Страйер Л. Биохимия. Том 3

Подождите немного. Документ загружается.

растений табака,- один из наиболее изу-

ченных РНК-содержащих вирусов. Он

образован одной молекулой РНК, окру-

женной белковой оболочкой из 2130 одина-

ковых субъединиц (обсуждение структуры

и сборки вирусов см. в гл. 30). Обработав

вирус фенолом, можно отделить белок от

РНК. Изолированная вирусная РНК инфек-

ционна, тогда как изолированный белок ли-

шен инфекционности. Использование син-

тетических гибридных вирусных частиц

еще раз показало, что генетическая специ-

фичность вируса заключается только в его

РНК. Существует множество штаммов ви-

руса табачной мозаики. Был получен син-

тетический гибридный вирус из РНК

штамма 1 и белка штамма 2. Другой такой

вирус был приготовлен из РНК штамма

2 и белка штамма 1. После заражения

клетки гибридным вирусом вирусное по-

томство всегда состояло из РНК и белка,

соответствующих специфичности РНК ги-

бридного вируса, использованного для зара-

жения.

24.4. Двойная спираль ДНК Уотсона-Крика

В 1953 г. Джеймс Уотсон и Френсис Крик

(James Watson, Francis Crick) установили

трехмерную структуру ДНК и сразу же

предложили возможный механизм ее ре-

пликации. Это блестящее достижение

стоит в ряду важнейших событий в исто-

рии биологии, так как оно открыло путь

к пониманию функции гена на молекуляр-

ном уровне. Уотсон и Крик проанализиро-

вали картины дифракции рентгеновских

лучей на нити ДНК (рис. 24.6), полученные

Розалиндой Франклин и Морисом Уилкин-

сом (Rosalind Franklin, Maurice Wilkins),

и предложили структурную модель, кото-

рая в основных своих чертах оказалась

верной. Характерные особенности этой мо-

дели сводятся к следующему.

1. Две спиральные полинуклеотидные

цепи закручены вокруг общей оси. Цепи

направлены в противоположные стороны

(рис. 24.7).

2. Пуриновые и пиримидиновые основа-

ния расположены внутри спирали, а остат-

ки фосфата и дезоксирибозы - снаружи

(рис. 24.8). Плоскости оснований перпенди-

кулярны оси спирали. Плоскости остатков

сахара расположены почти под прямым

углом к основаниям.

3. Диаметр спирали 20 А. Расстояние

Межплоскостное расстояние 3,4 А

Рис. 24.6. Фотография дифракции рент-

геновских лучей на влажной ни-

ти ДНК (В-форма). Крест в се-

редине картины характерен для

спиральной структуры. Интен-

сивные меридианальные ре-

флексы возникают в результа-

те дифракции на стопке пар

оснований, расположенных на

расстоянии 3,4 А друг от друга.

(Печатается с любезного разре-

шения д-ра Maurice Wilkins.)

между соседними основаниями вдоль оси

спирали 3,4 А, они повернуты относитель-

но друг друга на 36°. Таким образом, на

один виток спирали каждой из цепей при-

ходится 10 нуклеотидов, что соответствует

34 А.

4. Две цепи удерживаются вместе водо-

родными связями между парами основа-

ний. Аденин всегда спаривается с тимином,

гуанин - с цитозином (рис. 24.9 и 24.10).

5. На последовательность оснований

в полинуклеотидной цепи не накладывает-

ся никаких ограничений. Определенная по-

следовательность оснований несет кон-

кретную генетическую информацию.

Важнейшее свойство двойной спирали -

специфичность спаривания оснований. Ис-

ходя из стерических ограничений и способ-

ности к образованию водородных связей,

Уотсон и Крик постулировали, что аденин

24. ДНК: генетическая роль,

структура и репликация

Формы ДНК -

А-форма ДНК: двухспиральная ДНК, содержащая примерно 11 остатков на

один оборот спирали. В этой правозакрученной спирали плоскости пар осно-

ваний повернуты примерно на 20° относительно перпендикуляра к оси спира-

ли. Образуется при дегидратации В-формы ДНК.

В-форма ДНК: классическая уотсон-криковская двойная спираль, содержащая

примерно 10 остатков на один оборот спирали. В этой правозакрученной спи-

рали плоскости пар оснований перпендикулярны оси спирали.

