вируса Н5N1 от здоровых диких

птиц. Так, в различных регионах Сибири они

изолированы от пяти видов пернатых [52-

54]. На территории Казахстана в ходе

многолетних иссле-дований от птиц водного

и околоводного комплексов выделено 102

изолята вируса гриппа А двенадцати

подтипов, в том числе и высокопатогенный

вирус гриппа Н5N1 [55-58]. Анализ

накопленных данных позволяет утверждать,

что хотя в некоторых случаях перенос вируса

Н5N1 в другие регионы через домашних

птиц и людей не может быть исключен,

дикие мигрирующие виды пернатых, в

основном водного и околоводного ком-

плексов, служат основным источником его

распространения.

В 2003 г. в Нидерландах во время

эпизоотии на птицефабрике ВПГП Н7N7

заболело 89 человек, у большинства из

которых (88%) развился конъюнктивит. Все

они выздоровели, за исключением одного 57-

летнего ветеринара, умершего от двусторон-

ней пневмонии с острым респираторным

дистресс-синдромом. Изолированный при

этом вирус Н7N7 по 14 аминокислотам

отличался от другого штамма этого подтипа,

выделенного во время этой вспышки [38].

Еще один подтвержденный случай ВПГП

Н7N3 у рабочего птицефабрики с развитием

конъюнктивита зарегистрирован в Канаде в

2004 г. [59].

Биотехнология. Теория и практика. № 20092

относительно небольшое количество

док

ументированных случаев НПГП у

человека может объясняться передачей

возбудителя только в случае непосредствен-

ного контакта с поголовьем, а также

гиподиагностикой легких форм гриппозной

инфекции (при конъюнктивите, гриппо-

подобных лихорадках, респираторных

инфекциях верхних дыхательных путей).

Серологическое подтверждение также

затруднено ввиду отсутствия стандартных

методов диагностики НПГП, кроме этого

следует принимать во внимание низкий

уровень сывороточных антител при местных

инфекциях (конъюнктивите).

Первый штамм, подобный вирусу

классической чумы птиц А(Н7N1),

изолирован в 1970 г. в США от больного

после вероятного контакта с птицами [60].

Начиная с 1996 г., описан ряд случаев

заражения людей вирусами гриппа птиц

подтипа Н7 с различными клиническими

проявлениями. Вирус НПГП Н7N7 выделен

от 43-летней больной конъюнктивитом в

Великобритании в 1996 г. [61]. Вирусы

НПГП Н7N3 изолированы в 2004 и 2006 гг. в

Канаде и Великобритании от двух больных

конъюнктивитом работников птицеферм,

имевших контакт с зараженным поголовьем.

В 2002, 2003 и 2007 гг. в США и

Великобритании отмечены несколько

случаев инфицирования людей вирусом

НПГП Н7N2 с развитием у них

респираторногозаболевания.

В период с 1998 по 2007 гг. вирус Н9N2

вызвал несколько случаев гриппоподобного

заболевания и конъюнктивита в Китае и

обширный природный резервуар в дикой

орнитофауне позволяют им преодолевать

видовые барьеры и таким образом

приспосабливаться к изменяющимся

условиям окружающей среды. В процессе

циркуляции и естественной изменчивости

возбудителей гриппа могут возникать

подтипы вируса с новыми биологическими

свойствами, способные к широкому

эпидемическому распространению.

Современный уровень знаний и опыт

прошлого свидетельствуют о необходимости

постоянного контроля ситуации, который

может осуществляться с помощью программ

вакцинации и мониторинга. Несмотря на

достигнутые успехи, изучение молекулярно-

биологических механизмов эволюции и

межвидовой передачи возбудителей гриппа

птиц является приоритетной задачей

вирусологии.

Гонконге с 1998 по 2007 гг. вирус Н9

инфицированным поголовьем, а также

передачи возбудителя от человека человеку

отмечено не было [62, 63]. Вызывает интерес

выделение от трехлетнего ребенка в 1979 г. в

г. Баку (Азербайджан) вируса гриппа А

(Н10N7), антигенно родственного вирусу

А/цыпленок/Германия/N/49, однако в

дальнейшем сообщений об изоляции этого

подтипа не поступало [64].

