Попова Т.Н., Рахманова Т.И., Попов С.С. Медицинская энзимология

Подождите немного. Документ загружается.

ЛДГ1 является использование смеси, подавляющей активность всех изофер-

ментов, содержащих М субъединицу. Такой смесью является: 1,6 гексанеди-

ол (700мМ), перхлорат натрия (825мМ) и хинидинтиоцианат (190мМ). Ре-

зультаты также тесно коррелируют с данными электрофореза и иммуноинги-

бирования.

ЛДГ1 наиболее быстро продвигается к аноду при электрофорезе,

термостабилен, ингибируется высокими концентрациями пирувата и в

меньшей степени мочевиной и оксалоацетатом. Реакция превращения лак-

тата в пируват, катализируемая ЛДГ1, протекает в органах с преимущест-

венно аэробным метаболизмом, где лактат является субстратом окисления.

Из него образуется пируват, который затем через ацетил-СоА окисляется

до СО

и Н

О, при этом энергия аккумулируется в виде молекул АТФ в

процессе окислительного фосфорилирования. ЛДГ1 присутствует в высо-

ких концентрациях в сердце, почках, мозге, много ЛДГ1 в эритроцитах.

Поэтому недопустим гемолиз при определении активности ЛДГ1.

Поскольку ЛДГ может окислять также a-гидроксибутират до a-

оксибутирата (в этом случае принято говорить об a-гидроксибутират-

дегидрогеназной активности (a-ГБДГ)), то в качестве аналога ЛДГ1 часто

рекомендуется определение a-ГБДГ, хотя активность a-ГБДГ несколько

выше, чем ЛДГ1, это связано с тем, что a-ГБДГ-активностью обладают все

без исключения изоферменты ЛДГ.

При диагностике инфаркта миокарда увеличение активности ЛДГ

является достоверным тестом в сроки от 12 до 32 часов после болевого

приступа. Она остается повышенной в течение 8–14 дней. Однократное ис-

следование ЛДГ1 обладает клинической специфичностью в отношении

инфаркта миокарда в 66 % случаев, а определение ее в динамике (через

каждые 4–6 часов в течение суток) – в 86 %. Если в сроки от 8 до 24 часов

после приступа ангиозных болей нет нарастания активности ЛДГ (а также

КК-МВ и АсАТ), то нет и инфаркта. У части больных наблюдается корре-

ляция между уровнем ЛДГ и обширностью инфаркта. В некоторых случаях

дополнительную информацию дает коэффициент ЛДГ1/ЛДГ2, который в

норме составляет 0,6–0,7. При остром инфаркте миокарда он становится

выше 1,0 и возвращается к норме через 2–3 недели.

ГБДГ при инфаркте миокарда повышается в те же временные интер-

влы, как ЛДГ достигает максимума на 2–3 день, и восстанавливается до

нормы на 10–20 день.

Повышение ЛДГ1 отмечается также при опухолях репродуктивных

органов: тератома, семинома яичка, дисгерминома яичника.

ЛДГ2, ЛДГ3 и ЛДГ4 обладают промежуточными свойствами. Актив-

ность этих изоферментов повышается при массивном разрушении тромбо-

цитов (эмболия легочной артерии, массивные гемотрансфузии) и вовлече-

нии в патологический процесс лимфатической системы. При нелимфоци-

тарных лейкозах увеличивается активность ЛДГ3 и ЛДГ4, причем степень

увеличения зависит от количества незрелых клеток. Увеличение ЛДГ3

иногда наблюдается при острых панкреатитах. Активность ЛДГ4 возраста-

ет при поражении печени вирусного, токсического или травматического

характера и обострении хронических гепатитов, в активную фазу ревма-

тизма, при кардиосклерозе с нарушением гемодинамики, остром нефрите,

при поражениях почек, опухолях печени, предстательной железы, шейки

матки, молочной железы, кишечника, при тяжелых формах диабета.