Z-форма ДНК: левозакрученная двухспиральная форма ДНК, содержащая

около 12 остатков на один оборот. Эта структура предложена Александром

Ричем (Alexander Rich) и его сотрудниками на основе изучения кристалличе-

ской структуры d(CG)

должен спариваться с тимином, а гуа-

нин - с цитозином. Стерические ограниче-

ния на расположение основания обуслов-

Рис. 24.7. Схема модели двухспиральной

ДНК. Вся структура повто-

ряется через 34 А, что соответ-

ствует 10 остаткам в каждой

цепи.

Часть IV.

Информация

лены периодическим строением спираль-

ной структуры сахарофосфатного остова

обеих полинуклеотидных цепей. Глико-

зидные связи, которыми присоединяется

к остову пара оснований, отстоят друг от

друга на расстояние 10,85 А (рис. 24.11).

Пара пиримидин—пурин прекрасно

укладывается в это пространство. В то же

время для двух пуринов этого расстояния

недостаточно. Для двух пиримидинов мес-

та более чем достаточно, но они оказались

бы слишком далеко друг от друга, чтобы

образовать водородные связи. Следова-

Рис. 24.8. Схема одной из цепей двойной

спирали ДНК (вид по оси спи-

рали). Основания - в данном

случае только пиримидины -

расположены внутри, а сахаро-

фосфатный остов - снаружи.

Отчетливо видно, что структу-

ра имеет ось симметрии деся-

того порядка. Основания обо-

значены зеленым цветом, саха-

ра - красным.

Рис. 24.9. Модель пары оснований аде-

нин—тимин.

Рис. 24.10. Модель пары основании гуа-

нин—цитозин.

Рис. 24.11. Наложение АТ-пары основа-

ний (обозначена желтым цве-

том) на GС-пару (обозначена

синим цветом). Обратите вни-

мание, что положения глико-

зидных связей и С'-1 атома де-

зоксирибозы (обозначен зе-

леным) в двух типах пар

оснований почти одинаковы.

24. ДНК: генетическая роль,

структура и репликация

Рис. 24.12. Модель двухспиральной моле-

кулы ДНК. Показаны три пары

оснований. Обратите внима-

ние, что две цепи ориентиро-

ваны в противоположном на-

правлении.

тельно, одно из оснований в паре в двой-

ной спирали ДНК всегда должно быть пу-

рином, а другое - пиримидином. Кроме

того, на спаривание оснований наклады-

вают ограничения правила образования

водородных связей. Атомы водорода в пу-

риновых и пиримидиновых основаниях за-

нимают вполне определенные положения.

Аденин не может спариваться с цитозином,

так как тогда на месте одной связи оказа-

лось бы два атома водорода, а на месте

другой - ни одного. Точно так же гуанин не

может связываться с тимином. Аденин, на-

оборот, образует с тимином две водо-

родные связи, а гуанин - три водородные

связи с цитозином (рис. 24.9 и 24.10).

Ориентация этих водородных связей и рас-

стояние между ними оптимальны для

сильного взаимодействия между основа-

ниями.

Эта схема спаривания оснований получи-

ла убедительное подтверждение в резуль-

Часть IV.

Информация

тате проведенных ранее исследований ну-

клеотидного состава ДНК разных видов.

В 1950 гг. Эрвин Чаргафф (Erwin Chargaff)

обнаружил, что соотношение аденина с ти-

мином и гуанина с цитозином у всех иссле-

дованных видов было близко к 1. Значение

этого факта оставалось неясным, пока не

была предложена модель Уотсона-Крика

(рис. 24.12 и 24.13). Только тогда стало по-

нятным, что эта закономерность отражает

важнейшее свойство структуры и функции

ДНК - специфичность спаривания основа-

ний.

24.5. Комплементарные цепи служат

матрицами друг для друга

при репликации ДНК

Модель двухспиральной молекулы ДНК

позволила сразу же предложить механизм

репликации ДНК. Уотсон и Крик опубли-

ковали свою гипотезу через месяц после

того, как представили модель структуры

ДНК в виде прекрасной статьи, отличав-

шейся простотой и ясностью.

«Если задан определенный порядок ос-

нований в одной из цепей, можно напи-

сать точную последовательность основа-

ний в другой цепи, поскольку спаривание

специфично. Таким образом, каждая из

цепей комплементарна другой цепи,

и именно это свойство подсказывает, ка-

ким образом может удваиваться молеку-

ла дезоксирибонуклеиновой кислоты.

