Эйхгорн Г. (ред.) Неорганическая биохимия. Том 1

Подождите немного. Документ загружается.

Гемэритрин

403

14. Kllppenstein G. L., Holleman J. W., Klotz I. M., Biochemistry, 7, 3868 (1968).

15. Pearson R. G., Survey of Progress in Chemistry, Vol. 5, Academic Press, New

York, 1969.

16. Fan C. C., York J. L., Biochem. Biophys. Res. Commun., 36, 365 (1969).

17. Rill R. L., Klotz I. M., Arch. Biochem. Biophys., 133, 103 (1969).

18. Ball P. W., Coord. Chem. Rev., 4, 361 (1969).

19. Spiro T. G., Saltman P., in P. Hemmerich et al. (eds.), Structure and Bonding,

Vol. 6, Springer-Verlag, New York, 1969, 116—156.

20. Kambe K, J. Phys. Soc. (Japan), 5, 48 (1950).

21. Mulay L. N., Hofmann N. L., Inorg. Nucl. Chem. Lett., 2, 189 (1966).

22. Okamura M. Y., Hoffman B. M., J. Chem. Phys., 51, 3128 (1969).

23. Johnson C. E., in A. Ehrenberg (ed.), Magnetic Resonance in Biological

Systems, Pergamon, New York, 1966, p. 405.

24. Johnson C. E., Hall D. O., Nature, 217, 217 (1968).

25. Okamura M. Y., Klotz I. M., Johnson C. E., Winter M. R. C., Williams R. J. P.,

Biochemistry, 8, 1951 (1969).

26. Reiff W. M., Long G. J., Baker W. A., J. Am. Chem. Soc., 90, 6347 (1968).

26a. Lippard S. J., Schugar H., Walling C., Inorg. Chem., 6, 1825 (1967).

27. Dunitz J. D., Orgel L. E., J. Chem. Soc., 1953, 2593.

27a. Owen J., Thoruley J. H. M., Rep. Progr. Phys., 29 (2), 675 (1966).

28. Kubo Af., Bull. Chem. Soc. Japan, 26, 246 (1953).

29. York L., personal communication.

30. Gray H. B., personal communication.

31. Moss T., personal communication.

32. Garbett K- Johnson C. E., Klotz I. M., Okamura M. Y., Williams R. J. P. (1969),

in preparation.

33. Marchant L., Hoffman B. M., personal communication.

34. Gilleo M. A., Phys. Rev., 109, 777 (1958).

34a. Wang B.. Sehaefer W. P., Science, 166, 1404 (1969).

35. Basolo F., Pearson R. G., Mechanism of Inorganic Reactions, 2nd edn., John

Wiley and Sons, Inc., New York, 1968, pp. 641—648.

36. MeGinnety J. A., Doedens R. J., Ibers J. A., Science, 155, 709 (1967).

37. Grumbliss A. L., Basolo F., J. Am. Chem. Soc., 92, 55 (1970).

38. Rossi-Fanelli A., Antonini E., Arch. Biochem. Biophys., 80, 299, 308 (1959).

39. Rossi-Fanelli A., Antonini E., Cupato A., Arch. Biochem. Biophys., 85, 37

(1959).

40. Klotz I. M., Klotz T. A., Science, 121, 477 (1955).

41. Wang J. H., Accounts Chem. Res., 3, 90 (1970).

42. Vallee B. L., Williams R. J. P., Proc. Natn. Acad. Sci. U. S., 59, 498—505

(1968).

43. York J. L., Bearden A. J., Biochemistry, 9, 4549 (1970).

44. Garbett K., Johnson C. E.. Klotz I. M., Okamura M. Y., Williams R. J. P., Arch.

Biochem. Biophys., 142, 574 (1971).

45. Moss T. H., Moleski C., York J. L., Biochemistry, 10, 840 (1971).

46. Dawson J. W., Gray H. B., Hoenig H. E., Rossman G. R., Schredder J. M.,

Wang R., Biochemistry, II, 461 (1972).

