Петрищев Н.Н., Папаян Л.П. Гемостаз. Физиологические механизмы, принципы диагностики основных форм геморрагических заболеваний

Подождите немного. Документ загружается.

Средний относительный размах по Вашему

методу, %

Средний относительный размах всех лабора-

торий, %

3.04

2.90

2.08

2.10

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СИСТЕМА ВНЕШНЕЙ ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА

КЛИНИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

КОАГУЛОЛОГИЯ

Цикл 3-98

Лаборатория: 00057 С-Петербургский мед.университет им.Павлова,

центральная КДЛ

Определяемый показатель: ПРОТРОМБИНОВЫЙ ИНДЕКС

ОЦЕНКА правильности (гистограммы средних значений)

ОЦЕНКА ВОСПРОИЗВОДИМОСТИ (гистограммы относительного

размаха):

РЕЗУЛЬТАТЫ ВНЕШНЕЙ ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА

Код пула К09 L09

Ваше среднее значение, усл. ед. 1.05 1.96

Референтное значение (среднее по Вашему методу) 1.08 1.87

Ваше смещение, % -2.4 +4.8

Диапазон допустимых значений (Р3±1 .64s в

лог.шкале)

0.89-1.31 1 .39-2.54

Число лабораторий с Вашим методом -347 338

Коэффициент межлабораторной вариации, % 12.04 18.42

Среднее всех лабораторий, усл. ед. 1.06 1.86

Число всех лабораторий 517 503

Коэффициент межлабораторной вариации, % 12.41 17.46

Ваш относительный размах, % 3.39 0.00

Допустимый относительный размах, % 7.62 6.83

Средний относительный размах по Вашему методу,

3.10 2.77

Средний относительный размах всех лабораторий, % 3.35 2.73

Оценка правильности исследования проводится на основании срав-

нения среднего из двух измерений лаборатории с диапазоном допустимых

значений, который определяется как +/- 1,64 стандартных отклонения от

среднего значения в группе лабораторий с одинаковым методом анализа,

рассчитанного после отброса крайних значений. Количественное выражение

этого сравнения - смещение, %.

Оценка воспроизводимости производится на основании расчета от-

носительного размаха от нуля до значения, отделяющего 5% лабораторий

данной группы с наибольшими значениями размаха.

В приведенном примере имеют место удовлетворительные показатели

как правильности, так и воспроизводимости, что говорит об отсут-

ствии в лаборатории на момент оценки систематической ошибки, но не

застраховывает от ошибки случайной.

Постаналитический этап

Особенно ответственным и сложным в проведении исследований

свертывающей системы является постаналитический этап - этап интер-

претации полученных результатов. Оценка результатов отдельных ис-

следований должна проводиться клиницистом на основании конкретного

результата у пациента и обязательно в сравнении с референтными зна-

чениями для данной лаборатории - по нормальной референтной плазме или

пулу донорской плазмы, которые оцениваются каждый раз одновременно с

плазмой больного. Комплексная оценка коагулограммы в целом - задача,

решить которую можно только совместными усилиями специалиста по

клинической лабораторной диагностике и лечащего врача на основе

анамнеза, клинических данных и правильно выполненных исследований.

Таким образом, система контроля качества в лаборатории коагуло-

логических исследований должна рассматриваться как комплекс мер,

включающих в себя контроль за проведением доаналитического этапа,

состоянием оборудования и реагентов, применение правил внутрилабо-

раторного контроля качества к максимальному числу методов, профес-

сионально грамотную оценку результатов исследований. Используемый вид

контрольных карт зависит от метода, контрольного материала, способа

регистрации результатов (ручной, коагулометр).

Необходимо помнить, что определение источника ошибок для кон-

кретного исследования в условиях конкретной лаборатории - задача, которая

может быть решена только внутри лаборатории на основании тщательного

анализа всех звеньев лабораторного диагностического процесса.

СОДЕРЖАНИЕ

МЕХАНИЗМЫ ГЕМОСТАЗА....................................................................... 2

Тромбоцитарное звено гемостаза (А.С.Шитикова)................................. 2

Плазменно-коагуляционное звено гемостаза (Л.П.Папаян)..................10

Внутренний и внешний пути свертывания крови..............................10

Физиологические антикоагулянты и регуляция

свертывания крови (Л.П.Папаян, О.Г.Головина)................................15

Роль эндотелия в тромбогенности

и тромборезистентности сосудов (Н.Н.Петрищев)...............................20

Эндотелий, адгезия и агрегация тромбоцитов................................22

Прокоагулянтная и антикоагулянтная активность

эндотелия...................................................................................................24

Эндотелий и фибринолиз........................................................................25

Гемодинамические факторы и секреция

тромборегуляторов.................................................................................26

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА.....................29

Исследование плазменного звена гемостаза (Л.П.Папаян)...................29

Тесты, характеризующие «внутренний» путь

свертывания крови...................................................................................29

Тест, характеризующий «внешний» путь

свертывания крови...................................................................................31

Тесты, характеризующие общий (конечный) путь

свертывания крови...................................................................................33

Определение содержания фибриногена.................................................33

Исследование тромбоцитарного звена гемостаза..................................36

Определение числа тромбоцитов (А.С.Шитикова)...........................36

Методы определения длительности кровотечения

(А.С.Шитикова)..........................................................................................37

Исследование адгезивно-агрегационной активности тромбоцитов при

контакте с поверхностью кожной ранки (ретенционный тест in vivo)

(А.С.Шитикова).........................40

Исследование агрегационной активности тромбоцитов

(А.С.Шитикова)........41

Визуальный микрометод исследования агрегации тромбоцитов

(А.С.Шитикова)....49

Исследование функциональной активности тромбоцитов в цельной крови

(В.И Иванов).......................................53

Определение адгезии кровяных пластинок (В.И Иванов.)................58

Метод малоуглового светорассеяния для оценки состояния тромбоцитов

(И.В. Миндукшев)........................................60

Методы исследования ретрактильной активности тромбоцитов

(А.С.Шитикова)........................................63

Маркеры дисфункции эндотелия...........................................................69

Содержание фактора Виллебранда в плазме (О.Г.Головина).....69

Определение эндотелиоцитов в крови (М.С Зайнулина.).................72

АЛГОРИТМ ДИАГНОСТИКИ НАРУШЕНИЙ

ГЕМОСТАЗА........................................................................................................74

Алгоритм диагностики нарушений тромбоцитарного звена гемостаза

(А.С.Шитикова)..............................78

Алгоритм диагностики нарушений плазменно-коагуляционного звена

гемостаза (Л.П.Папаян)................................................................................84

ОБЕСПЕЧЕНИЕ КАЧЕСТВА ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА (В.Л.Эмануэль, Т.В.Вавилова)...93

Доаналитический этап............................................................................93

Аналитический этап исследования.......................................................96

Общие подходы к внутрилабораторному контролю

качества и терминология.......................................................................97

Проведение внутрилабораторного контроля качества...............103

Внешний контроль качества...............................................................110

Постаналитический этап....................................................................115

Реагенты для оценки гемостаза

• ФИРМА "ТЕХНОЛОГИЯ-СТАНДАРТ" (Барнаул, Россия)

специализируется на изготовлении и поставке реагентов и наборов для

оценки системы гемостаза. Постоянно в ассортименте более 30

наименований продукции собственного производства для работы на

коагулометрах и агреаометрах, а также для мануального выполнения

анализов.

Преимуществом наших наборов и реагентов является:

=> наиболее широкий в России спектр продукции для оценки

патологии гемостаза; о наиболее конкурентоспособные цены при высоком

качестве продукции; возможность использования любого набора на

протяжении длительного срока; => возможность сопровождения продукции

справочным руководством, ориентированным на наши наборы реагентов

(З.С.Баркаган, А.П. Мрмот. Основы диагностики нарушений гемостаза. -М.:

"Ньюдиамед-АО", 1999. - 224 с.).

НАБОРЫ ДЛЯ КОАГУЛОМЕТРА:

Метод исследования Набор реагентов Состав набора

АПТВ (АЧТВ) АПТВ-тест

кефалин, легкая фракция каолина, буфер,

хлорид кальция

Протромбиновый

тест

Техпластин-S стандартизированный по ISI (1.1)

растворимый тромбопластин, контрольная

нормальная плазма

Тромбиновый тест Тромбин-тест тромбин, стандарт-плазма, буфер

Содержание Фибриноген- тромбин, стандарт-плазма, буфер

фибриногена тест

Определение

антитромбина III

Антитромбин-

тест

тромбин, стандарт-плазма, сорбент

гепарина, буфер

Определение

волчаночного

антикоагулянта

Люпус-тест

тромбопластин, кефалин, тромбоцитин,

буфер, хлорид кальция

Скрининг

нарушений в

системе протеина

Парус-тест

активатор протеина С, кефалин, каолин,

стандарт-плазма, буфер, хлорид кальция

Данный перечень диагностических наборов адаптирован к применению

на оптических, оптико-механических и механических коагулометрах фирм

МЕЛТ, ЮНИМЕД, СОЛАР, Behnk Electrunik, Amelung, Organon Teknika,

Sarstedt u dp.

РЕАГЕНТЫ ДЛЯ АГРЕГОМЕТРА: АДФ, адреналин, коллаген,

ристомицин ДРУГИЕ НАБОРЫ И РЕАГЕНТЫ:__________________

Нормальная и патологическая контрольные плазмы, РФМК-тест

(определение РФМК в плазме по фенантролиновому тесту), КЛАМПИНГ-

тест (определения ранних ГЩФ и РФМК в сыворотке крови - тест

склеивания стафилококков), Фактор V-PC-тест (определение

резистентное™ фактора Va к активированному протеину С), ГЕПАРИН-

тест (определение чувствительности плазмы к гепарину), АГРЕСКРИН-тест

(скрининг нарушений тромбоцитарного гемостаза на стекле), ХРОМОТЕХ-

Плазминоген (определение плазминогена с хромогенным субстратом на

плазмин), ФИБРИНОЛИЗ-тест (исследование ХНа-калликреин-зависимого

и спонтанного фибринолиза эуглобулинов), Квик-Фг-тест (мануальное

определение протромбинового времени и концентрации фибриногена),

дефицитная по фактору VIII плазма, тромбин, тромбопластин, кефалин,

каолин (легкая фракция), гепасорб I и II (сорбенты для удаления гепарина

из плазмы крови), реагенты из змеиных ядов, стрептокиназа, трис-HCI

буфер, цитрат натрия, хлорид кальция, силикон.

Более подробную информацию можно получить, обратившись по

адресу:

656055, Россия, г. Барнаул, а/я 3603. Фирма "Технология-

Стандарт"

Тел. (385-2) 260-501, 260-653; факс (385-2) 266-868.

Общество больных гемофилией

НПО "РЕНАМ"

095) 214-9057 212-2912 основано в 1990 г.

Производит недорогие и удобные в использовании диагностические

реактивы. ГЕМОСТАЗ: Полностью готовые к работе наборы и реагенты:

* Тромбопластин, Тромбопластин с МИЧ=1.5 для определения

протромбинового времени, протромбина по Квику;

* АЧТВ (Активированное частичное тромбопластиновое время);

* Тромбин-тест;

* Активности факторов свертывания VIII и IX;

* Фибриноген-тест (по Клауссу);

* Антитромбин III (по Абильгаард и фотохромный метод);

* Протеин-С

* ХПа зависимый фибринолиз;

* РФМК-Тест (о-фенантролиновый метод);

* Плазминоген (фотохромный метод);

Унифицированный ВОЗ Гемиглобинцианидный Метод.

