Новиков Д.К. (и др.). Медицинская микробиология

Подождите немного. Документ загружается.

281

жгутики). Очень плохо окрашиваются анилиновыми красителями, по-

этому лептоспиры лучше изучать в «темном» поле.

Культуральные свойства. По типу дыхания – аэробы, микроаэро-

филы. Хорошо растут на среде с 30% кроличьей сыворотки при тем-

пературе 28-30

С; растут медленно 5-7 суток. Оценивают рост при

микроскопии жидкой среды в «темном» поле.

В полужидких средах образуют колонии.

Антигены. Имеются группоспецифические антигены, по нали-

чию которых все лептоспиры разделены на 38 серогрупп, и типоспе-

цифические поверхностные липопротеиновые антигены, по которым

лептоспиры разделены на сероварианты. Их определяют в реакции

микроагглютинации с монорецепторными сыворотками.

Факторы патогенности: эндотоксин вызывает жировой гепатоз,

кровоизлияния в селезенке, геморрагические нефриты; экзотоксины

представлены гемолизинами и цитотоксином, которые проникают в

межклеточные пространства органов и тканей, особенно печени, по-

чек, нервной системы, обусловливают капилляротоксикоз и органные

нарушения; гиалуронидаза, фибринолизин, плазмокоагулаза обеспечи-

вают быстрое распространение и паразитизм возбудителя в организме

больного; адгезины способствуют избирательному депонированию

возбудителя за счет адсорбции на поверхности эпителиальных клеток,

что приводит к повреждению почечных канальцев.

Источник и резервуар инфекции – грызуны, животные, птицы.

Лептоспиры выделяются из их организма с мочой в воду, почву.

Резистентность. Сохраняют жизнеспособность 2-3 недели; в пи-

щевых продуктах сохраняются несколько дней. Погибают при высу-

шивании, действии ультрафиолета и дезинфицирующих растворов.

Пути передачи: водный, реже алиментарный и контактный.

Входные ворота – кожа и слизистые.

Патогенез.

Возбудитель от входных ворот лимфогенным и гематогенным

путем распространяется по организму и благодаря наличию токсиче-

ских веществ, ферментов инвазии и агрессии, адгезинов вызывает по-

ражение паренхиматозных органов, особенно печени, почек и селе-

зенки.

Если нарушается пигментный обмен, то развивается желтушная

форма, обусловленная как механическим повреждением гепатоцитов

подвижными лептоспирами, так и токсическим действием метаболи-

тов и продуктов распада микроорганизмов.

Лептоспироз сопровождается геморрагическим синдромом, что

связано с действием токсинов на эндотелий сосудов. В результате

нарушается проницаемость сосудистой стенки, и появляются гемор-

рагии.

282

Иммунитет пожизненный, типоспецифический, гуморальный.

Лабораторная диагностика

Материал для исследования зависит от стадии заболевания:

кровь, моча, сыворотка.

Микроскопический метод.

Исследуют кровь на наличие возбудителя до пятого дня заболе-

вания, мочу – на 2-3 неделе. Материал микроскопируют в фазово-

контрастном или темнопольном микроскопах после приготовления

препарата «висячая» или «раздавленная капля». Выявляют типичную

морфологию и подвижность.

Бактериологический метод. Делают посев 5-10 мл крови и мочи в

жидкие сывороточные среды, культивируют при 28

С. Через 5-7 дней

микроскопируют среду в «темном» поле. Идентификацию возбудите-

ля проводят в реакции агглютинации и лизиса, РИФ, реакции иммо-

билизации лептоспир антисывороткой, или используют генодиагно-

стику (ПЦР и др.)

Биологический метод.

Морским свинкам внутрибрюшинно вводят 4-5 мл исследуемого

материала от больного в первые дни заболевания. Через 3-4 суток ис-

следуют экссудат брюшной полости на наличие лептоспир в «темном

поле». Гибель морских свинок наступает через 8-14 дней. В трупном

материале выявляют лептоспиры путем микроскопии мазков-

отпечатков из внутренних органов, окрашенных методом серебрения.