Прежние дискуссии о самоудвоении

всегда опирались на представление о не-

кой матрице или каком-то шаблоне.

Предполагалось, что матрица копирует

непосредственно самое себя, или должна

образовывать «негатив», который в свою

очередь действует в качестве матрицы

и образует исходный «позитив». Ни

в одном случае не было предложено де-

тального объяснения, как это могло бы

происходить на уровне атомов и моле-

кул.

В нашей модели дезоксирибонуклеино-

вой кислоты имеется, по существу, пара

матриц, причем каждая из них компле-

ментарна другой. Мы полагаем, что

перед удвоением водородные связи раз-

рываются и две цепи раскручиваются

и расходятся. Затем каждая цепь исполь-

зуется в качестве матрицы для образова-

ния на ней новой комплементарной цепи,

так что в конце концов у нас будет две

пары цепей, тогда как раньше была

только одна. Более того, при таком спо-

собе репликация последовательность пар

оснований будет в точности удвоена».

24.6. Репликация ДНК полуконсервативна

Уотсон и Крик предположили, что одна из

цепей каждой дочерней молекулы ДНК

синтезируется заново, а другая происходит

от родительской молекулы ДНК. Такое

распределение атомов родительской моле-

кулы называют полуконсервативным.

Метью Меселсон и Франклин Сталь

(Matthew Meselson, Franklin Stahl) постави-

ли принципиально важный эксперимент

для проверки этой гипотезы. Родитель-

скую ДНК пометили тяжелым изотопом

азота

N, чтобы сделать ее более тяже-

лой, чем обычная ДНК. Для этого выра-

щивали Е. coli в течение многих поколений

в среде, содержавшей в качестве единствен-

ного источника азота

Cl. Затем бак-

терии быстро переносили в среду, содер-

жавшую

N-стабильный изотоп азота.

Этот эксперимент должен был показать,

как распределяются изотопы

N и

в молекулах ДНК в ходе последующих

циклов репликации.

Распределение

N и

N в потомстве

изучали с помощью только что разрабо-

танного метода равновесной седиментации

в градиенте плотности. Небольшое коли-

чество ДНК растворяют в концентриро-

ванном растворе хлористого цезия с плот-

Рис. 24.13. Пространственная модель

двойной спирали ДНК. Отчет-

ливо видны большая бороздка

(показана красным цветом)

и малая бороздка (показана си-

ним цветом). Обратите внима-

ние, что часть каждого основа-

ния доступна для взаимодей-

ствия с другими молекулами.

(Печатается с любезного разре-

шения д-ра Sung-Hou Kim.)

ностью, близкой к плотности ДНК

(~1,7 г/см

). Этот раствор центрифуги-

руют почти до равновесного состояния.

Под действием противодействующих про-

цессов седиментации и диффузии в центри-

фужной ячейке возникает градиент концен-

трации хлористого цезия. В результате

создается устойчивый градиент плотности

от 1,66 до 1,76 г/см

. Под действием цен-

тробежной силы молекулы ДНК переходят

в ту область градиента, в которой плот-

ность раствора равна их собственной пла-

вучей плотности. Высокомолекулярная

24. ДНК: генетическая роль,

структура и репликация

Рис. 24.14. Разделение

N- и

N-ДНК

при центрифугировании в гра-

диенте плотности. А - фото-

графия центрифужной ячейки

в ультрафиолетовом свете;

Б - денситометрическая кривая

поглощения, полученная при

сканировании фотографии,

приведенной на рис. А.

[Meselson M., Stahl F. W., Proc.

Nat. Acad. Sci., 44, 671 (1958).]

ДНК образует четко выраженную полосу,

обнаруживаемую по поглощению ультра-

фиолетового света. Молекулы

N-ДНК и

N-ДНК хорошо разделяются в таком

градиенте, поскольку их плотность разли-

чается примерно на 1% (рис. 24.14).