• Набор калибровочных растворов гемиглобинцианида (50, 100, 150 и

200 г/л)

• Сухой трансформирующий реагент на 2000 определений

• Сухой трансформирующий реагент (800 опр.) с калибратором

• Набор контрольных растворов гемоглобина (80, 120 и 160 г/л)

АГРЕГАЦИЯ ТРОМБОЦИТОВ

• Коллаген, АДФ, Ристоцетин;

Преимуществом диагностических наборов НПО "РЕПАМ" является

их полная комплектация готовыми к употреблению реагентами,

необходимыми для проведения анализов, что значительно упрощает

проведение работы. Все наборы реагентов зарегистрированы в

МЗ РФ, прошли успешную апробацию и постоянно применяются в

ведущих медицинских учреждениях страны.

125167 Москва Новый Зыковский пр. 4а тел./факс (095)214-90-57 ,

212-29-12, 212-51-03

ORGANON TEKNIKA (ГОЛЛАНДИЯ)

АКТУАЛЬНОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА

Исследование гемостаза на сегодняшний день получает все большее

распространение. Необходимость выявления нарушений в этой системе в

обычной клинической практике становится очевидной для врачей всех

профилей. К счастью, ситуация облегчается тем, что на смену трудоемким и

субъективным ручным методам в "водяной бане" приходят эффективные и

удобные в работе коагулометры.

КРОВОТЕЧЕНИЕ ТРОМБОЗ

ORGANON TEKNIKA

Фирма Органон Техника входит в фармацевтическое подразделение

концерна "AKZO NOBEL", Голландия, и представлена более чем в 100

странах национальными компаниями и специальными агентствами.

Органон Техника предлагает все необходимое для современной

лаборатории исследования гемостаза -автоматическое и полуавтоматическое

оборудование, широкий спектр реагентов и методик, необходимые

аксессуары, сервис и послепродажную поддержку. Высокое качество

продукции фирмы подтверждено сертификатами, в т. ч. ISO 90Q1.

КОАГУЛОГИЧЕСКИЕ АНАЛИЗАТОРЫ

Модельный ряд коагулометров фирмы способен удовлетворить любым

потребностям: от 10 анализов в неделю до сотен исследований в день.

Приборы отличаются высокой чувствительностью, надежностью и удобством

в работе. Результаты исследований выдаются в различных единицах и

удобной для интерпретации форме.

ФОТООПТИЧЕСКИЙ ПРИНЦИП

В коагулометрах фирмы Органон Техника используется

фотооптический измерения, основанный на анализе изменения пропускания

света образцом в процессе образования сгустка. Достоинства этого метода:

высокая чувствительность и точность, отсутствие кросс-контаминации

между последовательными образцами, автоматическое определение внесения

реагентов.

Coag-A-Mate ХМ

Коагулометр для лабораторий с невысоким объемом исследований.

Имеет две независимых панели для исследований, четыре позиции для

подготовки реагентов (две с магнитными мешалками) и четыре позиции для

подготовки образцов. Одновременно исследуются четыре независимых

пробы или две парные, причем в этом случае контролируется отклонение

результатов. В памяти прибора до 15 стандартных (концентрационных)

кривых. Для контроля работы прибора предусмотрен режим

самодиагностики.

Coag-A-Mate XM

Полностью автоматизированная открытая система, выполняющая

одновременно коагуляционные и хромогенные тесты, в произвольном

порядке. Приоритетное тестирование экстренных проб (STAT). Контроль

качества. Производительность - 100 Т/час.

ТЕСТЫ НА СВЕРТЫВАЕМОСТЬ КРОВИ

ПРОТРОМБИНОВОЕ ВРЕМЯ:

Simplastin Excel (300, 500 Т)-Величина ISI (International Sensitivity

Index) = 2.0. Стабильность - 7 дней.

Simplastin Excel S (300, 500 Т)- Более низкий IS! -1.2Стабильность - 7

дней.