Серологический метод.

Исследуют антитела, начиная со 2-3 недели. Ставят РПГА, РСК

или реакцию микроагглютинации-лизиса.

Можно использовать ИФА, непрямую РИФ. Диагностический

титр равен 1:400. Лучше исследовать сыворотку в динамике, т.к. титр

антител быстро нарастает.

Специфическая профилактика.

По эпидпоказаниям работникам животноводческих ферм вводят

инактивированную жидкую лептоспирозную вакцину из штаммов че-

тырех серологических групп.

С целью неспецифической профилактики осуществляют ветери-

нарный надзор за здоровьем животных; санитарный контроль за чи-

стотой водных источников, дератизацию, не разрешается пить неки-

пяченую воду в очагах и купаться в водоемах, где осуществляется во-

допой скота.

Лечение. Применяют антилептоспирозный иммуноглобулин, по-

лученный после гипериммунизации волов смесью убитых культур

шести серологических групп лептоспир, а также антибиотики (бета-

лактамы, доксициклин).

283

15.4. Патогенные спириллы

15.4.1. Кампилобактерии

Кампилобактериоз – острое инфекционное заболевание, харак-

теризуется общей интоксикацией и преимущественным поражением

ЖКТ.

Род Campylobacter включает 13 видов и несколько подвидов. Ос-

новной причиной заболевания у людей служат бактерии C. jejuni,

C. fetus и их подвиды.

Свойства

Морфологические свойства: представляют собой грамотрица-

тельные тонкие изогнутые (1-2 завитка) палочки, имеют S-образную

форму или форму «крыла чайки», подвижны, имеют 1 или 2 жгутика,

обладают характерным винтообразным движением. Спор, капсул не

образуют. Толщина клеток 0,2 – 0,5 мкм, длина 0,5 – 8 мкм.

Культуральные свойства: требовательны к условиям культивиро-

вания. Являются микроаэрофилами – требуют пониженной концен-

трации О

и повышенного содержания СО

(капнофилы). В качестве

консерванта при транспортировке используют тиогликолевую среду.

Выращивают в анаэростате при температуре 42

С, рН 7,2; для созда-

ния оптимальной газовой среды часть воздуха в анаэростате замеща-

ют смесью из азота и углекислоты.

Также проводят культивирование на специальных селективных

питательных средах с активированным углем (как редуцирующее ве-

щество), витаминами, кровью. Для подавления сопутствующей мик-

рофлоры в среды добавляют полимиксин В, линкомицин и другие ан-

тибиотики.

Биохимические свойства: биохимически малоактивны. Хемоор-

ганотрофы, окислительный тип метаболизма. Углеводы не ферменти-

руют. Энергию получают путем расщепления аминокислот. Патоген-

ные виды отличаются от непатогенных продукцией каталазы. Оксида-

зоположительны.

Антигены: Имеют термостабильный О-АГ – ЛПС, и термола-

бильный H-АГ. О-АГ определяет иммунологическую специфичность

возбудителя – антигенные различия между сероварами обусловлены

варьированием углеводного состава ЛПС. H-АГ – жгутиковый, белко-

вый, общий для всех сероваров.

Факторы патогенности: имеют адгезины к клеткам эпителия ки-

шечника, энтеротоксины (термостабильный и термолабильный), эн-

дотоксин.

Резистентность. Устойчивы во внешней среде, при 4°С могут со-

храняться в почве, воде, молоке несколько недель, в замороженном

284

мясе несколько месяцев. Устойчивы к действию кислоты желудочно-

го сока и желчи.

Чувствительны к высушиванию и солнечному свету, воздей-

ствию дезинфицирующих веществ.

Характеристика заболевания

Источник инфекции: в основном больные домашние животные и

птицы. Животные при заражении либо погибают, либо становятся но-

сителями, инфицируют почву, воду. Возможно заражение через мясо,

молоко.

Пути передачи алиментарный, трансплацентарный. Повышенный

риск заболевания камплобактериозом отмечен у людей при профес-

сиональном контакте с сельскохозяйственными животными, ново-

рожденные и дети школьного возраста.