ЛДГ 5 при электрофорезе продвигается к аноду медленнее других

изоферментов, термолабилен, более чувствителен к ингибирующему влия-

нию мочевины и оксалоацетата и обладает самым малым сродством к a-

кетобутирату (в сравнении с другими изоферментами ЛДГ). Наибольшее

содержание этого изофермента характерно для скелетных мышц, печени,

кожи, слизистых оболочек, а также клеток некоторых злокачественных

опухолей. Значительное увеличение содержания ЛДГ5 отмечается при

травмах, воспалительных и дегенеративных заболеваниях мышц и многих

болезнях печени (гепатиты, циррозы и др.). Онкологические заболевания

(например лимфолейкозы) могут также сопровождаться увеличением

ЛДГ5. Активность ЛДГ5 повышается в активную фазу ревматизма, глубо-

ких поражениях почек, сопровождающихся их гипоксией, опухолях почек

и отторжении пересаженной почки, а также при тяжелых формах диабета.

Лейцинаминопептидаза

Лейцинаминопептидаза (ЛАП, КФ 3.4.11.1) лишь одна из нескольких

внутриклеточных аминопептидаз, которой особенно богаты желчевыводящая

система, поджелудочная железа и слизистая тонкой кишки. Теперь она назы-

вается аминопептидаза (цитозольная) там, где присутствует в высокой кон-

центрации. ЛАП относительно специфична для заболеваний гепатобилиар-

ной системы и обычно не повышается при поражении костей. ЛАП – более

чувствительный показатель холедохолитиаза и местастазов в печень у боль-

ных без желтухи, чем ЩФ. Активность в сыворотке может повышаться под

действием лекарств. Исследование фермента пропагандировалось, как пока-

затель плацентофетальной целостности со снижением значений при дистрес-

се плода, однако недавно было показано, что масса фермента не повышается

во время беременности, хотя его активность возрастает. Более того, полага-

ют, что активность при беременности обусловлена иммунохимически отлич-

ной аминопептидазой, а не самой ЛАП. Высокий уровень в моче лейцинами-

нопептидазы свидетельствует о нежизнеспособности донорской почки. Рефе-

рентные пределы: 15–40 МЕ/л (Назаренко Г.И. и др., 2002).

Липаза

Липаза (КФ 3.1.1.3) – фермент, катализирующий расщепление гли-

церидов на глицерин и высшие жирные кислоты. Уровень активности ли-

пазы в норме 0–190 МЕ/л (Назаренко Г.И. и др., 2002).

Этот энзим в организме человека вырабатывается рядом органов и

тканей, что позволяет различать липазу желудочного происхождения, под-

желудочной железы, липазу легких, кишечного сока, лейкоцитов и др. Наи-

более важной с клинической точки зрения является липаза поджелудочной

железы. Панкреатическая липаза играет главную роль в переваривании жи-

ров. Поскольку основным источником липазы является поджелудочная же-

леза, при ее заболеваниях происходит значительный выброс фермента в

циркулирующую кровь. Определение активности липазы в крови является

наиболее информативным критерием диагностики острого панкреатита.

Существует ошибочное представление, что при остром панкреатите содер-

жание липазы в крови увеличивается позже, чем амилазы, но остается по-

вышенным более продолжительное время. На самом деле содержание липа-

зы увеличивается и снижается параллельно повышению и снижению актив-

ности амилазы, но нормализация ее уровня происходит позже нормализации

амилазы. Иногда уровень липазы в крови повышается раньше, чем увеличи-

вается активность амилазы, и остается повышенным длительное время.

При остром панкреатите активность липазы в крови увеличивается в

течение нескольких часов после острого приступа, достигая максимума

через 12–24 ч (увеличивается до 200 раз), и остается повышенной в тече-

ние 10–12 дней. Прогноз заболевания является плохим, если уровень липа-

зы в крови повышается в 10 раз и более и не снижается до 3-кратного пре-

вышения нормы в течение ближайших нескольких дней. Диагностическая

чувствительность липазы в сыворотке крови для острого панкреатита со-

ставляет 86 %, специфичность – 99 %. Одновременное определение уровня

альфа-амилазы (кровь и моча) и липазы – основа диагностики острого пан-

креатита. Повышение обоих или одного из ферментов выявляется у 98 %

больных с острым панкреатитом.

В отличие от амилазы активность липазы не повышается при паро-

тите, внематочной беременности и раке легких. Отечная форма острого

панкреатита, как правило, не сопровождается повышением активности ли-

пазы; жировой панкреонекроз характеризуется выраженным повышением

активности липазы, сохраняемым до 2 недель; геморрагический панкрео-

некроз сопровождается лишь кратковременным повышением активности

липазы в 3,5 раза по сравнению с нормальным уровнем на 3-и–5-е сутки

заболевания. При гнойном панкреатите повышения активности липазы в

крови обычно не выявляется. Иногда повышение активности липазы отме-

чается у больных раком поджелудочной железы, хроническим панкреати-

том, при наличии кисты в поджелудочной железе.

Активность липазы в крови повышается при инфаркте кишки, пери-

тоните, желчной колике, при разрушении жировой ткани – костных пере-

ломах, ранении мягких тканей, после операций, при раке молочной желе-

зы. Гиперлипаземия при уремии и острой почечной недостаточности явля-

ется следствием застоя в поджелудочной железе.

5-Нуклеотидаза

5-Нуклеотидаза (5'-рибонуклеотид – фосфогидролаза; КФ 3.1.3.5)

катализирует гидролиз только нуклеотид-5-фосфатов. Фермент распро-

странен во многих тканях организма (печень, мозг, мышцы, почки, легкие,

щитовидная железа, аорта). В печени фермент присутствует в желчных ка-

нальцах, синусах и клетках Купфера. Уровень активности 5-нуклеотидазы

в сыворотке в норме 2-17 МЕ/л (Назаренко Г.И. и др., 2002). Возрастание

активности 5-нуклеотидазы происходит параллельно активности щелочной

фосфатазы при холестазах любой локализации, но данный фермент более

чувствителен по отношению к первичному и вторичному билиарному цир-

розу, а также к хроническому активному гепатиту. Главное отличие 5-

нуклеотидазы от щелочной фосфатазы: отсутствие реакции на костные за-

болевания. Считается, что 5-нуклеотидаза является специфической «желч-

ной» фосфатазой.

Сорбитолдегидрогеназа

Сорбитолдегидрогеназа (полиолдегидрогеназа, L-идитол, НАД

5-оксидоредуктаза, СДГ, КФ 1.1.1.14) катализирует реакцию окисления

сорбитола до фруктозы, при этом происходит восстановление НАД.

В норме сыворотка содержит лишь следы фермента (0–0,9 МЕ/л. См. Наза-

ренко Г.И. и др., 2002). Фермент органоспецифичен для печени и почек, в

других тканях активность незначительна (в селезенке – 1/10, в сердце –

менее 1/50 активности в печени). СДГ содержится преимущественно в ци-

топлазме гепатоцитов, поэтому повышение активности фермента специ-

фично отражает поражение печени. Активность СДГ увеличивается еще в

дожелтушный период вирусного гепатита и достигает максимальных вели-

чин в первые 10 суток желтушного периода острого гепатита (5–20 норм).

Нормализуется активность СДГ быстрее, чем АлАТ, но высокая специ-

фичность фермента выдвигает его на первое место при постановке диагно-

за вирусного гепатита. При хронических гепатитах и циррозе печени ак-

тивность СДГ возрастает в стадии обострения процесса. В первые 4 дня

обтурационной желтухи активность СДГ возрастает незначительно (в 2–

3 раза). Изолированное исследование активности СДГ не проводится, т.к.

нормальные показатели не исключают поражения печени. Однако опреде-

ление активности данного фермента в сочетании с другими показателями

дает ценную информацию.

Супероксиддисмутаза

Супероксиддисмутаза (супероксид'супероксид оксидоредуктаза,

СОД, КФ 1.15.1.1.) фермент (металлопротеин), катализирующий реакцию

превращения двух супероксидных радикалов друг с другом, превращая их

в менее токсичный пероксид водорода и кислород. Различают несколько

изоформ СОД, отличающихся по наличию кофакторов (металлов – медь,

цинк, марганец, железо). Содержание в эритроцитах – 1092–1817 Ед/г Hb

(Назаренко Г.И. и др., 2002).

