Лысак В.В. Микробиология

30

терий. Для представителей этой группы характерны все типы энерге-

тического метаболизма и питания. Клетки большинства видов Проте-

обактерий имеют палочковидную, сферическую или вибриоидную

форму. В основном размножаются бинарным делением, но для неко-

торых видов характерно почкование и образование плодовых тел в

сложном клеточном цикле. В этой группе имеются как подвижные за

счет жгутиков, так и неподвижные бактерии. По отношению к моле-

кулярному кислороду Протеобактерии бывают облигатными аэроба-

ми, облигатными анаэробами и факультативными анаэробами. Группа

Протеобактерий на основании различий в 16SрРНК разделена на 5

подгрупп: альфа, бета, гамма, дельта и эпсилон.

Кроме Протеобактерий к грамотрицательным относятся следующие

основные группы эубактерий: водородные термофилы, зеленые нит-

чатые бактерии, зеленые серные бактерии, цианобактерии, спирохеты,

цитофаги, бактероиды, хломидии, планктомицеты, дейнококки, тер-

мофаги, хлорофлексусы, фузобактерии, фибробактерии, термодесуль-

фобактерии и др.

Филогенетические группы грамположительных бактерий – Actino-

bacteria и Firmibacteria. Группа Actinobacteria («актиномицетная

ветвь») представлена следующими родами бактерий, имеющими в

ДНК высокое содержание ГЦ-пар: Geodermatophilus, Frankia, Strepto-

myces, Arthrobacter, Micrococcus, Actinomyces, Bifidobacterium, Propi-

onibacterium, Actinoplanes, Nocardia, Rhodococcus, Corynebacterium,

Mycobacterium. Группа Firmibacteria («клостридиальная ветвь» – бак-

терии с низким содержанием ГЦ-пар в ДНК) состоит из родов: Lacto-

coccus, Streptococcus, Leuconostoc, Listeria, Caryophanon, Staphylococ-

cus, Bacillus, Desulfotomaculum, Heliobacterium, Clostridium.

В составе архебактерий выделяют 3 филогенетических группы:

Crenarchaeota, Euryarchaeota и Korarchaeota. Группа Crenarchaeota

представлена экстремально термофильными бактериями, большинст-

во представителей которых осуществляют метаболизм серы, некото-

рые восстанавливают ионы железа и молибдена. В группу Euryar-

chaeota входят облигатно анаэробные метаногенные архебактерии, а

также экстремальные термофилы и галофилы. Группа Korarchaeota

образована архебактериями, обитающими в горячих серных источни-

ках. До настоящего времени ни один из представителей этой группы

(обладающий сходной 16SрРНК) не выделен в виде чистой культуре,

поэтому их фенотипические признаки изучены крайне недостаточно.

Заканчивая рассмотрение филогенетических ветвей прокариот, сле-

дует отметить, что предложенная филогенетическая система, осно-

ванная на исследовании нуклеотидных последовательностей только

31

одного гена рибосомальной РНК – не более чем одна из технически

удобных и разработанных систем упорядочения многочисленных ор-

ганизмов с целью их идентификации. Однако, как нам кажется, по-

строить логически верную таксономию бактерий только с учетом это-

го признака не представляется возможным.

Наиболее признанной и используемой фенотипической классифи-

кацией бактерий является классификация, представленная в девятом

издании Определителя бактерий Берджи. В этом издании бактерии на

основании строения пограничного слоя клетки разделены на четыре

основных категории (отдела): 1) Gracilicutes (от лат. cutes – кожа,

gracilis – тонкий) – грамотрицательные эубактерии, имеющие клеточ-

ные стенки; 2) Firmicutes (от лат. firmus – прочный) – грамположи-

тельные эубактерии, имеющие клеточные стенки; 3) Tenericutes (от

лат. tener – мягкий, нежный) – эубактерии, лишенные клеточных сте-

нок; 4) Mendosicutes (от лат. mendosus – ошибочный) – архебактерии,

клеточные стенки которых отличаются от аналогичных структур про-

кариот.

В отдел Gracilicutes входят бактерии различной морфологии с гра-

мотрицательной клеточной стенкой. Размножение происходит в ос-

новном бинарным делением, некоторые бактерии размножаются поч-

кованием. Эндоспор не образуют. Большинство подвижны: встреча-

ются все типы передвижений бактерий – с помощью жгутиков,

скольжением, изгибанием. В отдел входят аэробные, анаэробные и

факультативно анаэробные бактерии. Отдел включает фототрофные и

хемотрофные бактерии. Отдел подразделяют на три класса: Scotobac-

teria, Oxyphotobacteria, Anoxyphotobacteria. В класс Scotobacteria вхо-

дят грамотрицательные бактерии, не использующие световой энергии,

а получающие её только в результате окислительно-восстанови-

тельных реакций. Название класса происходит от греч. sсotos – темно-

та. Это самый крупный класс бактерий. В класс Anoxyphotobacteria

входят пурпурные бактерии, зеленые бактерии и гелиобактерии, осу-

ществляющие аноксигенный фотосинтез (без выделения молекуляр-

ного кислорода). Класс Oxyphotobacteria представлен цианобактерия-

ми и прохлорофитами, осуществляющими оксигенный фотосинтез (с

выделением молекулярного кислорода). Этот фотосинтез аналогичен

фотосинтезу, протекающему в растениях.