Патогенез. Возбудители попадают через рот в желудочно-

кишечный тракт; из-за выраженных адгезивных свойств легко при-

крепляются к энтероцитам, благодаря жгутикам перемещаются вдоль

эпителия и проникают через мембрану эпителиальных клеток.

Колонизация кампилобактериями тонкой кишки приводит к раз-

витию воспалительных изменений и отека слизистой оболочки. У

ослабленных людей развивается бактериемия, возбудитель проникает

в кровь и разносится в различные органы (сердце, ЦНС, легкие, пе-

чень, суставы).

Клиническая картина в большинстве случаев протекает как га-

стероэнтерит. Отмечается повышение температуры, тошнота, рвота,

колющие боли в животе и диарея (стул обильный, жидкий, пенистый,

зловонный, до 10 раз в сутки).

Возможны генерализованная форма инфекции, бактерионоси-

тельство и хронический кампилобактериоз.

Многообразие клинических проявлений часто делают клиниче-

скую диагностику невозможной.

Лабораторная диагностика

Материал для исследования: основной – фекалии, может быть

кровь, ликвор и др.

Микроскопический метод – при фазовоконтрастной микроско-

пии определяют характерное винтообразное движение. Для определе-

ния типичной морфологии мазки окрашивают по Граму.

Бактериологический метод. Посевы материала проводят на се-

лективные питательные среды, дифференцирование возбудителя про-

водят по биохимическим и антигенным свойствам.

Серологический метод: исследуют парные сыворотки, взятые c

интервалом 10-14 дней, в РСК, РПГА, ИФА.

Профилактика – неспецифическая.

285

Лечение: используют препараты, снижающие желудочную сек-

рецию (омепразол), и антибиотики (макролиды, аминогликозиды,

тетрациклины и др.)

15.4.2. Хеликобактерии

Таксономия. К роду Helicobacter в настоящее время относится до

10 видов микроорганизмов (Helicobacter pylori, Helicobacter heil-

mannii, Helicobacter mustelae, Helicobacter felis и т.д). Основным воз-

будителем заболеваний у человека является H. pylori. Определенное

значение в патологии имеет H. heilmannii. Считается, что Helicobacter

pylori играет существенную роль в патогенезе острого и хронического

гастритов, язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки. Кроме

того, инфекция Helicobacter pylori является предрасполагающим фак-

тором в развитии рака желудка и лимфоцитарной опухоли желудоч-

но-кишечного тракта (мальтомы).

Морфологические свойства. Это грамотрицательные, короткие,

извитые S-образные бактерии средних размеров, подвижные, имеют

4-5 жгутиков, лофотрихи (рис. 17). Содержание Г+Ц составляет 35-

37%.

Культуральные свойства. Хорошо растут в микроаэрофильных

условиях, в аэробных и анаэробных условиях не растут. Температур-

ный оптимум 37 С, не растут при температуре 25-28 и 42 С, хорошо

растут на кровяном агаре, на средах, содержащих 10% сыворотки. Не

растут на средах, содержащих глицерин, желчные соли и NaCl.

Биохимические свойства. Оксидазо- и каталазоположительны,

проявляют выраженную уреазную активность, обладают фосфатазой,

образуют H

S, не свертывают молоко.

Антигены. Имеется О-АГ – ЛПС, Н-АГ, а также поверхностные

мембранные белковые АГ (OMP-белки), по которым определяют ти-

поспецифичность возбудителя с помощью моноклональных АТ.

Факторы патогенности. В патогенезе существенное значение

имеют адгезины возбудителя, вакуолизирующий цитотоксин (VacA),

поражающий эпителий желудка, белок CagA – продукт генов остров-

ков патогенности, ферменты супероксиддисмутаза и каталаза.

Характеристика заболевания

Источник инфекции – больные люди.

Патогенез. При пероральном попадании возбудителя большое

число бактерий скапливается в антральной части желудка, так как там

мало клеток, секретирующих соляную кислоту, что помогает выжива-

нию бактерий на поверхности эпителия. Проникая через слой слизи,

хеликобактеры прикрепляются к эпителиальным клеткам (в области

межклеточных ходов адгезины микроба связываются с мембранными

гликолипидами, компонентами слизи), проникают в железы слизи-

286

стой оболочки, разрушают слизистый слой и обусловливают контакт

желудочного сока со стенкой органа. ЛПС стимулирует выделение

ИЛ-8, миграцию нейтрофилов и способствует развитию острого вос-

паления. Локализация в области межклеточных ходов обусловлена

хемотаксисом к местам выхода мочевины и гемина. Под действием

фермента уреазы мочевина превращается в аммиак, который повре-

ждает слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки.

Кроме того, аммиак нейтрализует соляную кислоту желудка, способ-

ствуя выживанию хеликобактерий.

Клинические проявления не отличаются от симптомов га-

стродуоденитов. Инкубационный период – 7 суток. В острой фазе за-

болевания отмечается изменение рН желудочного сока, тошнота, рво-

та, в дальнейшем появляются симптомы язвенного гастродуоденита.

Лабораторная диагностика

Материал для исследования: биоптаты слизистой оболочки же-

лудка и двенадцатиперстной кишки.

Бактериоскопический метод. Выявляют бактерии в препаратах,

окрашенных гематоксилин-эозином или акридиновым оранжевым. В

фазовоконтрастном микроскопе определяют характерную подвиж-

ность.

Бактериологический метод. Производят посев материала на кро-

вяной агар с амфотерицином, культивируют в термостате 5-7 суток

при 37 в микрофильных, аэробных и анаэробных условиях. Вид мик-

роба определяют по характерной морфологии и виде колоний, спо-

собности к росту только в микроаэрофильных условиях, по наличию

оксидазной и уреазной активности.

Профилактика и лечение. Специфическая профилактика не раз-

работана. Для лечения используются схемы, включающие ингибито-

ры желудочной секреции (блокатор протонного насоса омепразол),

антибиотики (кларитромицин, азитромицин, доксициклин, метрони-

дазол), коллоидный субцитрат висмута (Де-нол).

287

XVI. ЛЕГИОНЕЛЛЫ

Легионеллы – возбудители тяжелых пневмоний, реже они вызы-

вают перитониты и поражения нервной системы.

Свойства

Таксономия. Legionella pneumophiia относится к семейству

Legionellaceae, роду Legionella. Возбудитель открыт в 1977 г. Мак-

Дейдом и Шепардом при вспышке этого заболевания, которая была

зарегистрирована в 1976 г. в Филадельфии на съезде Американского

легиона (организации ветеранов), при этом заболел 221 человек, 34

человека умерло.

Морфологические свойства. Легионеллы – это мелкие, поли-

морфные грамотрицательные палочки с заостренными концами, ино-

гда встречаются нитевидные формы. Спор и капсул не образуют,

имеют жгутики, которые располагаются полярно (амфитрихи), в ци-

топлазме обнаруживают липидные включения.

Культуральные свойства. Аэробы, хорошо растут в присутствии

5% СО

на специальных средах (угольно-дрожжевой агар, среды с ци-

стином, кровью, железом), оптимум температуры роста 35-37

С. На

3-5 день появляются колонии с коричневым пигментом, диффунди-

рующим в агар.

Легионеллы – факультативные внутриклеточные паразиты, хо-

рошо размножаются в желточном мешке куриного эмбриона и куль-

туре клеток. Некоторые легионеллы обладают аутофлюоресценцией

(облучение УФ-лучами вызывает бело-голубое свечение).

Биохимические свойства: разжижают желатин, разлагают крах-

мал, не ферментируют углеводы и мочевину, не редуцируют нитраты,

выделяют каталазу, оксидазу, протеазы.

Антигены. Имеют видоспецифический О-антиген, по которому в

реакции иммунной флюоресценции установлено 12 серогрупп.

L.рneumophila относится к I серогруппе. Н-антиген не имеет диагно-

стического значения. Есть общие антигены с Chlamydia psittaci.

Факторы патогенности. Эндотоксин и экзотоксиноподобные

субстанции обладают цитотоксическим, гемолитическим (растворяют

эритроциты морской свинки), некротическим действием, оказывают

избирательный тропизм на легочную ткань при размножении легио-

нелл в альвеолярных макрофагах и моноцитах. У L. pneumophilia име-

ется два низкомолекулярных токсина: цитотоксин с молекулярной

массой 1200 Да, влияющий на кислородный метаболизм полиморфно-

ядерных лейкоцитов, и токсин (1300 Да), ингибирующий «дыхатель-

ный взрыв» в фагоцитах.

Секреторный белок цитолизин (Zn-металлопротеаза) обладает

протеолитической и токсической активностью, нарушает фагоцитоз.

288

Фосфолипаза гидролизует фосфатидилхолин и ингибирует бактери-

цидные функции нейтрофилов. Zn-протеинкиназа и кислая фосфата-

за фосфорилируют субстраты в клетках.

Резистентность. Устойчивы в окружающей среде. В течение года

могут сохраняться в водопроводной воде, в системе горячего водо-

снабжения, в системах охлаждения промышленных предприятий.

Стимулируют размножение легионелл металлы и синтетические ма-

териалы, сине-зеленые водоросли и амебы. Они защищают легионел-

лы от высокой концентрации хлора. Легионеллы чувствительны к

этиловому спирту, фенолу, формалину, высокой температуре. Для

дезинфекции воды используют кальция гипохлорит.

Характеристика заболевания

Пути передачи. Обычно воздушно-капельный: человек инфици-

руется при попадании возбудителя в верхние дыхательные пути с

мелкодисперсным аэрозолем. Факторами передачи являются почва,

вода системы кондиционирования воздуха. Чаще болеют легионелле-

зом мужчины среднего и пожилого возраста, особенно работники во-

дохозяйств, прачечных, бань.

Патогенез: возбудитель проникает в легкие, в процесс вовлека-

ются зоны интенсивного газообмена. Заболевание начинается с ниж-

них отделов дыхательных путей, терминальных бронхиол, альвеол,

что сопровождается легочной инфильтрацией. Макрофаги поглощают

возбудителя, выделяют цитокины, которые стимулируют воспали-

тельные реакции. В очаге накапливаются нейтрофилы, альвеолярные

макрофаги. Взаимодействие легионелл с фагоцитирующей клеткой

происходит в несколько этапов: контакт возбудителя с рецепторами

ее поверхности; проникновение в фагоцит и включение механизмов,

ингибирующих бактерицидное действие фагосомы; образование «ре-

пликативной вакуоли», внутриклеточное размножение возбудителя,

приводящее к гибели фагоцита. При фагоцитозе легионеллы вызыва-

ют ингибицию «кислородного взрыва», изменение рН среды фагосо-

мы.

В паренхиме органов формируются абсцессы, они могут вскры-

ваться, образуя каверны. Возможна диссеминация возбудителя с кро-

вью в различные органы и ткани, что приводит к многообразным про-

явлениям заболевания: болезнь легионеров (тяжелая пневмония), пон-

тиакская лихорадка (интоксикация без признаков пневмонии) и т.д.

Клинические проявления. Инкубационный период составляет 5-7

дней. Начало острое, озноб, лихорадка, головная боль, миалгии, арт-

ралгии. Со 2-3 дня присоединяется кашель, одышка, боли в груди.

Возможен инфекционно-токсический шок со смертельным исходом

при явлениях легочной и сердечно-сосудистой недостаточности. При

легионеллезе может поражаться ЦНС, пищеварительная система,

289

почки. Грозными признаками неблагоприятного исхода болезни яв-

ляются геморрагическая сыпь, носовое и легочное кровотечение.

Иммунитет стойкий, типоспецифический, носит гуморальный, в

меньшей степени клеточный характер.

Лабораторная диагностика

Материал для исследования: забирают плевральную жидкость,

мокроту, кровь, кусочки легочной ткани (трупный материал).

Экспресс-диагностика. Применяют РИФ, ВИЭФ для выявления

антигена в исследуемом материале, ПЦР или метод ДНК-зондов,

ИФА с моноклональными антителами.

Бактериологический метод. Делают посев материала на угольно-

дрожжевой агар, выросшие коричневые колонии подвергают микро-

скопии, ставят реакцию агглютинации, определяют биохимические

свойства. Можно выращивать возбудителя в культуре ткани, курином

эмбрионе и заражать морских свинок.

Серологический метод проводится с использованием парных сы-

вороток. Ставят РПГА, непрямую РИФ. Диагностическим считается

нарастание титра АТ в 4 раза или высокие титры антител 1:128 (и

выше) при однократном исследовании на поздних стадиях болезни.

Профилактика неспецифическая. Проводится охрана источников

водоснабжения от загрязнения, обеззараживание ванных помещений,

душевых сеток формалином; гиперхлорирование вод замкнутых си-

стем. Осуществляется контроль за кондиционированием воздуха,

тщательная стерилизация больничного оборудования, особенно при-

боров, используемых в терапии органов дыхания. В лабораториях при

работе с материалом от больных легионеллезом обязательно исполь-

зуют резиновые перчатки, маски и спецкостюмы. Необходима обра-

ботка полости рта. Все выделения от больных нужно тщательно дез-

инфицировать. Больных размещают в отдельные палаты.

Лечение – антибиотикотерапия; наиболее эффективны современ-

ные макролиды (эритромицин, кларитромицин, азитромицин).

290

XVII. ПАТОГЕННЫЕ РИККЕТСИИ

Риккетсии вызывают риккетсиозы – острые трансмиссивные за-

болевания, которые проявляются обильной сыпью, интоксикацией,

васкулитом, поражением ЦНС, внутренних органов.

Таксономия: относятся к порядку Rickettsiаles. Он включает в се-

бя 3 семейства: Rickettsiаceae, Bartonellaceae, Anaplasmataceae.

Семейство Rickettsiаceae включает род Rickettsiа (виды

R.prowazekii, R. typhi, R. conorii, R. sibirica, R. akari и др.), и род Orien-

tia (вид O. tsutsugamushi).

Семейство Bartonellaceae включает род Bartonella, в который

входят патогенные виды B.quintana, B.henselae (бывшие представите-

ли рода Rochalimaea).

До недавнего времени к риккетсиям относили род Coxiella, со-

держащий вид C. burnetii. В настоящее время коксиеллы выделены из

семейства Rickettsiаceae в отдельную группу возбудителей. Таксоно-

мически эта группа наиболее близка к семейству Legionellaceae.

Среди риккетсиозов выделяют:

1. Антропонозные риккетсиозы – эпидемический сыпной тиф и

волынская лихорадка. Источником инфекции являются больные лю-

ди, переносчиками – вши;

2. Зоонозные риккетсиозы (эндемический сыпной тиф, пятни-

стые лихорадки, пароксизмальные лихорадки и т.д.). Источниками

инфекции являются домашние и дикие животные, грызу-

ны. Переносчики – клещи. У клещей наблюдается трансовариальная

передача инфекции, поэтому заболевания носят эндемический харак-

тер, наблюдается природная очаговость.

П.Ф.Здродовский все патогенные риккетсии подразделил на

5 групп:

1. Группа сыпного тифа – R. prowazekii, R. typhi.

2. Клещевых пятнистых лихорадок – R. conorii, R. sibirica,

R. akari.

3. Краснотелковых клещевых лихорадок – O. tsutsugamushi.

4. Пневмотропных лихорадок (лихорадка Ку) – Coxiella burnetii.

5. Пароксизмальных лихорадок – Bartonella quintana.

Наибольшую роль в патологии человека играют возбудители из

группы сыпного тифа и возбудители пневмотропной или Ку-

лихорадки.

Общие свойства

Морфологические. Выражен полиморфизм, очень малый попе-

речник клетки. Могут быть палочковидные, шаровидные, нитевидные

и фильтрующиеся формы. Плохо воспринимают краски из-за липид-