Вирусы гриппа птиц представляют

опасность как для общественного

здравоохранения, так и ветеринарии.

Заключение

Литература

1.WHO. 2008.

2. Wright P.F., R.G. Webster. 2001. Orthomyxoviruses. In: D.M. Knippe, P.M., Howley D.E.,

D.E. Griffin et al. (eds.). FieldsVirology, 4 ed. Lippincott: Philadelphia, PA, pp. 1533-1579.

3. Horimoto, T., Y. Kawaoka. 2005. Influenza: lessons from past pandemics, warnings from

current incidents. Nature Reviews Microbiology 3(8):591-600.

4. Chen, W., P.A. Calvo, D. Malide et al. 2001. A novel influenza A virus mitochondrial protein

that induces cell death. Nature Medicine &(12):1306-1312.

5. Stallknecht, D.E., E. Nagy, D.B. Hunter, R.D. Slemmons. 2007. Avian influenza. In: N.J.

Thomas, D.B. Hunter, C.T. Atkinson (eds.). Infectious Diseases of Wild Birds. Blackwell

Publishing:Ames,IA, pp. 108-130.

6. Beveridge, W.I. 1991. The chronicle of influenza epidemics. History and Philosophy of the

Life sciences 13(2):223-234.

http://www.who.int/csr/disease/avian_influenza.org

Биотехнология. Теория и практика. № 20092

8. WHO, 2007. Acute respiratory infections: influenza. Available at

WHO: Geneva.

9. Thomson, W.W., D.K. Shay, E. Weintraub et al. 2004. Influenza-associated hospitalizations in

the United States. Journal of theAmericanMedicalAssociation 292(11):1333-12340.

10. Thomson, W.W., D.K. Shay, E. Weintraub et al. 2003. Mortality associated with influenza

and respiratory syncytial virus in the United States. Journal of the American Medical Association

289(2):179-186.

11. Webster, R.G., M. Peiris, H. Chen, Y. Guang. 2006. H5N1 outbreaks and enzootic influenza.

EmergingInfectious Diseases 12(1):3-8.

12. Simonsen, L., K. Fukuda, L.B. Schonberger, N.J. Cox. 2000. The impact of influenza

epidemics on hospitalization. Journal of Infectious Diseases 181(3):831-837.

13. Furio, V., A. Moya, R. Sanjuan. 2005. The cost of replication fidelity in an RNA virus.

Proceedings of the NationalAcademy of Sciences USA102:10233-10237.

14. Steinhauer, D.A. E. Domingo, J.J. Holland. 1992. Lack of evidence for proofreading

mechanisms associated with an RNAvirus polymerase. Gene 122:281-288.

15. Biebricher, C.K., M. Eigen. 2006. What is a quasispecies? Current topics in Microbiology

and Immunology 299:1-31.

16. Bull, J.J., L.A. Meyers, M. Lachman. 2005. Quasispecies made simple. PLoS Computational

Biology 1:e61.

17. Wainright, P.O., M.L. Perdue, M. Brugh, C.W. Beard. 1991. Amantadine resistance among

hemagglutinin sybtype 5 strain of avian influenza virus.Avian Diseases 35:31-39.

18. World Health Organization (WHO). Avian influenza: assessing the pandemic threat.

TheWorld Health Organization 2005.Available from:

www.who.int/csr/disease/influenza/WHO_CDS_2005_29/en/index.html.

19. Вelshe R. The origins of pandemic influenza – lessons from the 1918 virus N Engl J Med

2005; 353: 2209–11.

20. Кilbourne E. Influenza pandemics of the 20th century. Emerg Infect Dis 2006; 12(1): 9–14.

21. Taubenberger, J.K. 2007. Discovery and characterization of the 1918 pandemic influenza

virus in historical context.AntiviralTherapy 12:581-591.

22. Taubenberger, J.K., A.H. Reid, R.M. Lorens et al. 2005. Characterisation of the 1918

influenza virus polymerase genes. Nature 437(7060):889–893.

23. Rogers, G.N., J.C.Paulson. 1983. Receptor determinants of human and animal influenza

virus isolates: differences in receptor specificity of the H3 hemagglutinin based on species of origin.

Virology 127(2):361-373.