В отдел Firmicutes включены бактерии с грамположительной кле-

точной стенкой. Клетки могут быть разной формы: палочки, кокки,

нитевидные, ветвящиеся. Некоторые представители образуют эндос-

поры. Большинство из них неподвижны; подвижные формы имеют

перитрихиальное жгутикование. В состав отдела входят аэробные,

32

анаэробные и факультативно анаэробные бактерии. Отдел состоит из

двух классов: Firmibacteria, Thallobacteria. Класс Firmibacteria –

включает большое количество «неветвящихся» грамположительных

бактерий. Класс Thallobacteria включает бактерии, клетки которых

способны «ветвиться».

Отдел Tenericutes представлен бактериями, не имеющими клеточ-

ной стенки. В связи с отсутствием клеточной стенки форма клеток не-

постоянна: в чистой культуре одного вида одновременно присутству-

ют кокковидные, палочковидные, нитевидные, грушевидные, диско-

видные и другие. Размножение бактерий, входящих в этот отдел, про-

исходит бинарным делением, почкованием. Окрашивание по Граму

отрицательное. Характерно образование мелких, врастающих в агар

колоний. Могут быть сапрофитными, паразитами или патогенами.

Отдел состоит из одного класса Mollicutes (микоплазмы).

Отдел Mendosicutes образован бактериями с ригидной клеточной

стенкой, но не содержащей пептидогликана муреина. Большинство

представителей – строгие анаэробы, многие из которых имеют жгути-

ки. Виды характеризуются экологическим и метаболическим разнооб-

разием, способностью жить в экстремальных условиях. Отдел состоит

из одного класса Archaebacteria.

В составе четырех отделов (основных категорий) выделено 35

групп (или секций) бактерий, которые в большей или меньшей степе-

ни будут охарактеризованы в последующих главах.

К отделу Gracilicutes принадлежат:

Группа 1. Спирохеты.

Группа 2. Аэробные (или микроаэрофильные), подвижные, спира-

левидные (или вибриоидные) грамотрицательные бактерии.

Группа 3. Неподвижные или, редко подвижные грамотрицательные

изогнутые бактерии.

Группа 4. Грамотрицательные аэробные (или микроаэрофильные)

палочки и кокки.

Группа 5. Факультативно аэробные грамотрицательные палочки.

Группа 6. Грамотрицательные анаэробные прямые, изогнутые или

спиралевидные палочки.

Группа 7. Бактерии, осуществляющие диссимиляционное восста-

новление серы или сульфата.

Группа 8. Анаэробные грамотрицательные кокки.

Группа 9. Риккетсии и хламидии.

Группа 10. Аноксигенные фототрофные бактерии.

Группа 11. Оксигенные фототрофные бактерии.

33

Группа 12. Аэробные хемолитотрофные бактерии и близкие орга-

низмы.

Группа 13. Почкующиеся и/или образующие выросты бактерии.

Группа 14. Бактерии, имеющие чехлы.

Группа 15. Нефотосинтезирующие скользящие бактерии, не обра-

зующие плодовых тел.

Группа 16. Скользящие бактерии, образующие плодовые тела.

В отдел Firmicutes входят:

Группа 17. Грамположительные кокки.

Группа 18. Грамположительные палочки и кокки, образующие эн-

доспоры.

Группа 19. Грамположительные палочки правильной формы, не об-

разующие спор.

Группа 20. Грамположительные палочки неправильной формы, не

образующие спор.

Группа 21. Микобактерии.

Группы 22 – 29. Актиномицеты.

К отделу Tenericutes принадлежат:

Группа 30. Микоплазмы.

Отдел Mendosicutes включает:

Группа 31. Метаногены.

Группа 32. Сульфатредуцирующие архебактерии.

Группа 33. Экстремально галофильные архебактерии (галобакте-

рии).

Группа 34. Архебактерии, лишенные клеточной стенки.

Группа 35. Экстремально термофильные и гипертермофильные ар-

хебактерии, метаболизирующие серу.

