Диссертация на соискание ученой степени кандидата
медицинских наук. Специальность: 14.03.06 – фармакология,
клиническая фармакология. РНИМУ им НИ Пирогова. Москва. 2015. — 119
с. Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Карева
Е.Н.
Цель работы: изучение фармакодинамических свойств
новых синтетических лигандов рецепторов прогестерона в
клетках-мишенях стероидных гормонов.
Научная новизна. Впервые было изучено влияние прегна-D’-пентаранов на мононуклеарную фракцию клеток периферической крови у пациенток с гинекологической патологией, определена экспрессия генов подтипов рецепторов прогестерона и эстрадиола в мононуклеарах периферической крови у женщин постменопаузального возраста без гинекологической патологии и выявлены изменения рецепторного профиля МНФК при развитии гиперпластических процессов эндометрия.
Практическая значимость. На основании полученных данных было показано, что для доклинических испытаний наиболее перспективными соединениями класса прегна-D'- пентаранов являются 6(E)-гидрокси-имино-16α,17α-циклогексано-прегн-4-ен- 3,20-дион) и 16α,17α-циклогексано-4-оксапрегн-5-ен-3,20-дион, которые обладают высокой специфической связывающей активностью с прогестерон- связывающими участками клеток мононуклеарной фракции периферической крови, снижают выработку мононуклеарами крови ФНО-альфа, угнетают жизнеспособность опухолевых клеток (HeLa и MOLT-4) и не оказывают токсического действия на неизмененные клетки периферической крови. Оглавление.
Список сокращений.
Введение. Обзор литературы.
Лиганды рецепторов прогестерона.
Лиганды рецепторов прогестерона и иммунная система.
Гиперпластические процессы эндометрия.
Рецепторы половых стероидов в ткани эндометрия.
Лечение гиперпластических процессов эндометрия. Материалы и методы исследования.
Материалы для исследования.
Используемые реактивы.
Используемое оборудование.
Объекты исследования.
Дизайн исследования.
Методы исследования.
Выделение мононуклеарной фракции клеток из периферической крови.
Определение специфического связывания 3Н- прогестерона с прогестерон-связывающими участками МНФК периферической крови.
Определение специфического связывания синтетических стероидов с рецепторами прогестерона.
Жидкостная сцинтилляционная радиометрия.
Инкубация клеток с прегна-D’-пентаранами и прогестероном.
Оценка метаболической активности клеток (МТТ-тест).
Определение уровня ФНО-α с помощью иммуноферментного анализа.
Выделение мРНК из клинического материала.
Реакция обратной транскрипции для получения кДНК.
Полимеразная цепная реакция в реальном времени для определения уровня экспрессии генов.
Статистическая обработка результатов. Результаты исследований и их обсуждение.
Определение специфического связывания прегна-D’- пентаранов с прогестерон-связывающими участками клеток мононуклеарной фракции периферической крови.
Анализ влияния прегна-D’-пентаранов на уровень продукции ФНО-α мононуклеарной фракцией периферической крови.
Влияние прегна-D’-пентаранов на жизнеспособность неизмененных и опухолевых гормон-чувствительных клеток.
Влияние прегна-D’-пентаранов на жизнеспособность мононуклеарной фракции клеток периферической крови.
Влияние прегна-D’-пентаранов на жизнеспособность опухолевых клеток Hela и MOLT.
Влияние прегна-D’-пентаранов на экспрессию генов рецепторов прогестерона и эстрадиола в клетках мононуклеарной фракции периферической крови пациенток с гиперпластическими процессами эндометрия.
Экспрессия генов ядерных и мембранных рецепторов стероидных гормонов в МНФК периферической крови пациенток постменопаузального возраста без гинекологической патологии.
Экспрессия генов рецепторов эстрадиола и прогестерона МНФК периферической крови пациенток постменопаузального возраста с железисто-фиброзными полипами эндометрия.
Экспрессия генов ядерных и мембранных рецепторов эстрадиола и прогестерона МНФК периферической крови пациенток постменопаузального возраста с железистой и железисто-кистозной гиперплазией эндометрия.
Экспрессия генов ядерных и мембранных рецепторов стероидных гормонов в МНФК у пациенток постменопаузального возраста с аденокарциномой эндометрия.
Влияние прегна-D’-пентаранов на экспрессию.
Экспрессия генов ядерных и мембранных рецепторов эстрадиола и прогестерона МНФК периферической крови пациенток постменопаузального возраста с железистой и железисто-кистозной гиперплазией эндометрия.
Экспрессия генов ядерных и мембранных рецепторов стероидных гормонов в МНФК у пациенток постменопаузального возраста с аденокарциномой эндометрия.
Влияние прегна-D’-пентаранов на экспрессию генов рецепторов прогестерона и эстрадиола в МНФК.