24. Nichols, J.M., M.C. Chan, W.Y. Chan et al. 2007. Tropism of avian influenzaA(H5N1) in the

upper and lower respiratory tract. Nature Medicine 13(2):147-149.

25. Shinya, K., M. Ebina, S. Yamada et al. 2006. Avian flu: influenza virus receptors in the

human airway. Nature 440(7083):435-436.

26. van Riel D., V.J. Munster, W.E. de, G.F. Rimmelzwaan et al. 2006. H5N1 virus attachment to

lower respiratory tract. Science 312(5772):399.

27. Matrosovich, M., N. Zhou, Y. Kawaoka, R. Webster. 1999. The surface glycoproteins of H5

influenza viruses isolated from humans, chickens, and wild aquatic birds have distinguishable

properties. Journal of Virology 73(2):1146-1155.

28. Matrosovich M.N., T.Y. Matrosovitch, T. Gray et al. 2004. Human and avian influenza

viruses target different cell types in cultures of human airway epithelium. Proceedings of the

NationalAcademyof Sciences USA101(13):4620-4624.

29. Skehel, J.J., K. Cross, D. Steinhauer, D.C. Wiley. 2001. Influenza fusion peptides.

Biochemical Society Transactions 29(Pt 4):623-626.

30. Vaccaro, L., K.J. Cross, J. Kleinjung et al. 2005. Plasticity of influenza haemagglutinin

fusion peptides and their interaction with lipid bilayers. Biophysical Journal 88:25-36.

http://www.who.int/vaccine_research/disease/ari/en/

7. Nguen-Van-Tam, J.S., A.W. Hampson. 2003. The epidemiology and clinical impact of

pandemic influenza. Vaccine 21(16):1762-1768.

Биотехнология. Теория и практика. № 20092

32. Air, G.M., A.A. Ghate, S.J. Stay. 1999. Influenza neuraminidase as target for antivirals.

Advances

inVirus Research 54:375-402.

33. Wagner, R., M. Matrosovich, H.D. Klenk. 2002. Functional balance between

haemagglutinin and neuraminidase in influenza virus infections. Reviews in Medical Virology

12(3):159-166.

34. Klenk, H.D., R. Rott, M. Orlich, J. Blodorn. 1975. Activation of influenza A viruses by

trypsin treatment. Virology 68:426-439.

35. Steinhauer, D.A. 1999. Role of hemagglutinin cleavage for the pathogenicity of influenza

virus.Virology 258:1-20.

36. Swayne, D.E. 1997. Pathobiology of H5N2 Mexican avian influenza virus infections of

chickens.VeterinaryPathology 34:557-567.

37.Tumpey,TV., C.F. Basler, P.V.Agiular et al. 2005. Characterization of the reconstructed 1918

Spanish influenza pandemic virus 310:77-80.

38. Munster, V.G., Wit, E.de, Riel D. van al., 2007. The molecular basis of the pathogenicity of

the Dutch highly pathogenic human influenzaAH7N7 viruses. J. Infect. Dis. 196(2):258-265.

39. Lamb, R.A., R.M. Krug. 2001. Orthomyxoviridae: The viruses and their replication. In:

D.M. Knippe, P.M. Howley (eds.). Fields Virology, 4 ed. Lippincott Williams & Wilkins:

Philadelphia, pp. 1487-1532.

40. Perdue, M. L. 1992. Naturally occurring NS gene variants in an avian influenza virus isolate.

Virus Research 23:223-240.

41. Li, Z., Y. Jiang, P. Jiao et al. 2006. The NS gene contributes to the virulence of H5N1 avian

influenza viruses. Journal of Virology 80:1115-1123.

42. World Organization for Animal Health. 2006. Avian influenza 2.7.12, Terrestrial Animal

Health Code-2006. World Organization forAnimal Health: Paris, France.

43. De Jong J.C., Claas E.C., Osterhaus A.D. et al. A pandemic warning // Nature. - 1997. - V.

389. - P. 554.

44. Chang P.K., 2002. Outbreak of avian influenza (H5N1) virus infection in Hong Kong in

1997. Clinical Infectious Diseases 34(Suppl. 2):S58-S64.

45. Bonn D. New strain of influenza virus – possible precursor of influenza pandemic // Lancet. -

1997. - Vol. 350, № 9079. - P.350.