ДНК выделяли из бактерий через раз-

личные промежутки времени после перено-

са со среды, содержащей

N, на

N. Ана-

лиз этих образцов центрифугированием

в градиенте плотности показал, что после

одного цикла репликации ДНК дает одну

полосу (рис. 24.15). Плотность этой полосы

была равна в точности среднеарифметиче-

скому значению между плотностью

N- и

N-ДНК. Отсутствие

N-ДНК свиде-

тельствовало о том, что целостность ро-

дительской ДНК в ходе репликации нару-

шается. Отсутствие

N-ДНК показывало,

что часть атомов всех дочерних молекул

ДНК происходила от родительской ДНК.

Соотношение

N и

N в дочерних моле-

кулах должно составлять 1:1, так как плот-

ность гибридных молекул ДНК была сред-

ней между

N- и

N-ДНК.

После двух циклов репликации ДНК

распределялась поровну в двух полосах.

Одна из них - гибридная ДНК,

другая -

N-ДНК. Меселсон и Сталь

сделали из этих убедительных эксперимен-

Часть IV.

Информация

тов вывод, «что азот молекул ДНК рас-

пределяется поровну между двумя физиче-

ски раздельными структурами, что после

удвоения каждая дочерняя молекула полу-

чает одну из этих структур и что эти

структуры сохраняются интактными

в течение многих удвоений». Полученные

результаты прекрасно согласовывались

с моделью репликации ДНК Уотсона—

Крика (рис. 24.16).

24.7. Некоторые вирусы содержат

на определенных стадиях жизненного цикла

одноцепочечную ДНК

ДНК не всегда двухцепочечная молекула.

Роберт Синсхеймер (Robert Sinsheimer) об-

наружил, что ДНК фага φХ174, небольшо-

го вируса, заражающего Е. coli,- одноцепо-

чечная молекула. Несколько эксперимен-

тальных фактов привели его к этому

неожиданному выводу. Во-первых, соотно-

шение оснований в ДНК фага φХ174 не

удовлетворяет правилу [А] = [Т] и [G] =

= [С]. Во-вторых, вязкость раствора ДНК

фага φХ174 значительно меньше вязкости

раствора ДНК Е. coli той же концентра-

ции. Гидродинамические свойства ДНК

фага φХ174 соответствуют полимеру

в конформации случайного клубка. В отли-

чие от этого ДНК в форме двойной спира-

ли ведет себя гидродинамически как очень

жесткая палочка. В-третьих, аминогруппы

оснований ДНК фага φХ174 легко реаги-

руют с формальдегидом, тогда как основа-

ния в двойной спирали ДНК почти недо-

ступны для этого реактива.

Обнаружение этой одноцепочечной ДНК

породило сомнения в универсальности

схемы полуконсервативной репликации,

предложенной Уотсоном и Криком. Одна-

ко вскоре было показано, что ДНК фага

φХ174 находится в одноцепочечном со-

стоянии только на протяжении части жиз-

ненного цикла вируса. Синсхеймер обнару-

жил, что зараженные клетки Е. coli содер-

жат двухцепочечную форму ДНК фага

Рис. 24.15. Доказательство полуконсерва-

тивной репликации в клетках Е.

coli с помощью центрифугиро-

вания в градиенте плотности.

Положение полосы ДНК зави-

сит от содержания

N и

После 1,0 генерации все моле-

кулы ДНК представляют со-

бой гибриды, содержащие рав-

ное количество

N и

Родительская ДНК (

N) после

1,0 генерации не обнаруживает-

ся. [Meselson M., Stahl F.W.,

Proc. Nat. Acad. Sci., 44, 671

(1958).]

φХ174. Эта двухцепочечная ДНК назы-

вается репликативной формой, так как она

служит матрицей для синтеза ДНК вирус-

ного потомства. Вирусы, содержащие

одноцепочечную РНК, также реплици-

Рис. 24.16. Схема полуконсервативной ре-

пликации. Родительская ДНК

изображена зеленым, а ново-

синтезированная - красным.

[Meselson M., Stahl F.W., Proc.

Nat. Acad. Sci, 44, 671 (1958).]

24. ДНК: генетическая роль,

структура и репликация

Рис. 24.17. Электронная микрофотогра-

фия частиц вируса φХ174. (Пе-

чатается с любезного разреше-

ния д-ра Robley Williams.)

руются через промежуточную двухцепочеч-

ную репликативную форму. Механизмы

этих процессов подробнее рассматривают-

ся в гл. 30. Здесь же важно лишь подчерк-

нуть, что эти исследования подтвердили

всеобщность схемы репликации Уотсона—

Крика. Двухцепочечная ДНК (или

РНК) - репликативная форма всех из-

вестных генов.

