Журнал - Проблемы криобиологии 2009 №3

Подождите немного. Документ загружается.

371

PROBLEMS

OF CRYOBIOLOGY

Vol. 19, 2009, ¹3

ÏÐÎÁËÅÌÛ

ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ

Ò. 19, 2009, ¹3

Results and discussion

To the 3

day of experiments no differences in the

state and square of wounds in the rats of the control

and research groups were found (Table 1). To the 7

day in the control Sphynx rats in contrast to Wistar

ones the square of wounds increased, that testified to

the following development of inflammation reaction and

destructive processes in trauma zone. For further

observation terms the healing of wounds in Sphynx rat

group proceeded more slowly. Introduction of PSE and

DBBE to rats statistically and significantly accelerated

the healing of wounds comparing to the control, but

even under these conditions the healing of wounds in

Sphynx rats was slowed down. The most manifested

reduction of square of wounds was found in both

research groups during PSE introduction.

The concentration of TBARS in blood serum in-

creased under different pathological processes in an

organism and indirectly testifies to the manifestation

of inflammation LPO process. Its is also known that

under immune deficient states, stress load and other

negative factors the systems controlling the LPO

intensity level may exhaust [3].

To the 3

and 7

day the experimental level of

TBARS in blood serum of rats statistically and

significantly accelerated this index in the norm almost

in all the cases (Table 2), except the animals of Wistar

which were introduced with PSE. In the animals of

this group the TBARS level in blood serum normalized

even to the 7th day. Under all the experimental

conditions in Wistar rats no statistical and significant

differences in TBARS level if compared with the cont-

Статистичну обробку результатів проводили не-

параметричним методом МANOVA. Кількісні дані

представлені в середніх величинах і середніх квад-

ратичних похибках.

Результати та обговорення

На 3-ю добу експерименту відмінностей в стані

і площі ран у щурів контрольних і дослідних груп не

спостерігалося (табл. 1). На 7-му добу у контроль-

них щурів Сфінкс, на відміну від щурів лінії Вістар,

площа ран збільшилася, що свідчить про подальший

розвиток запальної реакції і деструктивних процесів

у зоні травми. У наступні терміни спостереження

загоєння ран у групі щурів Сфінкс було повільнішим.

Введення щурам ЕСС або ЕПБ статистично досто-

вірно, в порівнянні з контролем, прискорювало

загоєння ран, проте і за цих умов рани у щурів Сфінкс

загоювались повільніше. Найбільш виражене змен-

шення площі ран спостерігалося в обох дослідних

групах при введенні ЕСС.

Концентрація ТБКАП в сироватці крові підви-

щується при різних патологічних процесах в орга-

нізмі і побічно свідчить про вираженість запального

процесу, який супроводжується інтенсифікацією

процесу ПОЛ. Відомо також, що при імуноде-

фіцитних станах, стресовому навантаженні та інших

негативних факторах можуть виснажуватися

системи контролю за рівнем інтенсивності ПОЛ [3].

На 3-ю і 7-му добу експерименту рівень ТБКАП

в сироватці крові щурів статистично достовірно

перевищував цей показник у нормі майже у всіх

випадках (табл. 2), за винятком тварин лінії Вістар,

Таблиця 1. Площа холодових ран (см

) у щурів в залежності від умов експерименту

Table 1. Square of cold wounds, cm

, in rats depending on the experimental conditions

Примітки:

– відмінності статистично достовірні в порівнянні з контролем (рана), р < 0,05;

– відмінності статистично

достовірні в порівнянні з введенням ЕСС, р < 0,05;

– відмінності статистично достовірні в порівнянні з аналогічною групою

щурів лінії Вістар, р < 0,05.

Notes:

– differences are statistically significant if compared with the control (wound), p < 0.05;

– differences are statistically

significant if compared with PSE introduction, p < 0.05;

– differences are statistically significant if compared with the same group of

Wistar rats, p < 0.05.

кортС

,яннежеретсопс

абод

,mretnoitavresbO

syad

ируЩ

staR

ратсiВ

ratsiW

скнiфС

xnyhpS

ьлортноК

lortnoC

ССЕяннедевВ

fonoitcudortnI

ESP

БПЕяннедевВ

fonoitcudortnI

EBBD

ьлортноК

lortnoC

ССЕяннедевВ

fonoitcudortnI

ESP

БПЕяннедевВ

fonoitcudortnI

EBBD

34,0±7,33,0±0,34,0±4,35,0±9,45,0±4,46,0±0,5

73,0±3,32,0±1,2

3,0±9,27,0±6,6

3,0±2,2

3,0±6,3

2,1

413,0±1,21,0±3,0

1,0±3,1

2,1

4,0±1,4

1,0±1,1

3,1

2,0±9,2

3,2,1

121,0±0,1

огаЗ є янн

gnilaeH

1,0±5,0

2,1

1,0±0,2

1,0±5,0

3,1

1,0±1,1

3,2,1

372

PROBLEMS

OF CRYOBIOLOGY

Vol. 19, 2009, ¹3

ÏÐÎÁËÅÌÛ

ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ

Ò. 19, 2009, ¹3

Таблиця 2. Рівень ТБКАП (ммоль/л) в сироватці крові щурів з холодовою раною

Table 2. Level of TBARS, mmol/l in blood serum of rats with cold wound

Примітки:

– відмінності статистично достовірні в порівнянні з нормою, р < 0,05;

– відмінності статистично достовірні в

порівнянні з контролем (рана), р < 0,05;

– відмінності статистично достовірні в порівнянні з аналогічною групою щурів лінії

Вістар, р < 0,05; рівень ТБКАП в нормі у щурів лінії Вістар – 3,98 ± 0,25, щурів Сфінкс – 4,85 ± 0,31.