46. Peiris, J.S., W.C.Yu, C.W. Leung et al. et al., 2004. Re-emergence of fatal humaninfluenzaA

subtype H5N1 disease. Lancet 363(9409):617-619.

47. Butler D.Alarmsring over bird flu mutations // Nature. – 2006. - Vol. 439. - P.248-249.

48. Areechokchai, D., C. Jiraphongsa, Y. Laosiritaworn et el., 2006. Investigation of avian

(H5N1) outbreak in humans – Thailand, 2004. MMWR 55(Suppl. 1):3-6.

49. Dinh P.N., H.T. Long, N.T. Tien et al., 2006. Risk factors for human infection with avian

influenzaAH5N1,Vietnam, 2004. Emerging Infectious Diseases 12(12):1841-1847.

50. Gilsdorf, A., N. Boxall, V. Gasimov et al., 2006. Two clusters of human infection with

influenza A/H5N1 virus in the republic of Azerbaijan, February-March 2006. European

Surveillance 11(5):122-126.

51. Yu, H.E.A. 2007. Human influenza A/H5N1 cases, urban areas of People's Republic of

China, 2005-2006. EmergingInfectious Diseases 13:1061-1064.

52. Львов Д.К., Забережный А.Д., Алипер Т.И. Вирусы гриппа: события и прогнозы //

Природа. - 2006. - №6. - С. 3–13.

53. Lei Fu-min et al. To protect wild birds and their wetland environments under the current

HPFI H5N1 prevalence. Bangkok International Conference on Avian Influenza 2008: Integration

from Knowledge to Control. - P. 29

54. Shestopalova E.V., et al. Monitoring of influenza viruses in wild birds in post-epizootic

period 2005-2007 in Siberia, Russia. Bangkok International Conference on Avian Influenza 2008:

Integration from Knowledge to Control. - P.123.

31. Noda, T., H. Sagara, A. Yen et al. 2006. Archietecture of ribonucleoprotein complexes in

influenzaAvirus particles. Nature 439;490-492.

Биотехнология. Теория и практика. № 20092

мониторинг вируса гриппа А в популяциях диких птиц Казахстана // Биотехнология в

азахстане: проблемы и перспективы инновационного развития. Межд. науч.-практ. конф.,

посвящ. 50-летию НИИ проблем биол. безопасности. - 2008. - С. 584-586.

57. Мамадалиев С.М., Кыдырбаев Ж.К., Хайруллин Б.М. и др. Мониторинг гриппа птиц в

Казахстане // Профилактика, диагностика и лечение инфекционных болезней, общих для

людей и животных.Тр.Ульян.гос. с.-хоз. акад. – 2006. - С. 311-313.

58. Мамадалиев С.М., Троицкий Е.Н., Хайруллин Б.М. и др. Современные данные

эпизоотологического мониторинга особо опасных заболеваний на территории Республики

Казахстан // Биотехнология в Казахстане: проблемы и перспективы инновационного

развития. Межд. науч.-практ. конф., посвящ. 50-летию НИИ проблем биол. безопасности. -

2008. - С. 547-549.

59. Tweed, S.A., D.M. Skowronski, S.T. David et al., 2004. Human illness from avian influenza

H7N3, British Columbia. Emerg. Infect. Dis. 10(12):2196-2199.

60. Campbell C.H., Webster R.G., Breese S.S. 1970. Fowl plaque virus from man. J. Infect. Dis.

122:513.

61. Kurtz, J., R.J. Manvell, J. Banks 1996. Avian influenza virus isolated from a woman with

conjunctivitis. Lancet 348(9031):901-902.

62. Uyeki, T.M., Y.N. Chong, J.M. Katz et al. 2002. Lack of evidence for human-to-human

transmission of avian influenza A (H9N2) viruses in Hong Kong, China 1999. Emerging Infectious

Diseases 8(2):154159.