126*

ГЛАВА 12

ГЕМОЦИАНИН

Р. Лонтье, Р. Виттерс

Lontie R., Witters R., Laboratorium voor Biochemie,

Katholieke Universiteit te Leuven, В-3000, Louvain, Belgium

1. ВВЕДЕНИЕ

В 1847 г. Харлесс [1] сообщил о том, что в голубой ,крови

улитки Helix pomatia присутствует медь. В 1878 г. Фредерик [2]

описал бесцветный внеклеточный белок, выделенный им из крови

Octopus vulgaris, который при взаимодействии с кислородом да-

вал неустойчивое соединение, окрашенное в темно-синий цвет. Им

и 'был впервые введен термин «гемоцианин», который составлен

из корней греческих слов саца (кровь) и OTavog (синий). Это,

конечно, не означает, что в белке содержится гемовая группа.

К настоящему моменту опубликовано несколько обзоров, по-

священных гемоцианину, в которых рассматриваются его распро-

страненность в живых организмах, состав, молекулярная масса,

его диссоциация, связывание с кислородом и имунные свойства

[3-14].

2. РАСПРОСТРАНЕНИЕ В ЖИВОТНОМ МИРЕ

Гемоцианины обнаружены в артроподах (членистоногих) и

моллюсках и характеризуются различным содержанием меди в за-

висимости от биологического типа (табл. 12.1).

Типичными представителями членистоногих, в крови которых

содержатся гемоцианины, являются краб-наездник из класса ме-

ростомовых, лангуста, омар и некоторые крабы из класса рако-

образных (отряд декаподов). Гемоцианины найдены в таких мол-

люсках, как блюдечко, волокнистый рожок, пульмонатная улитка

из класса гастроподов, из класса головоногих — кальмар, карака-

тица (отряд декаподов) и осьминог (отряд октоподов) (табл. 12.1).

Гемоцианины обнаружены также в моллюсках хитонах из класса

амфинейров [33—35]. Кроме того, они найдены в скорпионах [33,

36] (класс паукообразных, см. в табл. 12.1 Androctonus australis),

пауках [17, 37, 38], в некоторых ракообразных из отрядов изопо-

дов [39—41] и амфиподов [39, 41] и, наконец, в сороконожках

(класс хилоподов) [42].

Гемоцианин

405-

Таблица 12.1

Коэффициенты седиментации (S

) основного компонента, содержание меди

и минимальная молекулярная масса в расчете на один атом меди типичных

гемоцианинов

Организм

Литература

Cu, % Литература

M/Cu

Членистоногие

Меростоматы

Limulus polyphemus

56,6

21 0,170 16 37 400

Паукообразные

Androctonus australis

33,0 17

0,180

18 35 300

Ракообразные

Jasus Ialandii

17,1

0,176

36 100

Palinurus vulgaris

16,4 21 0,170

37 400

Homarus americanus

24,5

6,175

36 300

Н. vulgaris

22,6

0,169

16 37 600

Eriphia spinifrons 24,0

0,167

16 38 000

Cancer magister

25,0

0,166 25

38 300

Carcinus maenas

23,3

21 0,173

36 700

Maja squinado 23,4 26 0,182

7 34 900

Среднее: 36 700

Моллюски

Гастроподы

Busycon canaliculatum 102,0

15 0,245

25 900

Helix pomatia

104,3

0,250

25 400

Murex truculus 102,7

29 0,257

16 24 700

Головоногие

Sepia officinalis

55,9 21

0,256

7 24 800

Loligo pealei

59,0 30

0,260

27,31

24 400

Octopus vulgaris

49,3

0,250

16,32 25 400

Eladone moschata

49,1

21 0,252 16

25 200

Среднее:

25 100

3. МОЛЕКУЛЯРНАЯ МАССА И ЧЕТВЕРТИЧНАЯ

СТРУКТУРА

Содержание меди в гемоцианине антроподов колеблется от

0,166 до 0,180%, в гемоцианине моллюсков —от 0,245 до 0,260%.

Минимальная молекулярная масса соответственно равна 36 700 и;

и 25 100 (см. табл. 12.1, а также [16]).

Поведение гемоцианинов артроподов при ультрацентрифугиро-

вании соответствует нескольким коэффициентам седиментации:

165, 245, 335 и 575 (см. табл. 12.1 и работы [21, 43]). В гемо-

406 Г лава

цианине из Limulus polyphemus, например, в области устойчивости

обнаруживаются все четыре указанных компонента [21]. Эти ком-

поненты после негативного окрашивания можно изучать с по-

мощью электронного микроскопа [44—46]. Их рассматривают как

соответственно мономеры, димеры, тетрамеры и октамеры [17,47].

Например, мономеры (коэффициент седиментации 165, разме-

ры 10X10 нм) наблюдались у Palinurus vulgaris [45] и изопода

а 6 в

Рис. 12.1. Предполагаемая модель мономеров с коэффициентом седиментации

16S гемоцианинов членистоногих.

а — искаженное октаэдрическое расположение шести функциональных субъединиц; 6 — 12

субъединиц, расположенные попарно (вид сверху): в — то же, вид сбоку.

Oniscus asellus [46], димеры (245, 22X9 нм) —у Cancer pagurus

[45] и Homarus vulgaris [44, 46, 48], тетрамеры (335, 22Х

Х20 нм)—у паукообразных Nemesia cementaria [17, 46, 47] и

Avicularia metalliea [45], октамеры (575, 21X24 нм) —у Limulus

polyphemus [45, 47].

Гемоцианин из Homarus vulgaris, рассматриваемый как димер,

имеет молекулярную массу 825 000 [22]. Каждый мономер состо-

ит, вероятно, из 12 субъединиц с молекулярной массой 34 400,

которая соответствует нефункционирующим субъединицам, вы-

деленным после сукцинилирования [23].

Предполагаемая модель мономера показана на рис. 12.1. С по-

мощью октаэдрического расположения шести сфер можно объяс-

нить все типы контуров мономеров, наблюдаемые через электрон-

ный микроскоп: правильный шестиугольник, квадрат, прямоуголь-

ник и ромб. Если молекулярная масса действующих субъединиц

достигает 68000—70 000 [23], то, согласно октаэдричеекой модели

.Левина [44], для объяснения наблюдаемых контуров мономера

необходимо расположить 12 более мелких субъединиц попарно

в вершинах октаэдра. Здесь возникает вопрос, обладает ли пеп-

тид одного типа, образующий одну субъединицу, стерическими

возможностями для создания предполагаемой четвертичной струк-

туры.

Гемоцианин

407-

Гемоцианины моллюсков также изучались методами ультра-

центрифугирования [21, 33, 43, 49] и электронной микроскопии

[44, 45, 50]. Формы частиц этих белков, наблюдаемые с помощью-

электронного микроскопа после негативного окрашивания, пока-

заны на рис. 12.2. Видимые в микроскоп прямоугольники и кру-

жочки можно интерпретировать как различные ракурсы частиц

59 S

105 S

155

Ш5

Рис. 12.2. Форма и размеры частиц гемоцианинов моллюсков, наблюдаемые через

электронный микроскоп после негативного окрашивания, и соответствующие им

коэффициенты седиментации.

цилиндрической формы, обладающих осью симметрии пятого по-

рядка.

В гемоцианинах моллюсков ультрацентрифугирование выявля-

ет два типа частиц: с коэффициентом седиментации 595 (напри-

мер, у организмов Loligo pealei) и с 'коэффициентом седиментации

1055 (например, Helix pomatia) (рис. 12.2,а и б и табл. 12.1).

Частицы гемоцианина из Cymbium neptuni [46] и Buccinum unda-

tum [51], по данным электронной микроскопии, также имеют ци-

линдрическую форму. Частицы гемоцианина из Busyeon canalieu-

Iatum проявляют, кроме того, тенденцию к линейной полимериза-

ции [45] (рис. 12.2, в). Модели этих частиц, предложенные на

основании данных гидродинамических измерений [52], подтверди-

лись данными, полученными при их ультрацентрифугировании:

коэффициенты седиментации частиц варьируются от 595 до 1785.

Гемоцианин из Kelletia kelletia в условиях изоэлектричеекой точ-

ки существует в виде длинных линейных полимеров [53]

(рис. 12.2, г).

Некоторые гемоцианины с коэффициентом седиментации 1055,

как, например, а-компонента гемоцианина из Helix pomatia, в пре-

делах области стабильности в присутствии 1 моль/л хлоридов ще-

лочных металлов делятся надвое [28, 54, 55] (р-компонента в этих

408

Г лава 10

же условиях не диссоциирует). При более высоких значениях рН

в области стабильности эти половины могут распадаться еще на

более мелкие, равные 1/10 и 1/20 долям исходной субъединицы

[28, 56]. При помощи измерения светорассеяния [57] было пока-

зано, что при добавлении небольших количеств иона Ca

+, сопо-

ставимых с содержанием этого иона в крови, область стабильно-

сти очищенного гемоцианина из Helix pomatia может быть рас-

ширена за счет смещения ее верхней границы рН от 8 до 10 [58].