Notes:

– differences are statistically significant if compared with the norm, p< 0.05;

– differences are statistically significant if

compared with the control (wound), p < 0.05;

– differences are statistically significant if compared with the same group of Wistar

rats, p < 0.05; the TBA level in the norm in Wistar rats – 3.98 ± 0.25 and in Sphynx one is 4.85 ± 0.31.

яким вводили ЕСС. У тварин цієї групи рівень

ТБКАП в сироватці крові нормалізувався вже на

7-му добу. За всіх умов експерименту у щурів лінії

Вістар статистично достовірних відмінностей в

рівні ТБКАП в порівнянні з контролем не спостері-

галося. У щурів Сфінкс цей показник був нижчим

за контрольні значення на 7-му і 14-ту добу при

введенні як ЕСС, так і ЕПБ. Такі особливості

динаміки вмісту ТБКАП в сироватці крові пов’язані

з тим, що при холодовій травмі у щурів Сфінкс

процеси ПОЛ активізуються більше. Статистично

достовірне перевищення вмісту ТБКАП у щурів

Сфінкс в порівнянні з щурами лінії Вістар відмі-

чалось до 14-ї доби експерименту як в контролі,

так і при введенні ЕПБ. Більш виражена активація

процесів ПОЛ у щурів Сфінкс може бути пов’язана

з меншою резервною потужністю і виснаженням

антиоксидантних систем при холодовій травмі.

Функціонування різних ланок антиоксидантної

системи забезпечує підтримку постійного рівня

продуктів ПОЛ з їх збільшенням при патологічних

станах. Антиоксидантні резерви буферних систем

можуть виявитися недостатніми для збереження

окислювального гомеостазу.

На даний час загальноприйнятим методом

виявлення резервних можливостей ендогенної

антиоксидантної системи є реєстрація хемілю-

мінесценції, індукованої перекисом водню. Світло-

сума хемілюмінесценції, індукованої перекисом

водню, обернено пропорційна активності антиокси-

дантів, присутніх в системі. Світлосума хемілюмі-

несценції сироватки крові інтактних щурів лінії

Вістар склала 127 ± 13 ум. од., а щурів Сфінкс –

rol were found. In Sphynx rats this index was lower

than the control values to the 7

and 14

day both

during introduction of PSE and DBBE. These

peculiarities of the dynamics of TBARS content in

blood serum is related to the fact that at cold trauma

in Sphynx rats the LPO processes are more activated.

Statistically significant rise in the TBARS content in

Sphynx rats if compared with those for Wistar ones

was found up to 14

day of experiments both in the

control and under PSE introduction. The most mani-

fested activation of LPO processes in Sphynx rats may

be related to with less reserve power and exhaustion

of antioxidative systems at cold trauma.

Functioning of different links of antioxidative system

provides the support of constant level of LPO products

with their increase under pathological states. Anti-

oxidant stocks of buffer systems may be insufficient

for preserving the oxidative homeostasis.

Now the traditional method for revealing the spare

apacities of endogeneous anti-oxidative system is the

recording of hydrogen peroxide-induced chemilu-

minescence. Light sum of hydrogen peroxide-induced

chemiluminescence is inversely proportional to the

activity of anti-oxidants present in the system. The light

sum of chemiluminescence of blood serum of intact

Wistar rats made 127 ± 13 rel. units and 279 ± 24 rel.

units for Sphynx ones, that testifies to less spare power

of antioxidative systems in these animals.

The dynamics of wound healing in experimental

animals may be related to different state and specificity

of the response of immune system to trauma. The

content of neutrophil leucocytes in the control group

of Wistar rats makes 12.9% and 9.8% for Sphynx rats

кортС

,яннежеретсопс

абод

,mretnoitavresbO

syad

ируЩ

staR

ратсiВ

ratsiW

скнiфС

xnyhpS

ьлортноК

lortnoC

ССЕяннедевВ

fonoitcudortnI

ESP

БПЕяннедевВ

fonoitcudortnI

EBBD

ьлортноK

lortnoC

ССЕяннедевВ

fonoitcudortnI

ESP

БПЕяннедевВ

fonoitcudortnI

EBBD

315,0±91,6

73,0±14,5

44,0±38,5

46,0±84,8

3,1

65,0±04,7

3,1

95,0±39,7

3,1

724,0±54,5

23,0±02,494,0±84,5

67,0±29,9

3,1

94,0±90,6

2,1

55,0±65,7

3,2,1

4113,0±82,403,0±10,443,0±11,435,0±99,7

3,1

44,0±72,5

34,0±81,6

3,2

1262,0±20,432,0±27,383,0±52,414,0±12,504,0±99,484,0±60,5

373

PROBLEMS

OF CRYOBIOLOGY

Vol. 19, 2009, ¹3

ÏÐÎÁËÅÌÛ

ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ

Ò. 19, 2009, ¹3

(Table 3). Herewith no statistically significant differen-

ces in percentage of eosinophils and monocytes were

noted. In response to cold trauma the relative content

of neutrophils in Wistar rats increased up to 31.1%

and to 41.9% in Sphynx rats. The biggest shift leftward

was found for Sphynx rats, the number of banded

neutrophils increase in 4.8 times with the rise in

segmented neutrophils in 4.2. In Wistar rats the number

of banded neutrophils enhanced thrice and in 2.4 times

for segmented ones. During introduction of PSE on

the background of total leucocytosis the blood response

to trauma was less manifested. The introduction of

DBBE affects the manifestation rate of inflammation

reaction less effectively if compared with the PSE one.