63. CDC. Avian influenza A virus infections of humans. 2008.

64. Садыхова Ф.Э. Экология вирусов гриппа на территории Азербайджанской ССР:

Дис… докт. мед. наук. - М., 1988.

http://www.cdc.gov/flu/avian/gen-info/avian-flu-humans.htm

Түйін

Мақалада адамға зардапты құс тұмауы вирустары жайындағы соңғы мәліметтер келтірілген. Оның таралуы,

антигендік өзгергіштігі және сүтқоректілер мен құстардың торшаларына енуі қарастырылған. Қортындысында құс

тұмауы вирусының таралуы мен қоздырғыштың түрлер арасындағы берілуін зерттеудің маңыздылығы атап

көрсетілген.

Summary

The latest data about avian influenza virulent for human are presented in the paper. The questions of their spreading,

antigenic variability, penetration into mammalian and avian cells are discussed. The importance of avian influenza

surveillance and studying of interspecies transmission of the agent is emphasized in conclusion.

55. Саятов М.Х., Кыдырманов А.И., Ишмухаметова Н.Г. Высокопатогенный грипп птиц.

Ситуация в мире и в Казахстане // Биотехнология. Теория и практика. – 2006. - №2. – С. 5-13.

56. Саятов М.Х., Кыдырманов А.И., Жуматов К.Х. и др. Эколого-вирусологический

Биотехнология. Теория и практика. № 20092

УДК 618.19-006.6.-07.616.15-073.916:612.12

С.З. Ескендирова

lii@biocenter.kz

РГП «Национальный центр биотехнологии Республики Казахстан» КН МОН РК, г. Астана

РОЛЬ МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ ПРИ РАКЕ

МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Современные представления о развитии

опухолевого процесса, и в частности, рака

молочной железы (РМЖ), основаны как на

огромном клиническом опыте, так и на

экспериментальных данных идентификации

молекулярно-генетических факторов,

ассоциированных с канцерогенезом. На

сегодняшний день очевидно, что для

совершенствования критериев оценки

болезни и эффективности проводимых

лечебных мероприятий в онкологии

необходимо объединение традиционных

способов диагностики и лечения с

современными методами молекулярно-

генетического тестирования, которые могут

определять развитие опухоли, степень ее

злокачественности, метастатический

потенциал, скорость прогрессии. В комплекс

Введение

При неопластической трансформации в

клетке происходят значительные изменения,

позваляющие ей приобрести такие свойства,

которые предопределяют ее возможность

образовывать злокачественную опухоль.

Фундаментальные исследования в области

молекулярной онкобиологии, направленные

на определение микроструктурных и микро-

функциональных изменений в опухолевых

клетках, приводят к пониманию не только

клеточных, но и молекулярных механизмов

опухолевой трансформации, прогрессии

опухоли и механизмов избежания опухолью

иммунного ответа 1,2,3

[].

молекулярно-генетических маркеров,

имеющих принципиальное прогностическое

значение при РМЖ (утверждены коллегией

американских патологов в 2000 г. [4])

относятся: рецепторы стероидных гормонов,

показатели плоидности опухоли, факторы

опухолевого роста, регуляторы клеточного

цикла, онкопротеины-регуляторы апоптоза и

маркеры клеточной кластерной дифферен-

цировки.

Рецепторы стероидных гормонов

Внутриклеточная концентрация рецеп-

торов к эстрогенам (ER) и прогестеронам

(PgR) способствует осуществлению

регуляции взаимоотношений между

паренхимой и стромой в молочной железе. В

норме в эпителии молочной железы

наблюдается невысокая экспрессия ER и PgR

(7-30% клеток в зависимости от фазы цикла

или гормонального фона), тогда как при

опухолевой трансформации значительно

повышается экспрессия обоих маркеров.

Исследователями установлено 4-кратное

увеличение концентрации ER в культи-

вируемых клетках карциномы молочной

железы MCF-7 при обработке их

доксорубицином или радиацией [5].

Эстроген- и прогестерон-рецепторный

статус первичной опухоли молочной железы

признан одним из наиболее мощных

Современные представления о развитии опухолевого процесса, и в частности, рака молочной железы,

основаны как на огромном клиническом опыте, так и на экспериментальных данных идентификации

молекулярно-генетических факторов, ассоциированных с канцерогенезом. Параметры молекулярно-

генетических маркеров опухолевойтрансформации могут быть отражением биологической агрессии опухоли.

канцерогенез, маркер, экспрессия, рак молочной железы, мониторинг.Ключевые слова: