94
мікроорганізмів, характеру взаємовідносин між збудником і
організмом хазяїна, формування внутрішньолікарняних інфекцій
і зміни перебігу інфекційних процесів у сучасних умовах. Важли-
вим прикладом значення генетики мікроорганізмів є використан-
ня її законів для одержання нових вакцинних штамів, штамів-
продуцентів антибіотиків, інших лікарських препаратів із мікро-
організмів.
Досягнення генетики мікроорганізмів дозволили створити но-
вий розділ науки і практики — генну інженерію, яка займається
конструюванням нових генетичних структур за рахунок штучно-
го комбінування генів.
Загальний принцип створення нових генів із окремих генетич-
них елементів можна представити таким чином. ДНК, яка несе
потрібний ген, і ДНК вектора-переносника (наприклад, плазміди,
фаги або віруси тваринних клітин) обробляють ферментами рест-
риктазами, які розрізають ДНК у точно визначеній ділянці з утво-
ренням однониткових комплементарних «липких» кінців. Потім за
допомогою полінуклеотидлігази зшивають такі фрагменти в одну
рекомбінативну молекулу ДНК, яка містить потрібний ген і век-
тор, що забезпечує реплікацію цієї молекули в клітині. Далі ре-
комбінантну молекулу вводять методом трансформації в клітини
E. coli, дріжджів або в клітини тварин. При культивуванні таких
клітин одержують продукцію потрібних речовин. Наприклад, за
допомогою генної інженерії одержані штами E. coli, які продуку-
ють людський інсулін, віруси вісповакцини, що містять гени для
синтезу антигенів вірусу гепатиту В, BIЛ та ін., дріжджі, які син-
тезують гормони і медіатори імунної системи тощо.
Утворення генно-інженерних бактерій потребує виконання
таких основних кроків (рис. 4. 4):
1. ДНК, що містить індивідуальний ген, який використовуєть-
ся для трансплантації, має бути виділена з організму донора або
може бути синтезована з нуклеотидів у лабораторних умовах.
2. Повинна бути виділена плазмідна ДНК (екстрахромосом-
на циклічна ДНК), яка слугує вектором для перенесення індиві-
дуального гена.
3. Донорську і плазмідну ДНК обробляють ферментом (рест-
рикційною ендонуклеазою), що розщеплює або розрізає ДНК так,
щоб утворилися комплементарні розгорнуті кінці («липкі» кінці).
Вони можуть з’єднуватися з іншими фрагментами ДНК, що ма-
ють такі ж комплементарні «липкі» кінці.
4. «Липкі» кінці уламка донорської ДНК сполучаються з «лип-
кими» кінцями плазмідної ДНК, формуючи таким чином моди-