Conclusions

Cold wounds in Sphynx rats are healed slower than

in Wistar ones. The introduction of the studied extracts

accelerates the healing of wounds, normalizes blood

indices and reduces the LPO rate for all the inves-

tigated animals. Biological activity of PSE is higher

versus DBBE one.

279 ± 24 ум. од., що свідчить про меншу резервну

потужність антиоксидантних систем у цих тварин.

Динаміка загоєння ран у дослідних тварин може

бути пов’язана з різним станом і специфічністю

реакції імунної системи на травму. Вміст нейтро-

фільних лейкоцитів у контрольній групі щурів лінії

Вістар складає 12,9%, а Сфінкс – 9,8% (табл. 3). При

цьому статистично достовірних відмінностей в

процентному вмісті еозинофілів та моноцитів не

відмічалося. У відповідь на холодову травму збіль-

шувався відносний вміст нейтрофілів у щурів лінії

Вістар до 31,1%, а Сфінкс – до 41,9%. Найбіль-

ший зсув вліво встановлено у щурів Сфінкс –

кількість паличкоядерних нейтрофілів збільшува-

лась в 4,8 рази при підвищенні сегментоядерних

нейтрофілів у 4,2 рази. У щурів лінії Вістар кількість

паличкоядерних нейтрофілів збільшувалась в 3

рази, а сегментоядерних – в 2,4. При введенні ЕСС

на фоні загального лейкоцитозу реакція крові на

травму була виражена менше. Введення ЕПБ

впливає на вираженість запальної реакції менш

ефективно, ніж ЕСС.

Таблиця 3. Лейкоцитарний профіль крові щурів з холодовими травмами на 14-ту добу експерименту

Table 3. Leucocyte profile of blood for the rats with cold trauma to the 14

experimental day

Примітки:

– відмінності статистично недостовірні в порівнянні з нормою, р > 0,05;

– відмінності статистично достовірні в

порівнянні з раною, р < 0,05;

– відмінності статистично достовірні в порівнянні з аналогічною групою щурів лінії Вістар, р < 0,05.

Notes:

– differences are statistically insignificant if compared with the norm, p > 0.05;

– differences are statistically significant if

compared with wound, p < 0.05; 3 – differences are statistically significant if compared with the same group of Wistar rats, p < 0.05.

утнемирепскеивомуатиниравТ

latnemirepxednaslaminA

snoitidnoc

инитiлK

slleC

илiфортйеН

slihportueN

илiфонизоЕ

slihponisoE

итицоноМ

setyconoM

итицофмiЛ

setycohpmyL

iнЮ

elinevuJ

окчилаП -

iнредя

dednaB

отнемгеС -

iнредя

detnemgeS

ратсiВ

ratsiW

амроН

mroN

-1,0±6,02,1±3,213,0±4,34,0±0,39,7±8,08

ьлортноК

lortnoC

-2,0±8,16,2±3,925,0±9,62,0±2,2

7,2±8,95

ССЕяннедевВ

fonoitcudortnI

ESP

-1,0±7,0

2,1

2,2±9,422,0±9,2

2,1

4,0±9,4

2,3±6,66

БПЕяннедевВ

fonoitcudortnI

EBBD

-1,0±8,13,2±3,724,0±4,62,0±6,2

4,3±9,16

скнiфС

xnyhpS

амроН

mroN

-1,0±5,06,0±4,97,0±9,25,0±8,20,5±8,48

ьлортноК

lortnoC

-1,0±4,2

0,3±5,934,0±4,71,0±1,1

1,4±6,94

ССЕяннедевВ

fonoitcudortnI

ESP

-1,0±1,1

3,2

2,2±3,92

3,0±2,3

2,1

2,0±0,4

9,4±4,26

БПЕяннедевВ

fonoitcudortnI

EBBD

-2,0±9,2

2,0±4,435,0±8,61,0±2,1

1,5±6,45

374

PROBLEMS

OF CRYOBIOLOGY

Vol. 19, 2009, ¹3

ÏÐÎÁËÅÌÛ

ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ

Ò. 19, 2009, ¹3

Висновки

Холодові рани у щурів Сфінкс загоюються повіль-

ніше, ніж у щурів лінії Вістар. Уведення дослід-

жених екстрактів прискорює загоєння ран, нормалі-

зує показники крові та зменшує рівень пероксидації

ліпідів у всіх дослідних тварин. Біологічна актив-

ність ЕСС більша, ніж ЕПБ.

Література

Арутюнян А.В., Дубинина Е.Е., Зыбина Н.Н. Методы

оценки свободнорадикального окисления и антиокси-

дантной системы организма: Метод. pекомендации.– СПб,

2000.– С. 46–50.

Бызов В.В., Высеканцев И.П., Гальченко С.Е., Сандомир-

ский Б.П. Влияние эндобронхиального введения экст-

ракта криоконсервированных фрагментов ксеноселезен-

ки на некоторые факторы местного иммунитета в комп-

лексной терапии больных с абсцессами легких // Пробл.

криобиологии.– 2001.– №4.– С. 65–70.

Вавин Г.В., Бунина О.Г. Модификация хемилюминес-

центного метода изучения процессов свободнора-

дикального окисления // Эксперимент. и клин. фарма-

кология.– 2002.– №2.– С. 63–66.

Донцов В.И. Регуляция лимфоцитами клеточного роста

соматических тканей и новая иммунная теория ста-

рения. Обзор // Профилактика старения.– 1998.– Вып. 1.–

С. 40–63.

Ермакова Н.Ю., Кадникова Н.Г., Рошаль А.Д. и др. Биоло-

гическая активность экстрактов пчел в зависимости

от способа получения // Пробл. криобиологии.– 2006.–

Т. 16, №2.– С. 192–200.

Методи клінічних та експериментальних досліджень в

медицині / Під ред. І.П. Кайдашева.– Полтава: Полімет,

2003.– 319 с.

Мовчан К.Н, Хижа В.Д., Прохода И.А. и др. Пути повышения

эффективности антиоксидантной терапии у пострадавших

с обширными глубокими ожогами // Мед. акад. журнал.–

2007.–Т.7, №3.– С. 241–242.

Приходько С.Г., Мартынюк В.В. Криохирургия злокачест-

венных опухолей полости рта и кожи // Стоматология.–

2001.– Т. 2.– С. 50–52.

Пат. 64381 А Україна, МПК

А61К35/12. Спосіб отримання

екстрактів ксеногенних органів / С.Є. Гальченко, Н.Ю. Шко-

довська, Б.П. Сандомирський, В.І. Грищенко. Заявлено

22.05.2003; Опубл. 16.02.2004.– Бюл. №2.

Kuflik E.G. Cryosurgery for skin cancer: 30-year experience

and cure rates // Dermatol. Surg.– 2004.– Vol. 30, N2.–

P. 297–300.

Надійшла 19.05.2009

Рецензент О.К. Гулевський

10.

References

Arutunyan A.V., Dubinina E.E., Zybina N.N. Methods of

estimation of free radical oxidation and antioxidative system

of organism: Methodical recommendations. – Saint Petersburg;

2000.– P. 46–50.

Byzov V.V., Vysekantsev I.P., Galchenko S.Ye., Sandomir-

sky B.P. Effect of endobronchial introduction of extract of

cryopreserved xenospleen fragments on some local immunity

factors in complex therapy of patients with lungs abscesses//

Problems of Cryobiology.– 2001.– N4.– P. 65–70.

Vavin G.V., Bunina O.G. Modification of chemiluminescent

method of study of processes of free radical oxidation//

Experiment i Kilin Farmakologiya.– 2002.– N2.– P. 63–66.

Dontsov V.I. regulation with lymphocytes of cell growth of

somatic tissues and new immune theory of aging. Review //

Profilaktika Stareniya.– 1998.– Issue 1.– P. 40–63.

Ermakova N.Yu., Kadnikova N.G., Roshal A.D. et al. Biolo-

gical activity of apian extracts depending on the way of

obtaining// Problems of Cryobiology.– 2006.– Vol. 16, N2.–

P. 192–200.

Methods of clinical and experimental studies in medicine /

Ed. by I.P. Kaydashev.– Poltava: Polimet, 2003.– 319 p.

Movchan K.N., Khizha V.D., Prokhoda I.A. et al. Ways of inc-

reasing the efficiency of antioxidative therapy in suffered

with vast deep burns// Med. Akad. Zhurnal.– 2007.– Vol. 7,

N3.– P. 241–242.

Prikhodko S.G., Martynyuk V.V. Cryosurgery of malignant

oral and skin tumours // Stomatologiya.– 2001.– Vol. 2.–

P. 50–52.

Patent 64381 A Ukraine, IPC

A61K35/12. Method of obtaining

the extracts of xenogenous organs/ S.Ye. Galschenko, N.Yu. Shko-

dovskaya, B.P. Sandomirsky, V.I. Grischenko. Applied

22.05.2003; Published. 16.02.2004.– Bul. N2.

Kuflik E.G. Cryosurgery for skin cancer: 30-year experience

and cure rates // Dermatol. Surg.– 2004.– Vol. 30, N2.–

P. 297–300

Accepted in 19.05.2009

10.

375

PROBLEMS

OF CRYOBIOLOGY

Vol. 19, 2009, ¹3

ÏÐÎÁËÅÌÛ

ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ

Ò. 19, 2009, ¹3

УДК 591.463.1:57.043.083

Ф.И. ОСТАШКО

, В.Ф. ОСТАШКО

Пути совершенствования сред для культивирования

и консервации половых клеток

UDC 591.463.1:57.043.083

F.I. OSTASHKO

, V.F. OSTASHKO

Ways To Improve Media for Culturing and Preservation of Sexual Cells

Важнейшая составляющая исследований в области

биотехнологии репродукции млекопитающих – совер-

шенствование технологий оплодотворения яйцеклеток

in vitro и культивирования в лабораторных условиях по-

лученных эмбрионов. Следует отметить, что процент

получения полноценных эмбрионов очень низкий, осо-

бенно при использовании ооцит-кумулюсных комплек-

сов, выделенных из анатомического материала. При этом

установлено, что для более поздних стадий развития эмб-

рионов процент биологически полноценных клеток

меньше. Однако при оплодотворении и созревании эмб-

рионов до этих стадий in vivo процент полноценных

эмбрионов, как правило, достаточно высокий.

Можно сделать вывод, что при искусственном культи-

вировании эмбрионы недостаточно обеспечены пласти-

ческими материалами, необходимыми для развития орга-

ноидов клеток. Это подтверждается тем, что при добавле-

нии в культуральную среду клеток гранулёзы и эпителия

яйцевода или эстральной сыворотки результаты улуч-

шаются. В связи с этим целесообразно исследовать проб-

лему с точки зрения особенностей развития эмбрионов

на указанных стадиях.

Масса эмбриона в процессе дробления от зиготы до

стадий морулы и ранней бластоцисты существенно не

увеличивается. Так, геометрический размер эмбриона

коровы при его развитии от зиготы до ранней бластоцис-

ты (7–8-й день), когда количество клеток увеличивается

от 2 до 130, изменяется от 0,14 до 0,17 мм. Размер экспан-

дированной бластоцисты (приблизительно 130–200 кле-

ток) колеблется в пределах 0,17–0,22 мм, а вылупившейся

бластоцисты (200–800 клеток) – 0,2–0,8 мм. Можно оши-

бочно предположить, что дефицит пластических веществ

не является причиной плохого качества эмбрионов.

Однако несмотря на незначительный рост массы в процес-

се развития зиготы или морулы, суммарная площадь

поверхности образующихся при дроблении клеток

(бластомеров) растет в арифметической, а затем и в гео-

метрической прогрессии. Следует отметить, что вся по-

верхность возникших в процессе дробления бластомеров

представляет собой вновь образованную цитоплазмати-

ческую мембрану. Кроме того, в протоплазме клеток

образуются различные органеллы, которые являются

мембранными структурами.

Большинство мембран состоит примерно из 40% ли-

пидов и 60% белков. По нашим данным [1] на построение

липоидной компоненты этого мембранного аппарата

The most important component of research in biotechno-

logy of mammal reproduction is the improvement of in vitro

oocytes fertilization and embryo culturing in laboratory. It

should be noted that the percentage of the derived valuable

embryos is very low, especially when using the oocyte-cu-

mulus complexes, derived from anatomic material. It has

been established also that for the late stages of developed

embryos the percentage of biologically valuable cells is

lower. However during in vivo fertilization and maturation

of embryos the percentage of valuable embryos is usually

considerably high.

One may conclude that during artificial culturing the

embryos are not essentially provided with plastic materials

necessary for development of cell organelles. This is confir-

med by the fact that the outcome is improved after adding

into cultured medium the granulosis and ovarian tube epithe-

lium cells or estral serum. Herewith it is reasonably to study

the problem in terms of the features of embryo growth at

these stages.

Embryo mass is not significantly increased during

cleavage from zygote to morula stage and early blastocyst.

Geometric dimensions of bovine embryo during its develop-

ment from zygote to early blastocyst (7–8

day) when

number of cells increases from 2 to 130 change from 0.14 to

0.17 mm. The size of expanded blastocyst (approximately

130–200 cells) ranges from 0.17 to 0.22 mm, and the hatched

blastocyst (200–800 cells) is 0.2–0.8 mm. However it would be

a mistake one to suppose that deficit of plastic properties is

not the cause of poor quality of embryos. This could be

explained that when their mass insignificantly increases during

zygote or morula grows the total area of surface of formed cells

(blastomeres) during fission growth in arithmetic pro-gression

and then in geometric one. It should be noted that the whole

surface of blastomeres post cleavage is the de novo formed

cytoplasma membrane. Moreover in cell protoplasm the

various organelles being membrane structures are formed.

The major part of membranes consists of 40% lipids and

60% proteins. Our data [1] show that formation of membrane

lipoid component requires mainly cholesterol (about 26%),

choline plasmalogen (18%), phosphatidylcholine (12%),

neutral lipids (15%), ethanolamine plasmalogen (about 10%)

and other phosphoglycerides, sphingolipids, glycolipids,

lipoproteins and unsaturated fatty acids, the stock of which

in yolk layer of mammal zygote is very limited.

The culturing of embryos in artificial media deficient on

phospholipids, lipoproteins and unsaturated fatty acids re-

* Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию:

ул. Пушкинская, 53, г. Харьков, Украина 61002; тел.:(+38

057) 710-10-21, электронная почта:vasiliy_ostashko@mail.ru

* To whom correspondence should be addressed: 53, Pushkinskaya

str., Kharkov, Ukraine 61002; tel.: +380 57 710 1021, e-mail:

vasiliy_ostashko@mail.ru

Institute

of Animal Breeding of Ukrainian Academy of Agricultural

Sciences, Kharkov, Ukraine

National University of Pharmacy, Kharkov, Ukraine

Институт животноводства УААН, г. Харьков

Национальный фармацевтический университет, г. Харьков

ÊÐÀÒÊÈÅ ÑÎÎÁÙÅÍÈß SHORT COMMUNICATIONS

376

PROBLEMS

OF CRYOBIOLOGY

Vol. 19, 2009, ¹3

ÏÐÎÁËÅÌÛ

ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ

Ò. 19, 2009, ¹3

затрачиваются главным образом холестерин (около 26%),

холинплазмалоген (18%), фосфотидилхолин (12%),

нейтральные липиды (15%), этаноламинплазмалоген

(около 10%), а также другие фосфоглицериды, сфинголи-

пиды, гликолипиды, липопротеины и ненасыщенные

жирные кислоты, запас которых в желточном слое зиго-

ты млекопитающих ограничен.

Культивирование эмбрионов в бедных фосфолипида-

ми, липопротеинами и ненасыщенными жирными

кислотами искусственных средах приводит к развитию

неполноценного мембранного аппарата. Таким обра-

зом, важно исследовать искусственные среды, обогащен-

ные специфическими пластическими материалами, для

построения мембранных структур клеток эмбрионов.

Предполагаем, что для этого наиболее подходят жел-

ток птичьих яиц, а также фрагменты живого трофобласта

более поздних стадий развития эмбриона. Фрагменты

трофобласта 18-дневных эмбрионов коровы и получен-

ные из них трофобластические фолликулы мы добавляли

в культуральную среду. При этом приживляемость

эмбрионов значительно повышалась.

Однако при обогащении искусственных культураль-

ных сред компонентами животного происхождения

(желток птичьих яиц, различные кровяные сыворотки,

фрагменты трофобласта, клетки гранулезы и пр.) могут

возникнуть нежелательные последствия, обусловленные

с наличием в них инфекционных агентов, а также воз-

можной неспецифической иммунной реакцией. Терми-

ческая стерилизация этого биологического материала

приводит к коагуляции белков, а добавление в них раз-

личных антибиотиков не всегда эффективно из-за рас-

пространения в природе резистентных к антибиотикам

штаммов микроорганизмов. В связи с чем целесообраз-

но провести поиск более эффективных способов стери-

лизации продуктов животного и растительного проис-

хождения, используемых при культивировании эмбрио-

нов. При стерилизации сред интересно исследовать воз-

можность использования олигодинамического действия

ионов некоторых металлов. Например, для исключения

антибиотиков и стерилизации разбавителей для спермы

быков мы успешно использовали олигодинамическое

свойство ионов серебра. При этом отмечено полное

сохранение оплодотворяющей способности спермиев.

Кроме того, нам представляется интересным исследо-

вать не только желток птичьих яиц как источник вита-

мино-микроэлементно-липоидных компонентов, но и

сок плодов облепихи крушиновидной (Hippophae rham-

noides), который содержит витамины,каротиноиды,

органические кислоты, липоиды, сахара, микроэлемен-

ты. При добавлении в разбавитель для спермы быка

вместо желтка куриного яйца нейтрализованного обле-

пихового сока отмечено положительное влияние на

активность и выживаемость спермиев, что свидетель-

ствует о перспективности исследований в этом направ-

лении.

Не менее интересным растительным источником

пластических материалов для развития мембранного

аппарата клеток являются гидролизаты плодов бобовых

(сои, чечевицы, гороха, арахиса), в которых содержится

до 37% жировых соединений, богатых липопротеинами,

фосфолипидами и ненасыщенными жирными кислота-

ми. Применение экстрактов соевых бобов в качестве

заменителя куриного желтка в искусственных средах для

культивирования и криоконсервации спермы быков-

sults in development of inadequate membrane apparatus. Thus,

it is important to study artificial media, enriched with specific

plastic materials for the forming of membrane structures of

embryo cells.

We suppose that the yolk of avian eggs and fragments

of living trophoblast of late development stage embryos

are the most suitable for this. We added into the culturing

medium the fragments of trophoblast and its follicles of 18

day bovine embryos. In this case the grafting of embryos

significantly increased.

However during the enrichment of artificial culturing

media with components of animal origin (yolk of avian eggs,

various blood serums, fragments of trophoblasts, cells of

granulosis etc.) may arise undesirable outcomes caused by

the presence of infection agents, as well as non-specific im-

munologic reactions. Thermal sterilization of this biological

material results in protein coagulation, and adding of various

antibiotics is not always effective due to natural occurrence

of antibiotic resistant microorganism strains. Due to above

mentioned we believe that it is reasonable to search the more

effective methods of sterilization of animal and plant origin

products used for embryo culturing. When studying the

medium sterilization it is interesting to investigate the

oligodynamic effect of some metal ions. For example, to

exclude the antibiotics and sterilization of diluters for bovine

sperm we successfully utilized oligodynamic properties of

argentum ions. In this case we noted the complete preser-

vation of sperm fertilizing ability.

It was also of interest to study not only yolk of avian

eggs as the source of vitamin-microelement-lipoid compo-

nents, but also the sap of common sea buckthorn (Hippo-

phae rhamnoides), containing vitamins,carotenoids, organic

acids, lipoids, sugars and microelements. During adding into

a diluter of bovine sperm the neutralized sea-buckthorn sap

instead of chicken egg yolk the positive effect on sperm

activity and survival has been noted, that testifies to the

exploitability of such research.

Not least interesting plant source of plastic materials

for development of cell membrane apparatus are hydroly-

zates of legumes (soya, lentil, pea, ground-pea), containing

up to 37% fat compounds, abundant in lipoproteins,

phospholipids and unsaturated fatty acids. Application of

soya bean extracts as chicken yolk substitute in artificial

media for culturing and cryopreservation of bovine sperm

enabled to solve the problems of strengthening the membra-

ne apparatus of cells to protect from temperature shock

without application of products of animal origin, and

enabling safe thermal sterilization and long-term storage of

artificial media, being used in current biotechnology [2].

References

Ostashko F.I. Biotechnology of cattle reproduction.– Kiev:

Agrarnaya Nauka, 1995.– 183 p.

Pavlenko L.N., Pavlenko B.M., Pavlenko M.P. Study of anti-

shock effect and sanitary properties of cytoplasma membrane

plant modificators during bovine sperm preservation // Sci-

Tech. Bull. Institute of Breeding of Ukrainian Academy of

Agrarian Sciences.– 2008.– N96.– P. 315–323.

Accepted in 20.09.08

377

PROBLEMS

OF CRYOBIOLOGY

Vol. 19, 2009, ¹3

ÏÐÎÁËÅÌÛ

ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ

Ò. 19, 2009, ¹3

производителей позволило решить проблемы фортифи-

кации мембранного аппарата клеток для их защиты от

температурного шока без применения продуктов живот-

ного происхождения, надежной термической стерилиза-

ции и длительного хранения искусственных сред, приме-

няемых в современной биотехнологии [2].

Литература

Осташко Ф.И. Биотехнология воспроизведения крупного

рогатого скота.– Киев: Аграрная наука, 1995.– 183 c.

Павленко Л. Н., Павленко Б.М., Павленко М.П. Изучение

антишокового действия и санитарных свойств расти-

тельных модификаторов цитоплазматических мембран

при консервации спермы быков // Научно-техн. бюл.

Институт животноводства УААН.– 2008.– №96.– C. 315–

323.

Поступила 20.09.08

Рецензент М.П. Петрушко

Національна академія наук України (НАНУ), Українське біохімічне товариство (УБТ), Інститут біохімії

ім. О. В. Палладіна НАНУ та Одеський національний університет ім. І. І. Мечникова повідомляють, що

13–17 вересня 2010 р. у м. Одеса на базі Одеського національного університету ім. І. І. Мечникова

за підтримки Міністерства освіти і науки України, Міністерства охорони здоров’я України, Академії

медичних наук України та Федерації європейських біохімічних товариств (FEBS) відбудеться черговий

Х Український біохімічний з’їзд. Цей ювілейний з’їзд присвячено пам’яті видатного вітчизняного

вченого і громадського діяча, фундатора української біохімічної школи і родоначальника сучасної

нейрохімії як науки, засновника УБТ та “Українського біохімічного журналу” академіка Олександра

Володимировича Палладіна, 125-річчя від дня народження якого наукова громадськість України

відзначатиме 9 вересня 2010 р.

Українcький біохімічний з’їзд – це визначна подія не тільки для біохіміків та молекулярних біологів,

але й для фахівців суміжних спеціальностей, для тих, хто використовує біохімічні методи та моделі у

своїй науковій роботі і хто цікавиться найновішими досягненнями світової біохімічної науки, що наразі

переживає небувалий прогрес, який можна порівняти хіба що з розвитком інформаційних технологій.

Окрім того, це підведення підсумків і відзначення досягнень вітчизняних науковців у цій галузі за останні

чотири роки, а також визначення перспектив її розвитку в Україні.

Тематика з’їзду включатиме фундаментальні питання сучасної біохімії та молекулярної біології,

біотехнології, імунохімії, медичної біохімії, біохімії сільськогосподарських тварин та рослин, екологічних

аспектів біохімії, викладання сучасної біохімії, історії розвитку біохімії тощо.

Основні секції роботи з’їзду:

1 – Структура, властивості та функції біологічних макромолекул і надмолекулярних комплексів;

2 – Регуляція метаболічних процесів та клітинних функцій;

3 – Медична біохімія;

4 – Біотехнологія. Біобезпека і біозахист;

5 – Викладання біохімії, молекулярної біології та біотехнології. Шляхи вдосконалення фахової підготовки

молодих учених.

З 1-го лютого 2010 року детальнішу інформацію про з’їзд можна буде знайти на новому веб-сайті

з’їзду, який буде також розміщено і на веб-сторінці Інституту біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України:

http://www.biochemistry.org.ua.

Важливі дати:

– 30 квітня 2010 р.– останній строк реєстрації для участі у з’їзді та подання рефератів усних і стендових

доповідей для публікації у матеріалах з’їзду;

– 30 червня – останній строк сплати організаційних внесків;

– 13 вересня – день заїзду учасників і відкриття Х Українського біохімічного з’їзду, яке включатиме

урочисту церемонію, пленарні лекції, концерт та прийом;

– 17 вересня – останній день роботи з’їзду і роз’їзд учасників.

Запрошуємо широкі кола біохімічної спільноти України, усіх, хто цікавиться “хімією життя”, до участі

у роботі ювілейного Х Українського біохімічного з’їзду!

378

PROBLEMS

OF CRYOBIOLOGY

Vol. 19, 2009, ¹3

ÏÐÎÁËÅÌÛ

ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ

Ò. 19, 2009, ¹3

Х Український біохімічний з’їзд

Журнал “Проблемы криобиологии” публикует

оригинальные статьи, связанные с проблемами

низкотемпературной биологии и медицины, а также

смежных областей науки.

В редакцию подаются рукописи на украинском,

русском или английском языке в двух экземплярах

с экспертным заключением (для авторов из

Украины), а также электронный вариант статьи на

дискете, компакт-диске или по электронной почте

на адрес cryo@online.kharkov.ua. Рукописи долж-

ны отвечать следующим требованиям.

Текст печатается на белых листах формата А4

через полтора интервала с высоким качеством

печати. Используются редактор MS Word, шрифт

Times New Roman (Cyr), размер шрифта 14 pt.,

выравнивание текста по ширине. Объем статьи –

до 12, обзорной – до 15, краткого сообщения – до

5 с.

В тексте обязательна расшифровка аббре-

виатур-терминов; ссылки на номера источников по

списку даются в квадратных скобках. Матема-

тические и химические символы, уравнения и

формулы вводятся в текст статьи при помощи

компьютерной техники. Таблицы печатаются на

отдельных страницах в конце статьи. Примечания

к таблице даются непосредственно под ней.