Одна двадцатая доля субъединицы гемоцианина из Helix po-

matia, по-видимому, является его наименьшей функциональной

субъединицей, которую можно получить при подщелачивании [56]

или сукцинилировании [59]. Наименьшие субъединицы, наблюдав-

шиеся при рН 12,5 после сукцинилирования, восстановления и ал-

килирования имеют молекулярную массу 22 300 [60].

4. СПЕКТРЫ ПОГЛОЩЕНИЯ

Голубой цвет крови некоторых беспозвоночных, который вызы-

вал удивление еще у первых исследователей [1, 2], нельзя путать

с цветом действительно синих медьсодержащих белков, к каким

относится, например, церулоплазмин (А

акс 610 нм). Например,

синяя окраска гемоцианина из Helix pomatia в области стабиль-

ности, где молекулярная масса его частиц равна 9-IO

, представ-

ляет собой суммарный эффект поглощения и интенсивного ,рассея-

ния света. В проходящем же свете концентрированный раствор ге-

моцианина выглядит пурпурным.

В спектре поглощения океитемоцианинов, кроме обычной для

белков полосы при 280 нм, наблюдаются полосы при 346 и 580 нм

[4], обусловленные присутствием меди (табл. 12.2). Моляр-

Таблица 12.2

Молярные коэффициенты поглощения (л-моль-

-см-

) полос, обусловленных

присутствием меди гемоцианинов моллюсков, в расчете на 1 атом меди

Организм

"к

макс

Литература

Helix pomatia

346

8800

580

540

Loligo pealei

345

8900

580

370

Omma(to)sprephes sloatii pacificus

347

6100

580

390

Octopus vulgaris

347

8900

580 500

Гемоциапин

40S>

ный коэффициент поглощения деоксигенированного гемоцианина

находится в обратной зависимости от четвертой степени длины

волны (в видимой области [5], а также в видимой и ближней

ультрафиолетовой областях спектра [63]). Вклад рассеяния в

кажущийся коэффициент поглощения особенно велик для гемо-

цианинов с наибольшей молекулярной массой из гастроподов [55].

Значения молярных коэффициентов поглощения, приведенные в-

табл. 12.2 для гемоцианинов из Helix pomatia и Octopus vulgaris,

получены с учетом поправки на рассеяние, а для гемоцианинов из

Loligo pealei и Omma(to)streph.es sloani pacificus—с учетом по-

правки на рассеяние и на остаточное поглощение путем вычита-

ния спектров апогемоцианина и деоксигенированного темоциани-

на соответственно.

При понижении температуры до —195° С в спектрах поглоще-

ния гемоцианинов происходят 01братимые изменения. В спектре

гемоцианина из Cancer magister появляются две новые полосы с

максимумами поглощения при 420 и 652 нм, а полоса, находив-

шаяся в обычных условиях при 585 нм, смещается в область

566 нм [64]. В спектре гемоцианина из Octopus vulgaris при та-

кой же пониженной температуре появляется плечо при 440 нм и

полоса при 700 нм, а бывшая при 580 нм полоса смещается до

570 нм [62]. В спектре гемоцианина из Omma(to)strephes sloani

pacificus при комнатной температуре, кроме указанных в

табл. 12.2 полос, имеется также плечо при 800 нм [61].

Две основные полосы меди, наблюдаемые при комнатной тем-

пературе, проявляют оптическую активность. При измерении дис-

персии оптического вращения (ДОВ) в области этих полос был

обнаружен общий отрицательный эффект Коттона [30, 65]. Из-

мерения кругового дихроизма (КД) выявили две полосы с отри-

цательным эффектом Коттона, а две — с положительным

(табл. 12.3). Ван Хоулд [62] обратил внимание на удивительное

сходство спектров КД в области 490 и 590 нм гемоцианинов мол-

люсков и комплекса меди(II) с пептидом ацетил-Gly-Gly-His

[67].