В заключение следуют подчеркнуть, что большинство микроорга-

низмов, существующих в природных образцах, еще должны быть вы-

делены в чистые культуры. Считается, что в настоящее время культи-

вировать можно только 0,1% всего микробного разнообразия, а около

99% видов бактерий вырастить и идентифицировать не удается, хотя

в чистую культуру выделено и описано около 5000 видов прокариот.

34

Глава 2. МОРФОЛОГИЯ И СТРУКТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ

БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ

2.1. Морфология бактерий

Для бактерий характерны три основные формы клеток: шаровид-

ная (сферическая), или кокковидная (от греч. kokkos – зерно), цилинд-

рическая (палочковидная) и извитая (рис. 3).

А Б В

Рис. 3. Микрофотографии бактерий: А – сферические клетки; Б – извитые

клетки; В – палочковидные клетки

Кокковидные бактерии обычно имеют форму правильного шара

диаметром 1,0 – 2,0 мкм, но могут быть овальными, эллипсоидными,

бобовидными. Кокковидные бактерии способны делиться в несколь-

ких плоскостях, при этом после деления клетки могут не расходиться

и формировать различного вида скопления (рис. 4).

Рис. 4. Типы скоплений кокковидных клеток: А – диплококки; Б – стрепто-

кокки; В – стафилококки; Г – тетракокки; Д – сарцины

Если деление кокков происходит в одной плоскости, то могут об-

разовываться пары клеток – диплококки (от лат. diplos – двойной) и

цепочки клеток разной длины – стрептококки (от греч. streptos – це-

почка). Кокки, делящиеся в двух взаимно перпендикулярных плоско-

стях и не расходящиеся после этого, образуют тетрады кокков (тетра-

кокки) (от лат. tetra – четыре). Когда деление клеток происходит в

трех взаимно перпендикулярных плоскостях, образуются пакеты из

восьми кокков в виде тюков кубической формы (сарцины) (от лат.

А

Б

В

Г

Д

35

sarcina – связка, тюк ). У некоторых видов бактерий при делении кок-

ков в нескольких плоскостях могут образовываться неправильные по

форме скопления, напоминающие гроздья винограда – стафилококки

(от лат. staphyle – гроздь винограда).

Палочковидные (цилиндрические) клетки сильно различаются

по величине отношения длины клетки к ее поперечнику. Они делятся

только в одной плоскости – перпендикулярно оси цилиндра. Клетки

при этом могут располагаться поодиночке (монобактерии), образо-

вывать пары (диплобактерии) или цепочки (стрептобактерии)

(рис. 5).

Рис. 5. Типы расположение палочковидных клеток: А – монобактерии; Б –

диплобактерии; В – стрептобактерии

Извитые клетки могут иметь разное число завитков. В зависимо-

сти от формы и количества завитков различают три типа клеток: виб-

рионы (от греч. vibrio – извиваясь, изгибаясь) имеют один завиток, не

превышающий четверти оборота спирали (изогнутые клетки наподо-

бие запятой), спириллы (от греч. speira – спираль)

имеют 3 – 5 круп-

ных

завитков и спирохеты – большое количество мелких завитков

(рис. 6).

Рис. 6. Типы извитых клеток: А – вибрионы; Б – спириллы; В – спирохеты

Кроме описанных форм, которые преобладают среди бактерий, из-

вестны и клетки иных типов: клетки с выростами; булавовидной фор-

мы; веретенообразные; ланцетовидные; разветвленные и неразветв-

ленные нитчатые формы; имеющие вид кольца, замкнутого или ра-

А Б

В

А

В

Б

36

зомкнутого в зависимости от стадии роста; ветвящиеся; напоминаю-

щие шестиугольную звезду; пластинкообразные; в виде кусочков би-

того стекла, квадратиков и т.д.

Форма клеток большинства бактерий является устойчивым видо-

вым признаком. Однако существуют бактерии, обладающие морфоло-

гической изменчивостью (плеоморфизмом), в зависимости от условий

имеющие вид палочек, кокков или обнаруживающие слабое ветвле-

ние. У некоторых видов бактерий при прохождении цикла развития

также наблюдается изменение формы клеток.

2.2. Структурная организация бактериальной клетки

Клетка прокариот, несмотря на относительно малые размеры, име-

ет все основные структурные компоненты, необходимые для осущест-

вления обмена веществ (рис. 7).

Рис. 7. Модель бактериальной клетки

Как и всякая другая, прокариотическая клетка имеет цитоплазму,

которая окружена цитоплазматической мембраной. Цитоплазма вме-

сте с цитоплазматической мембраной составляют протопласт, снару-

жи от него расположены поверхностные структуры. К их числу отно-

сятся клеточная стенка, капсулы, чехлы, слизистые слои, жгутики,

ворсинки и т.д.