АКТИВИРОВАННОЕ ПАРЦИАЛЬНОЕ

ТРОМБОПЛАСТИНОВОЕ ВРЕМЯ Automated APTT (300, 500 Т) -

Стабильность - 7 дней. Platelin® L Kit (150, 500 Т) - Жидкий, готовый к

работе

реагент. Стабильность - 30 дней. Platelin LS (300, 1000 Т)

Высокочувствителен к

гепарину и волчаночным антителам.

Стабильность -30 дней.

ТРОМБИНОВОЕВРЕМЯ

Thromboquik® (150 Т) - Стандартизированное определения

тромбинового времени (ТВ). 3-4 ед NIH/мл. Стабильность - 7 дней.

ФИБРИНОГЕН

Fibriquik® kit (50 Т) - количественный тест для определения

фибриногена классическим методом Клаусса. Стабильность - 7 дней.

Отдельные KOMnoneHTbiiFibriquik Thrombin Reagent (300 Т) - 100

ед. NIH/мл, Fibriquik Veronal Buffer-

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФАКТОРОВ СВЕРТЫВАНИЯ -Фактор

Дефицитная плазма ( ФДП) по II, V, VII, VIII, IX, X, XI, XII (100 Т)

• КОНТРОЛЬНЫЕ И КАЛИБРОВОЧНЫЕ ПЛАЗМЫ

• ХРОМОГЕННЫЕ (КОЛОРИМЕТРИЧЕСКИЕ) ТЕСТЫ

• ВОЛЧАНОЧНЫЕАНТИКОАГУЛЯНТЫ-У\регс\и\Ь LA

• ЛАТЕКСНЫЕ ТЕСТЫ:

Fibrinosticon® (60, 180 Т) - латексный агглютинационный иммуно-

ассоциированный тест для качественного и полуколичественного

определения продуктов деградации фибрина (D-димеров) в плазме крови

человека.

ИММУНОФЕРМЕНТНЫЕ ТЕСТЫ

Thrombonostika - Protein С, Protein S

Fibrinostika - FbDP, FgDP, общие продукты

деградации, все формы фибрина, растворимый

фибрин и фибриноген.

Представительство «Акзо Нобель»

«Органон Техника»

197061, Санкт-Петербург, 125445, Москва, ул. Дивенская, 3 ул.

Смольная, 24Д

тел. (812) 325-27-26 Коммерческая Башня

факс (812)325-28-58, «Меридиан»

325-28-59 тел. (0951 960-28-90

Киев

тел. {044)224-15-52 факс (044) 225-43-36

oiyawZteknika

DiaMed

Мы предлагаем Вам воплощение

новейших технологий: приборы LX-2,CD-1,CD-2,CD-4,CD-6

V Весь спектр диагностических тестов V Простота в работе

V Экономичность

V Швейцарское качество!

Представительство DiaMed AG (Швейцария) в России:

ДиаМед-Восток 191186 г. Санкт-Петербург, Невский проспект, 1

ХМДК, офис 625

тел/факс (812)-314-68-76

тел. (812)-314-68-81

КОАГУЛОМЕТРЫ

АГРЕГОМЕТРЫ

РЕАКТИВЫ

- одно-, двух-,

и многоканальные

- отечественные и импортные.

- для исследования системы гемостаза.

А ТАКЖЕ ШИРОКИЙ СПЕКТР

ОБОРУДОВАНИЯ, РЕАКТИВОВ

И РАСХОДНЫХ МАТЕРИАЛОВ

ДЛЯ МЕДИЦИНСКИХ ЛАБОРАТОРИЙ:

• высококачественные реагенты для биохимических исследований

• анализаторы биохимические, гематологические

для иммуноферментного анализа

• центрифуги, шейкеры, весы, термостаты

• лабораторная посуда

• реактивы, расходный материал

191123, Санкт-Петербург, а/я 26 Тел.: (812) 259-1791, 259-1238

Тел./факс: (812) 186-3550 E-mail: micar@atlant.ru