В отличие от синих медьсодержащих белков в спектрах погло-

щения гемоцианинов полосы меди проявляются только в присут-

ствии кислорода. Предполагается, что активный центр оксигени-

рованного гемоцианина можно представить в виде следующих ре-

зонансных форм [12, 68]:

-е—Cu

ч—> Cu

OjTCu

ч—v Cu

Oi-Cu

из которых последняя наименее вероятна.

Основные полосы меди в спектрах поглощения гемоцианинов,

находящиеся при 346 и 580 нм, были отнесены к переходам с пе-

реносом заряда [69], причем подчеркивалось [71] сходство поло-

сы при 346 нм (Ige=3,9) с так называемой «пероксо-отецифиче-

410 Г лава 10

Таблица 12.3

Полосы в спектре КД гемоцианинов моллюсков

Организм

,IM

Литература

Организм

Литература

Loligo pealei

347 440

570

700

Octopus vulgaris

347

440

570

Heonp. 62

350 450 570 >700

Helix pomatia

346

485

578

710

Не публиковавшиеся ранее данные.

•ской» полосой комплекса декаммино-(х-пероксокобальт(Ш)—ко-

бальт(ГУ) (Ямакс =

341

нм, lge = 3,5) [70]. В этом комплексе,

а также в оксигенированном комплексе кобальта(II) с бис-(3-

фто,реал ицил альдегид)этилендиимином расстояние О—О равно

1,31 А, что близко к расстоянию О—О в супероксо-ионе O

(1,28 А) [72].

Появление двух дополнительных полос в спектрах поглощения

гемоцианинов при —195 °С или в их спектрах КД свидетельствует

о сходстве спектральных свойств меди в этих белках со свойства-

ми меди(II) в синих белках типа церулоплазмина или лакказы

[62, 73]. Указанные полосы в спектрах гемоцианинов мало отли-

чаются по положению от соответствующих полос в апектрах си-

них белков, но значительно отличаются по своей интенсивности.

По-видимому, их можно было бы отнести к d—^-переходам ме-

ди (II) [62]. Однако свежеприготовленные образцы оксогемоци-

анина при комнатной температуре не дают никаких сигналов

ЭПР в области g-фактора, близкого к 2,0. Это было проверено

на образцах из Cancer magister [74], Limulus polyphemus [75],

Jasus Ialandii [76], Octopus vulgaris [77], Busycon canaliculatum

[75] и Helix pomatia [28]. Гемоцианин из Jasus Ialandii при 77 К

дает сигнал ЭПР, интенсивность которого соответствует присутст-

вию 10% парамагнитных частиц от общего содержания меди [76].

Сигнал ЭПР от Cu(II), наблюдаемый у свежеприготовленного

гемоцианина из Homarus americanus, соответствует

U общего ко-

личества меди [78].

5. СВЯЗЫВАНИЕ КИСЛОРОДА

Еще первые исследователи гемоцианина отметили связь меж-

ду его синей окраской и поглощением кислорода [1, 2]. Его зна-

чение в процессе дыхания было показано на примере Sepia offi-

Гемоцианин

411-

cinalis [79] и Octopus vulgaris [80]. Хотя по поводу этой функции

гемоцианина иногда высказывались 'сомнения, она была оконча-

тельно установлена в работе Редмонда [81].

В условиях, которые существуют в крови, для большинства

гемоцианинов характерен кооперативный (положительный) эф-

фект связывания кислорода [5, 75, 82], причем величина п в урав-

нении Хилла достигает значений 3,5—4,0.

Если считать, что одна молекула кислорода связывается в ге-

моцианине двумя атомами ,меди [83—85], то в мономере гемо-

цианина из артроподов содержится 6 связывающих кислород

центров (рис. 12.1), а в гемоцианинах моллюсков — 90—100

(рис. 12.2, а) или 180—200 (рис. 12.2,6) таких центров. Таким об-

разом, гемоцианины должны описываться общей теорией алло-

стерических переходов помимо представлений о так называемом

гем-гемовом взаимодействии [86].

Кооперативный ,механизм поглощения кислорода активными

центрами гемоцианина из Helix pomatia теряется при диализе

[87]. При этом кривая оксигенации имеет вид гиперболы, что ука-

зывает на изолированность активных центров. Такой же характер

имеет ,кривая оксигенации гемоцианина в области рН от 4,0 до 9,0.