2.2.1. Клеточная стенка

Клеточная стенка является обязательным структурным элементом

бактериальной клетки, исключение составляют микоплазмы и

L-формы. На долю клеточной стенки приходится от 5 до 50% сухих

веществ клетки.

Жгутик

Вн

у

т

р

иплазматические включения

Клеточная стенка/

внешняя мемб

р

ана

Цитоплазматическая

мембрана

Капсула

Ворсинки

Цитоплазма

Мезосома

Нуклеоид

Рибосомы

37

По строению и химическому составу клеточная стенка прокариот

отличается от таковой эукариотических организмов. Основным ком-

понентом клеточной стенки большинства бактерий является муреин,

относящийся к классу пептидогликанов. Муреин – гетерополимер,

построенный из цепочек, в которых чередуются остатки N-ацетил-

глюкозамина и N-ацетилмурамовой кислоты, соединенные между со-

бой β-1,4-гликозидными связями (рис. 8).

N-ацетилглюкозамин

СH

2

OH

О

ОН

О

O

HNCOCH

3

Остаток молочной кислоты

L-аланин

D-глутаминовая кислота

мезо-диаминопимелиновая

кислота

D-аланин

N-ацетилмурамовая кислота

CH

2

OH

O

O НNCOCH

3



H

3

C – CH – C O



NH



HC – CH

3



C O



NH



HC – COOH



CH

2



CH

2



C O



NH NH

2

 

HC– (CH

2

)

3

– CH – COOH



C O



NH



HC – CH

3



COOH

Рис. 8. Структура субъединицы пептидогликана муреина клеточной стенки

бактерий Escherichia coli (по Г. Шлегелю, 1987)

О

38

Такие неразветвленные гетерополимерные цепи образуют основу

муреина. Остатки N-ацетилмурамовой кислоты через лактильные

группы соединены пептидной связью с аминокислотами. К типичным

аминокислотам, обнаруженным в составе муреина, относятся:

L-аланин, D-глутаминовая кислота, мезо-диаминопимелиновая кисло-

та и D-аланин.

Диаминопимелиновая кислота относится к диаминокислотам и на-

ходится в муреине в мезо-форме:

У некоторых бактерий вместо мезо-диаминопимелиновой кислоты

встречаются L-лизин; либо L- или D-орнитин; либо 2,4-диаминомас-

ляная кислота, либо гомосерин, либо гидроксилизин.

Мезо-диаминопимелиновая кислота, L-лизин или другие диамино-

кислоты играют большую роль в межмолекулярных сшивках, так как

в образовании пептидных связей могут принимать участие обе амино-

группы и, таким образом, связываются две гетерополимерные цепи

муреина между собой (рис. 9).

Рис. 9. Пептидные мостики между гетерополимерными цепочками; Г – N-аце-

тилглюкозамин: М – N-ацетилмурамовая кислота; ала – аланин; глу – глутамино-

вая кислота; ДАП – диаминопимелиновая кислота. Стрелкой обозначена пептид-

ная связь

HOOC COOH

CH CH

2

CH

2

CH

2

HC

H

2

N NH

2

Г М Г М Г

L-ala

D-глу

D-ala

мезо-ДАП

D-ala

D-глу

L-ala

М Г М Г М

39

Благодаря пептидным связям гетерополимерные цепи связаны ме-

жду собой и образуют мешкообразную гигантскую молекулу – му-

реиновый мешок, который выполняет функцию опорного каркаса кле-

точной стенки (рис. 10).

Рис. 10 . Схематическое изображение структуры однослойного

поперечносшитого муреинового мешка

Следует отметить, что особенностью клеточных стенок бактерий

по сравнению с клетками эукариот является наличие в них особых

структурных элементов:

- чередующихся последовательностей N-ацетилглюказамина и

N-ацетилмурамовой кислоты;

- наличие мезо-диаминопимелиновой кислоты; D-форм аланина и

глутаминовой кислоты.

Эти структурные элементы составляют ахиллесову пяту бактерий,

используемую врачами в борьбе с инфекцией. Для борьбы с инфекци-

ей бактериальной этиологии применяют лекарственные препараты,

специфически воздействующие только на клеточные стенки бактерий

или на процесс их синтеза, но не на клетки растений, животных и че-

ловека.

Химический состав и строение клеточной стенки постоянны для

определенного вида бактерий и являются важным диагностическим

признаком, который используется для идентификации бактерий.

В зависимости от строения клеточной стенки бактерии делятся на

две большие группы: грамположительные и грамотрицательные. Су-

ществует метод окраски, позволяющий разделить бактерии на эти две

Лысак В.В. Микробиология

Подождите немного. Документ загружается.