Структурно-функциональный анализ соединений гомологического ряда прегна-D’-пентаранов и выбор наиболее активных соединений. Выводы.
Список литературы.
Научная новизна. Впервые было изучено влияние прегна-D’-пентаранов на мононуклеарную фракцию клеток периферической крови у пациенток с гинекологической патологией, определена экспрессия генов подтипов рецепторов прогестерона и эстрадиола в мононуклеарах периферической крови у женщин постменопаузального возраста без гинекологической патологии и выявлены изменения рецепторного профиля МНФК при развитии гиперпластических процессов эндометрия.
Практическая значимость. На основании полученных данных было показано, что для доклинических испытаний наиболее перспективными соединениями класса прегна-D'- пентаранов являются 6(E)-гидрокси-имино-16α,17α-циклогексано-прегн-4-ен- 3,20-дион) и 16α,17α-циклогексано-4-оксапрегн-5-ен-3,20-дион, которые обладают высокой специфической связывающей активностью с прогестерон- связывающими участками клеток мононуклеарной фракции периферической крови, снижают выработку мононуклеарами крови ФНО-альфа, угнетают жизнеспособность опухолевых клеток (HeLa и MOLT-4) и не оказывают токсического действия на неизмененные клетки периферической крови. Оглавление.
Список сокращений.
Введение. Обзор литературы.
Лиганды рецепторов прогестерона.
Лиганды рецепторов прогестерона и иммунная система.
Гиперпластические процессы эндометрия.
Рецепторы половых стероидов в ткани эндометрия.
Лечение гиперпластических процессов эндометрия. Материалы и методы исследования.
Материалы для исследования.
Используемые реактивы.
Используемое оборудование.
Объекты исследования.
Дизайн исследования.
Методы исследования.
Выделение мононуклеарной фракции клеток из периферической крови.
Определение специфического связывания 3Н- прогестерона с прогестерон-связывающими участками МНФК периферической крови.
Определение специфического связывания синтетических стероидов с рецепторами прогестерона.
Жидкостная сцинтилляционная радиометрия.
Инкубация клеток с прегна-D’-пентаранами и прогестероном.
Оценка метаболической активности клеток (МТТ-тест).
Определение уровня ФНО-α с помощью иммуноферментного анализа.
Выделение мРНК из клинического материала.
Реакция обратной транскрипции для получения кДНК.
Полимеразная цепная реакция в реальном времени для определения уровня экспрессии генов.
Статистическая обработка результатов. Результаты исследований и их обсуждение.
Определение специфического связывания прегна-D’- пентаранов с прогестерон-связывающими участками клеток мононуклеарной фракции периферической крови.
Анализ влияния прегна-D’-пентаранов на уровень продукции ФНО-α мононуклеарной фракцией периферической крови.
Влияние прегна-D’-пентаранов на жизнеспособность неизмененных и опухолевых гормон-чувствительных клеток.
Влияние прегна-D’-пентаранов на жизнеспособность мононуклеарной фракции клеток периферической крови.
Влияние прегна-D’-пентаранов на жизнеспособность опухолевых клеток Hela и MOLT.
Влияние прегна-D’-пентаранов на экспрессию генов рецепторов прогестерона и эстрадиола в клетках мононуклеарной фракции периферической крови пациенток с гиперпластическими процессами эндометрия.
Экспрессия генов ядерных и мембранных рецепторов стероидных гормонов в МНФК периферической крови пациенток постменопаузального возраста без гинекологической патологии.
Экспрессия генов рецепторов эстрадиола и прогестерона МНФК периферической крови пациенток постменопаузального возраста с железисто-фиброзными полипами эндометрия.
Экспрессия генов ядерных и мембранных рецепторов эстрадиола и прогестерона МНФК периферической крови пациенток постменопаузального возраста с железистой и железисто-кистозной гиперплазией эндометрия.
Экспрессия генов ядерных и мембранных рецепторов стероидных гормонов в МНФК у пациенток постменопаузального возраста с аденокарциномой эндометрия.
Влияние прегна-D’-пентаранов на экспрессию.
Экспрессия генов ядерных и мембранных рецепторов эстрадиола и прогестерона МНФК периферической крови пациенток постменопаузального возраста с железистой и железисто-кистозной гиперплазией эндометрия.
Экспрессия генов ядерных и мембранных рецепторов стероидных гормонов в МНФК у пациенток постменопаузального возраста с аденокарциномой эндометрия.
Влияние прегна-D’-пентаранов на экспрессию генов рецепторов прогестерона и эстрадиола в МНФК.
Структурно-функциональный анализ соединений гомологического ряда прегна-D’-пентаранов и выбор наиболее активных соединений. Выводы.
Список литературы.