При инфаркте миокарда СОД защищает сердечную мышцу от дейст-

вия свободных радикалов, образующихся при ишемии, при этом в сыво-

ротке крови при инфаркте миокарда регистрируется высокая активность

фермента. Степень повышения СОД обратно пропорциональна деятельно-

сти левого желудочка, что используется как маркер для оценки поврежде-

ния миокарда и при мышечной дистрофии.

Обнаружение больших концентраций СОД в организме возможно при

различных заболеваниях: ишемии органов, нефропатии, заболеваниях, со-

провождающихся воспалением (ревматоидный артрит). Высокий уровень

СОД у септических больных является ранним маркером развития у них рес-

пираторного дистресс-синдрома. Возможно значительное увеличение актив-

ности СОД при синдроме Дауна (трисомия по 21 хромосоме), поскольку ген

супероксиддисмутазы – Cu/Zn SOD располагается в 21 хромосоме. При дан-

ном заболевании и при старении, в том числе раннем, избыток СОД приводит

к накоплению пероксида водорода в мозговой ткани. При заболеваниях почек

уровень СОД возрастает на усиленное образование свободных радикалов,

после гемодиализа активность нормализуется. Уровень активности фермента

в сперме связан с подвижностью сперматозоидов; снижение активности СОД

приводит к нарушению подвижности данных клеток. Уровень СОД снижен у

больных с ослабленной иммунной системой, что делает таких больных чув-

ствительными к респираторным инфекциям с развитием пневмонии.

Уровень эритроцитарной СОД повышен у больных гепатитом, при

различных формах лейкемии. Эритроцитарная СОД бывает низкой при

ревматоидном артрите; по ее уровню можно судить об эффективности

проводимой терапии. Назначение больным с ревматоидном артритом пре-

паратов СОД приводит к ремиссии заболевания.

Фосфатазы. Щелочная фосфатаза

Фосфатазы – ферменты, катализирующие разрыв сложноэфирной

связи в моноэфирах фосфорной кислоты с образованием свободного орто-

фосфата (аниона ортофосфорной кислоты); относятся к классу гидролаз.

Щелочная фосфатаза (фосфогидролаза моноэфиров ортофосфорной

кислоты, ЩФ; КФ 3.1.3.1) широко распространена в тканях человека, осо-

бенно в слизистой оболочке кишечника, остеобластах, стенках желчных

протоков печени, плаценте и лактирующей молочной железе. Она катали-

зирует отщепление фосфорной кислоты от ее органических соединений;

название получила в связи с тем, что оптимум рН щелочной фосфатазы

лежит в щелочной среде (рН 8,6–10,1). Фермент расположен на клеточной

мембране и принимает участие в транспорте фосфора. Двухвалентные ио-

ны, такие как Mg

, Co

, Mn

, являются активаторами фермента, Zn

входит в структуру активного центра. Фосфаты, бораты, оксалаты подав-

ляют активность всех форм фермента. В сыворотке несколько изофермен-

тов ЩФ, семь из которых имеют наибольшее клинико-диагностическое

значение. Уровень активности щелочной фосфатазы в норме представлен в

таблице 3. Для диагностических целей чаще всего проводят определение

активности костной и печеночной форм фосфатазы.

Таблица 3

Уровень активности щелочной фосфатазы в норме

(реакция с фенилфосфатом) (Назаренко Г.И. и др., 2002)

Возраст Общая, МЕ/л Костная, %

Новорожденные 35–106

1 мес. 71–213 85

3 года 71–142 85

10 лет 106–213 85

Взрослые до 31 года 39–92 60

Взрослые старше 31 года 39–117 40

1. Костная ЩФ. В кости ЩФ секретируется остеобластами, ее роль

в формировании кости до конца не установлена. Предполагают, что она

участвует в созревании матрикса и его минерализации. Специфичность ко-

стной ЩФ, а также такие ее характеристики, как время полужизни в крови,

составляющее 1–2 дня, отсутствие процессов с ее участием в печени, вы-

деление из крови с помощью почек, приближают костную ЩФ к идеаль-

ным маркерам активности остеобластов. Костная ЩФ наиболее термола-

бильна, инактивируется при 55 ºС. Синтез костной ЩФ возрастает в про-

цессе дифференцировки остеобластов при ускоренном формировании кости.

Значительное увеличение ее активности в сыворотке крови наблюдается

при повышенной деятельности остеобластов: рост костей (у детей актив-

ность выше, чем у взрослых; увеличивается она в последний триместр бе-

ременности), возобновлении движений после длительного постельного

режима, переломах, деформирующем остите, рахите. Это характерно и для

процессов остеомаляции (злокачественные опухоли костей, миелома), а

также костного туберкулеза и лейкозов. Повышение активности костной

ЩФ при рахите отмечается чаще, чем увеличение содержания неорганиче-

ского фосфора; при выздоровлении активность ЩФ нормализуется позд-

нее, чем уровень кальция и фосфора, примерно в те же сроки, что и рент-

генологические показатели. Первичный и вторичный гиперпаратиреоз мо-

жет сопровождаться повышением активности ЩФ, что объясняется вовле-

ченностью метаболизма костной ткани в патологический процесс при ти-

реотоксикозе.

Интерпретация данных исследований костной ЩФ, однако, бывает

затруднена, что связано, с одной стороны, с половыми и возрастными осо-

бенностями ее активности, а, с другой стороны, с недостаточной специ-

фичностью методов, используемых для ее определения (имеется в виду

тартратрезистентная фракция ЩФ). Наиболее адекватными методами ис-

следования костной ЩФ в настоящее время считаются радиоиммунный и

иммуноферментный анализы с использованием моноклональных антител.

2. Печеночная ЩФ. Представлена двумя изоферментами. Первый

повышается в сыворотке крови при застое в печени и сниженной элимина-

ции фермента с желчью, его повышение происходит также во второй по-

ловине беременности. Это основной фермент при патологии гепатобили-

арного тракта. Второй изофермент повышается при гепатоцеллюлярной

патологии – вирусные гепатиты, желтая дистрофия печени, циррозы. Это

увеличение, однако, значительно уступает повышению активности ами-

нотрансфераз. У 1/3 желтушных больных с циррозом печени выявлено

увеличение активности ЩФ. Повышение активности ЩФ наблюдается у

20 % больных первичным раком печени и при метастазах в печень. Резко

возрастает ее активность при отравлениях алкоголем на фоне хроническо-

го алкоголизма. Она может повышаться при лекарственных назначениях,

проявляющих гепатотоксический эффект (тетрациклин, парацетамол, фен-

ацетин, 6-меркаптопурин, салицилаты и др.).

3. ЩФ желчи – фермент холестаза. (cholestasis; греч. chole (желчь),

stasis (стояние)) – недостаточность выделения желчи, обусловленная на-

рушением ее выработки печеночными клетками (внутрипеченочный холе-

стаз) или прекращением тока желчи по желчным протокам (внепеченоч-

ный холестаз). Фермент высвобождается из поврежденных желчных про-

токов. Самые высокие цифры сывороточной активности отмечаются при

обтурационных желтухах, когда задержка экскреции фермента с желчью

приводит к тому, что он вновь поступает в кровь. Немаловажен и индук-

тивный синтез изофермента в желчных канальцах. У женщин, принимаю-

щих противозачаточные препараты, содержащие эстроген и прогестерон,

может развиться холестатическая желтуха и повышается активность ЩФ.

По клинической чувствительности и специфичности в отношении обтура-

ции тест уступает таким маркерам холестаза, как ГГТ и 5’-нуклеотидаза.

4. Кишечная ЩФ. Синтезируется энтероцитами, поступает в просвет

тонкого кишечника и частично всасывается в кровь. Вклад ее в общую ак-

тивность ЩФ невелик. Ее активность может быть увеличена у лиц с I или

III группой крови, особенно после приема пищи, при заболеваниях кишеч-

ника, сопровождающихся диареей.

5. Почечная ЩФ. Частично всасывается в кровь, но в основном, экс-

кретируется с мочой. Тест используется в диагностике заболеваний почек

(гломерулонефрит, пиелонефрит, нефропатии).

6. Плацентарная ЩФ. Появляется в сыворотке крови при беремен-

ности. Самое большое ее содержание отмечается в третьем триместре. Это

наиболее термостабильный изофермент ЩФ. Очень высокие цифры актив-

ности ЩФ наблюдаются у женщин с преэк-лампсией, что является следст-

вием повреждения плаценты. Низкая активность ЩФ у беременных гово-

рит о недостаточности развития плаценты.