24.8. Молекулы ДНК очень длинные

Прежде чем перейти к механизму реплика-

ции ДНК, представляющему собой

сложный ферментативный процесс, рассмо-

трим некоторые свойства ДНК. Порази-

тельная особенность молекул ДНК, встре-

чающихся в природе,- их необычайная дли-

на. Хромосома Е. coli представляет собой

единую молекулу двухспиральной ДНК, со-

держащей 4 млн. пар оснований. Масса

этой молекулы ДНК 2,6•10

кДа. Она

имеет крайне асимметричную форму: ее

контурная длина 14•10

А, а диаметр 20 А.

Контурная длина (1,4 мм) этой молекулы

ДНК соответствует размерам макроскопи-

Часть IV.

Информация

ческих структур, а диаметр 20 А находится

на уровне атомных размеров. Бруно Зимм

(Bruno Zimm) показал, что самая большая

хромосома у Drosophila melanogaster содер-

жит единую молекулу ДНК, состоящую из

6,2•10

пар оснований. Контурная длина

этой молекулы 2,1 см. Столь асимме-

тричные молекулы ДНК весьма чувстви-

тельны к разрыву под действием сил сдви-

га. Они легко разрываются на фрагменты,

масса которых в 1000 раз меньше, чем мас-

са исходной молекулы, если при манипуля-

циях с ней не принимаются особые меры

предосторожности.

Изображения молекул ДНК многих бак-

терий и вирусов были непосредственно по-

лучены с помощью электронного микро-

скопа (рис. 24.18). Размеры некоторых та-

ких молекул ДНК приведены в табл. 24.1

Следует отметить, что даже самые ма-

ленькие молекулы ДНК имеют весьма вы-

тянутую форму. Например, ДНК вируса

полиомы содержит 5100 пар оснований

и имеет контурную длину 1,7 мкм (17000

А). Напомним, что диаметр молекулы ге-

моглобина составляет 65 А, а длина колла-

гена, одного из самых длинных бел-

ков,- 3000 А. Это сравнение подчеркивает

огромную длину и выраженную асимме-

трию молекул ДНК.

Рис. 24.18. Электронная микрофотогра-

фия молекулы ДНК бактерио-

фага λ (форма RFII). (Печатает-

ся с любезного разрешения

д-ра Thomas Broker.)

Для измерения длин молекул нуклеиновых кислот применяется единица

длины, равная 1000 пар нуклеотидов в случае двухцепочечных молекул ну-

клеиновых кислот (т.п.н., или kb - от англ. kilobase) или 1000 нуклеотидов

в случае одноцепочечных молекул (т.н., или kb). 1 kb двухцепочечной ДНК

имеет контурную длину 0,34 мкм и массу примерно 660 кДа.

24.9. Двойная спираль может быть обратимо

расплавлена

Две цепи ДНК-спирали могут легко ра-

зойтись, если разрушить водородные свя-

зи, соединяющие спаренные основания.

Этого можно достичь, либо нагревая рас-

твор ДНК, либо добавляя в раствор кисло-

ту или щелочь для ионизации оснований.

Раскручивание двойной спирали называет-

ся плавлением, так как происходит мгно-

венно при строго определенной температу-

ре. Температура плавления (Т

пл

) - это та

температура, при которой разрушается по-

ловина спиральной структуры. Резкость

этого перехода показывает, что двойная

спираль ДНК - структура высококоопера-

тивная. Плавление ДНК легко регистриро-

вать, измеряя ее поглощение при 260 нм.

Нарушение межплоскостных взаимодей-

ствий пар оснований приводит к увеличе-

нию поглощения - эффект, называемый ги-

перхромизмом (рис. 24.19).