Иллюстрации распечатываются на отдельных

листах и размещаются за текстом статьи, кроме

того, их электронные копии прилагаются вместе

со статьей в виде отдельных файлов. Иллюстрации

выполняются в черно-белом варианте, фотографии,

схемы представляются в виде графических

файлов в форматах bmp, jpeg (jpg) или tiff без

компрессии, размеры изображения – не меньше 8

см по ширине, разрешение – не менее 300 точек

на дюйм (dpi). Диаграммы и графики следует

выполнять с помощью приложения MS Exсel, в

случае использования других приложений графики

и диаграммы следует представлять в виде графи-

ческого файла. Формулы, таблицы и рисунки нуме-

руются последовательно арабскими цифрами,

соответственно: (1); Таблица 1; Рис. 1.

В начале статьи, в левом углу указывается ин-

декс УДК, ниже даются название статьи, инициалы

и фамилии авторов с указанием учреждений, в

которых они работают.

Рекомендуется деление статьи на следующие

разделы: введение, материалы и методы, резуль-

таты и обсуждение, заключение или выводы.

Список литературы размещается после основ-

ного текста статьи. Использованные в работе

литературные источники указываются в алфавит-

ном порядке (вначале кириллица, затем латиница).

Номер ссылки указывается в квадратных скобках

сразу же после цитирования. Не допускаются

ссылки на неопубликованные работы. Не рекомен-

дуется использовать в качестве источников

WWW-документы, кроме случаев, когда указы-

ваются ссылки на официальные документы. В

списке необходимо привести следующие сведения:

фамилия и инициалы автора в оригинальной

транскрипции, название статьи, журнала или книги;

для периодических изданий – год издания, том,

номер, номера страниц; для монографий – место

издания, название издательства, год издания,

общее количество страниц. В случае, если у

источника на русском (украинском) языке имеется

перевод на английский язык (указанный в рефе-

рате/аннотации статьи, книги и т.п.), рекомен-

дуется привести его в скобках после основного

названия.

На отдельном листе к статье подаются рефе-

раты на русском, украинском и английском языках.

В конце рефератов приводятся 5–7 ключевых слов.

Отдельно к статье прилагается лист с информа-

цией об авторе, с которым будет осуществляться

переписка: фамилия, имя и отчество, учреждение,

должность и звание, почтовый адрес, телефон,

адрес электронной почты.

В случае несоответствия статьи этим требова-

ниям она будет возвращена для доработки.

В соответствии с постановлением Прези-

диума Высшей аттестационной комиссии

Украины № 7-05/1 от 15.01.2003 г. научные

статьи соискателей научных степеней должны

иметь следующие необходимые элементы:

постановка проблемы в общем виде и ее связь

с важными научными или практическими

задачами; анализ последних исследований и

публикаций, в которых положено начало

решения данной проблемы и на которые

ссылается автор, выделение нерешенных ранее

аспектов общей проблемы, которым посвя-

щается данная статья; формулирование цели

статьи (постановка задачи); изложение

основного материала исследования с полным

обоснованием полученных научных резуль-

татов; выводы по результатам данного

исследования и перспективы работ в этом

направлении.

ПРАВИЛА ДЛЯ АВТОРОВ

379

PROBLEMS

OF CRYOBIOLOGY

Vol. 19, 2009, №3

ПРОБЛЕМЫ

КРИОБИОЛОГИИ

Т. 19, 2009, №3

Підписано до друку 30.11.2009. Формат 60х84 1/8. Папір тип. №1. Друк офсетний. Ум. друк. арк. 18,5. Наклад 200 прим.

Зам. № Ціна договірна.

Надруковано Видавничим домом “Райдер”, просп. Гагаріна, 20, м. Харків, Україна 61000

Наукові редактори: Т.М. Юрченко, Л.Ф. Розанов

Редактори: Є.Д. Пазич, Л.В. Рудоман

Верстка: К.В. Данько

Scientific Editors: T.N. Yurchenko, L.F. Rozanov

Editors: E.D. Pazych, L.V. Rudoman

DTP-Work by E.V. Danko

ÏÐÎÁËÅÌÈ ÊÐ³ÎÁ³ÎËÎÃ³¿

(російською мовою)

Науково-теоретичний журнал

Установа-видавець: Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України

вул. Переяславська, 23, м. Харків, Україна 61015

Передплата – 2010

Передплату на наш журнал можна оформити через передплатне агентство “УКРІНФОРМ-

НАУКА”. Для оформлення передплати необхідно заповнити бланк-замовлення і відправити його

поштою на адресу: вул. Володимирська, 54, кімн. 141, м. Київ-30, 01601, або електронною поштою:

innovation@nas.gov.ua.

Під час заповнення бланку-замовлення просимо уважно заповнювати всі його пункти

друкованими літерами.

Бланк-замовлення на передплату

0102-АТАЛПДЕРЕП

:кинталП

овтцодівС

акинталп

:віктадоп

авотшоП

асерда

:икватсод

__________________________________________скеднійивотшоП

____________________________________________отсім,ьтсалбО

___.вк,______.дуб,_____________________________________.луВ

________________________________________)атсіммодокз(.леТ

____________________________________________________:liam-E

:чавумиртО

ланруЖвікинрімирпьтсiкьліK

)илатравк(0102

12 34

ииголоибоиркымелборП