7. Неидентифицированные изоферменты ЩФ (так называемые изо-

ферменты Regan или Nagao) опухолевого происхождения (наиболее часто

определяются при раке легкого). Термостабильность, электрофоретическая

подвижность и иммунологические характеристики близки к таковым для

плацентарного изофермента.

Сывороточная активность ЩФ может снижаться из-за генетического

блока в синтезе какого-либо из ее изоферментов, а также при гипопарати-

реозе, гиповитаминозе С, накоплении радиоактивных веществ в костях.

Наличие большого количества изоферментов ЩФ делает малоинформа-

тивным определение ее общей активности. Следует разделять изоферменты и

затем оценивать вклад каждого в общую активность. Разделить изоферменты

ЩФ, пользуясь температурной инактивацией, не удается. Однако для диффе-

ренциальной диагностики обтурационных желтух и желтух при биллиарном

циррозе можно пользоваться избирательной тепловой денатурацией: опреде-

ляют активность ЩФ в нативной сыворотке крови и в прогретой при 56 °С в

течение 15 мин. Затем вычисляют коэффициент, в числителе которого актив-

ность ЩФ в нативном материале, а в знаменателе – активность в прогретой

сыворотке. У больных с биллиарным циррозом среднее значение этого коэф-

фициента составляет 1,8, а с обтурационной желтухой – 3,8. Хорошие резуль-

таты разделения изоферментов ЩФ получаются при электрофорезе на пленках

из ацетата целлюлозы, но лучшим методом разделения следует считать элек-

трофорез в ПААГ. Наиболее подвижными при электрофорезе (от катода к

аноду) являются печеночные и желчный изоферменты, затем следуют костная,

плацентарная, почечная и, наконец, кишечная фракции ЩФ.

Кислая фосфатаза

Фосфатаза кислая (КФ, КФ 3.1.3.2) – фермент с широкой субстрат-

ной специфичностью, катализирующий расщепление сложноэфирных свя-

зей с образованием свободного ортофосфата, по спектру активности близ-

кий к щелочной фосфатазе, от которой отличается иным действием на се-

росодержащие эфиры, оптимумом рН (4,7–6,0; у ЩФ – 8,4–9,4) и другими

свойствами; часто используется как популяционно-генетический маркер.

Под наименованием «кислая фосфатаза» подразумевают все фосфа-

тазы, проявляющие оптимальную активность при рН < 7,0. Это ферменты,

которые находятся в клетках различных тканей в лизосомах и вне их. Са-

мая высокая концентрация кислой фосфатазы отмечается в предстательной

железе (простатический изофермент). Фермент присутствует в клетках пе-

чени, селезенки, эритроцитах, тромбоцитах, костном мозге. Высокая ак-

тивность кислой фосфатазы отмечается также в макрофагах и остеокла-

стах. Активность кислой фосфатазы сыворотки крови, низкая в нормаль-

ных условиях, у мужчин примерно наполовину состоит из активности про-

статической фосфатазы, остальная активность связана с ферментом, про-

исходящим из печени и разрушенных тромбоцитов и эритроцитов. У жен-

щин кислая фосфатаза сыворотки происходит преимущественно из печени,

эритроцитов и тромбоцитов (табл. 4).

Таблица 4

Референтные значения активности кислой фосфатазы

в сыворотке крови

Возраст Активность кислой фосфатазы, МЕ/л

<14 лет <5,5

Женщины 14–40 лет <5,5

Мужчины >14 лет <6,5

Определение кислой фосфатазы в сыворотке обычно используют

для выявления или мониторинга карциномы простаты у мужчин. Актив-

ность этого фермента в сыворотке увеличена у 60 % пациентов с локали-

зацией карциномы в простате, особенно при наличии костных метаста-

зов – фермент продуцируется неопластическими клетками. Уровень ак-

тивности кислой фосфатазы в последнем случае может возрастать до 40–

50 раз от верхней границы референтных значений. Если карцинома оста-

ется локализованной в предстательной железе активность кислой фосфа-

тазы может быть лишь слабо увеличенной или находиться в пределах

референтных значений, таким образом, нормальный уровень сывороточ-

ной активности кислой фосфатазы не исключает рака простаты. Времен-

ное увеличение активности кислой фосфатазы в сыворотке крови могут

вызывать диагностические или лечебные манипуляции на предстатель-

ной железе (пальпация, биопсия и т.п.). Доброкачественная гипертрофия

простаты не сопровождается ростом активности фермента в сыворотке.