Если же в растворе свежеприготовленного гемоцианина создать

концентрацию ионов Ca

+ порядка 6-Ю

-3

г-ион/л (какая бывает

в крови), то при рН 7,8—8,2 можно вновь получить S-образную

кривую оксигенации, характерную для кооперативного механизма

поглощения кислорода [88]. Гемоцианин из Homarus americanus

теряет свойство 'кооперативного связывания кислорода при удале-

нии ионов Ca

+ в щелочной среде при низкой ионной силе раство-

ра, в результате чего происходит диссоциация белка на субъеди-

ницы, содержащие по одному активному центру [23].

S-образный характер кривых равновесия оксигенирования ге-

моцианинов связан, очевидно, с конформационными изменениями

функциональных субъединиц. Известен интересный пример влия-

ния оксигенации на четвертичную структуру гемоцианина из Loli-

go pealei [89]. Этот деоксигенированный гемоцианин в среде, со-

держащий Mg

+ в количестве

1 •

-3

г-ион/л, при рН от 6 до 10

обладает коэффициентом седиментации 595, но при частичной ок-

сигенации при рН 7 он диссоциирует на частицы размером в Vs

или Vio от размеров исходной субъединицы. Наблюдались также

небольшие отличия в спектрах КД (в области 250—280 нм) окси-

и деоксигемоцианина.

В опытах с гемоцианином из Levantina hierosolima было заме-

чено, что при деоксигенации сильно увеличивается флуоресцен-

ция гемоцианина [90]. Это явление может послужить новым сред-

ством изучения процесса связывания кислорода гемоцианином.

412

Г лава

6. СВЯЗЫВАНИЕ ДРУГИХ ЛИГАНДОВ

Гемоцианины обратимо взаимодействуют с окисью углерода,

образуя бесцветные соединения (не поглощающие света ни в ви-

димой, ни в ближней ультрафиолетовой областях). Гемоцианины,

по крайней мере моллюсков, образуют такие же соединения с CN

этилизоцианатом SCN

и тиомочевиной (при кратковременной об-

работке) .

Гемоцианин из Limulus взаимодействует с СО в том же соот-

ношении, что и с O

, однако относительно высокое сродство к оки-

си углерода проявляют только частицы размером в '/го исходной

субъединицы [91]. Гемоцианин из Octopus связывает СО в соот-

ношении 1СО:2Си, причем это соединение разрушается CN"

[32]. В случае Palinurus vulgaris никакого видимого взаимодейст-

вия гемоцианина с СО не было обнаружено [85]. Связывание

гемоцианина из Octopus vulgaris в комплекс с окисью углерода

было зафиксировано по ингибированию его псевдокаталазной и

псевдопероксидазной активности, а также непосредственным опре-

делением СО, выделяющейся при обработке этого комплекса ци-

анид-ионом [92]. Соединение СО с гемоцианином из Cancer та-

gister было изучено изотопным методом с помощью

CO [93].

Давление полунасыщения гемоцианина меченой окисью углерода,

измеренное в этой работе, оказалось равным 134 мм рт. ст. Спек-

трофотометрическое изучение конкурентного взаимодействия ге-

моцианина из Helix pomatia с окисью углерода и кислородом при

рН 9,2 дало величину константы равновесия, равную 1,00 [94]. Все

исследователи указывают на то, что гемоцианин связывает окись

углерода в стехиометрическом отношении ICO : 2Си, однако нет

прямых доказательств того, что она образует связь с обоими ато-

мами меди.

Исследование реакции гемоцианина из Limulus с цианид-ионом

при малых концентрациях последнего показало, что эта реакция,

по-видимому, частично обратима [95]. В работе [96] наблюда-

лось восстановление синей окраски при действии кислорода на

гемоцианин из Octopus vulgaris, обработанный цианидом. Эти дан-

ные трудно интерпретировать. Эксперименты, проводимые в лабо-

ратории авторов, показали, что гемоцианины из Helix pomatia об-

ратимо взаимодействуют с CN

при изученных концентрациях по-

следнего вплоть до 0,2 ммоль/л.

Гемоцианин из волнистого рожка Murex trunculus также обра-

тимо взаимодействует с этилизоцианатом [97].

При изучении реакции SCN

с оксигенированным гемоциани-

ном из Helix pomatia [98] было показано, что при постоянном рН

равновесие замещения кислорода на SCN

описывается следую-

щим уравнением:

k'jk

/С

([SC\n/p

1/2