Температура плавления молекулы ДНК

существенно зависит от ее нуклеотидного

состава. Молекулы ДНК, богатые GС-па-

рами оснований, имеют более высокие зна-

чения Т

пл

, чем молекулы, богатые АТ-па-

рами оснований (рис. 24.20). В общем Т

пл

Таблица 24.1. Размеры некоторых молекул ДНК

(Kornberg A., DNA replication, W. H. Freeman and Co.,

1980,

p. 20)

Организм

Вирусы

Полиома или SV-40

Фаг λ

Фаг Т2

Вирус коровьей оспы

Бактерии

Микоплазма

E.coli

Эукариоты

Дрожжи

Дрозофила

Человек

Число пар

оснований,

5,1

48,6

166

190

760

4000

13500

165000

2900000

Контурная

длина, мкм

1,7

260

1 360

4600

56000

990000

Рис. 24.19. При плавлении двойной спира-

ли, когда она переходит в одно-

цепочечную форму, поглоще-

ние раствора ДНК при 260 нм

возрастает.

Рис. 24.20. Кривые плавления различных

ДНК. На графике отложено от-

носительное поглощение при

260 нм в зависимости от темпе-

ратуры (поглощение при 25°С

принято за 1). Т

пл

равна 69°С

для ДНК Е. coli (50% GС-пар)

и 76°С для ДНК. P. aeruginosa

(68% GС-пар).

24. ДНК: генетическая роль,

структура и репликация

Рис. 24.21. Электронная микрофотогра-

фия молекулы ДНК, частично

расплетенной под действи-

ем щелочи. Одноцепочечные

участки имеют вид петель, ко-

торые окрашены менее интен-

сивно, чем двухцепочечные

участки. Эти расплетенные

участки ДНК богаты АТ-пара-

ми оснований. Один из них по-

мечен стрелкой. [Inman R. В.,

Schnos M., J. Mol. Biol., 49, 93

(1970).]

ДНК многих видов повышается линейно

от 77 до 100°С с увеличением содержания

GС-пар от 20 до 78%. GC-пары стабильнее

АТ-пар, так как в них основания удержи-

ваются вместе тремя водородными связя-

ми, а не двумя. Следовательно, АТ-богатые

области ДНК должны плавиться первыми

(рис. 24.21). Как мы увидим ниже, in vivo

двойная спираль расплетается под дей-

ствием специальных белков. Некоторые из

них вызывают раскручивание ДНК, гидро-

лизуя АТР (разд. 24.21).

Разделенные комплементарные цепи

ДНК спонтанно реассоциируют с образо-

ванием двойной спирали, если температура

становится ниже Т

пл

. Этот процесс ренату-

рации иногда называют отжигом. Ско-

рость реассоциации зависит от концентра-

ции комплементарных последовательно-

стей (разд. 29.10). Легкость, с которой

плавятся и реассоциируют двойные спира-

ли, имеет критическое значение для выпол-

нения ДНК ее биологических функций.

Часть IV.

Информация

24.10. Некоторые молекулы ДНК имеют

кольцевую форму

Методом электронной микроскопии было

показано, что интактные молекулы ДНК

из многих источников замкнуты в кольцо

(рис. 24.18). Открытие того факта, что Е.

coli имеет кольцевую хромосому, не было

неожиданностью. Оно было предсказано

на основе генетических исследований, пока-

завших, что карта генетического сцепления

этой бактерии является кольцевой. Термин

«кольцевая» означает лишь, что цепь ДНК

непрерывна, и отнюдь не относится к ее

геометрической форме. In vivo молекулы

ДНК всегда имеют весьма компактную

форму. В связи с этим следует отметить,

что хромосома Е. coli примерно в 1000 раз

длиннее, чем клетка бактерии.

Не все молекулы ДНК имеют кольце-

вую форму. Например, ДНК бактериофага

Т7 является линейной. Молекулы ДНК не-

которых вирусов, таких, как бактериофаг λ,

претерпевают взаимопревращения линейной

и кольцевой форм. В вирусной частице при-

сутствует линейная форма, а в клетке-хо-

зяине - кольцевая (разд. 30.16).

24.11. Кольцевые двухспиральные

молекулы ДНК могут находиться

в суперспирализованном

состоянии

При превращении линейной двухцепочеч-

ной ДНК в замкнутую кольцевую молеку-

лу она приобретает новое свойство. Дже-

ром Виноград (Jerome Vinograd) установил,

что ось двойной спирали ДНК может сама

быть закручена в суперспираль. Эта супер-

спираль может быть закручена в правую

или в левую сторону (рис. 24.22). Термины

«суперспирализованная», «сверхскручен-

Рис. 24.22. Схематическое изображение

релаксированной (А) и супер-

спирализованной (Б) ДНК.