Активность кислой фосфатазы сыворотки может повышаться также

при гиперпаратиреоидизме, болезни Педжета, некоторых формах рака мо-

лочной железы и злокачественных метастазах в костную ткань этих опухо-

лей. В последнем случае источником фермента предположительно являют-

ся остеокласты. Увеличенные концентрации кислой фосфатазы наблюда-

ются у пациентов с болезнью Гоше, болезнью Нимана–Пика, миелоцитар-

ной лейкемией и при некоторых других гематологических заболеваниях.

Тартрат-резистентная кислая фосфатаза (TRACP 5B)

TRACP5B – фермент, секретируемый исключительно остеокластами

и попадающий в повышенном количестве в кровоток при увеличении ко-

личества и возрастании активности остеокластов. TRACP представлена

двумя субформами – 5а и 5в, из которых только субформа 5в продуцирует-

ся остеокластами. Определение уровня тартрат-резистентной кислой фос-

фатазы 5в может быть использовано в качестве маркера метастатического

поражения скелета, так как данный процесс сопровождается увеличением

интенсивности остеолиза и повышением в сыворотке крови активности

TRACP5B в результате ее выхода в циркуляторное русло. Тест обладает

высокой диагностической чувствительностью и специфичностью: у боль-

ных раком молочной железы эти показатели составили 82 и 87 %, у паци-

ентов с раком предстательной железы – 71 и 83,4 %, соответственно. Оп-

ределение этого маркера у онкологических больных способствует повы-

шению точности ранней диагностики метастазов в кости, оценки степени

метастатического поражения скелета. Исследование этого маркера особен-

но полезно при мониторинге лечения остеопороза, болезни Педжета, онко-

логических заболеваний с метастазами в кость различными препаратами,

подавляющими резорбцию костной ткани (бисфосфонатами, эстрогенами и

другими). Активность TRACP5B в сыворотке крови не зависит от функ-

ционального состояния печени и почек и отражает интенсивность костной

резорбции за последние 24 ч. БиоХимМак предлагает тест-систему, позво-

ляющую определять только активные формы TRACP молекул, секрети-

руемые во внеклеточное пространство кости, и не детектирующую старые,

инактивированные молекулы TRACP или их фрагменты, которые могли

появиться во время сбора образца.

Тартрат-ингибируемая фракция у мужчин — 0,2-3,5 МЕ/л, у жен-

щин – 0-0,8 МЕ/л.

Холинэстераза

В тканях человека обнаружены два различных фермента этого типа:

ацетилхолинэстераза («истинная» холинэстераза; КФ 3.1.1.7), которая

преимущественно находится в нервной ткани, скелетных мышцах и в низ-

кой концентрации в эритроцитах; и сывороточная или псевдохолинэстера-

за, которая широко распространена, присутствует в печени, поджелудоч-

ной железе, секретируется печенью в кровь. Сывороточная холинэстераза

является ферментом, катализирующим реакцию гидролиза ацетилхолина

(табл. 5).

Таблица 5

Референтные значения активности холинэстеразы в сыворотке крови

(средние: 5300–12900 МЕ/л (Назаренко Г.И. и др., 2002))

Возраст Активность холинэстеразы, МЕ/л

<14 лет 6400–15500

14–40 лет 4400–13500

Женщины

>40 лет 6400–15500

Мужчины >14 лет 6400–15500

Определение активности холинэстеразы в сыворотке представляет

наибольший клинический интерес для диагностики отравлений фосфо-

рорганическими отравляющими веществами и инсектицидами, и как по-

казатель состояния белково-синтезирующей функции печени и для об-

наружения атипичных вариантов фермента (дибукаин-резистентная