Фаустов А.С. и др. Лизин - одна из важнейших аминокислот в обеспечении полноценного питания
Подождите немного. Документ загружается.
51
Ëèçèí âçàèìîäåéñòâóåò ñ óêñóñíîé êèñëîòîé, è ïîýòîìó åãî
ìîæíî òèòðîâàòü êàê îòíîñèòåëüíî ñèëüíîå îñíîâàíèå:
Lys + 2CH
3
COOH = Lys
2+
+ 2CH
3
COO
-
.
Àöèëîíèåâûå èîíû íåéòðàëèçóþò àöåòàò-èîíû:
CH
3
COO
-
+ CH
3
COOH
2
+
= 2CH
3
COOH,
à ïåðõëîðàò-èîí âçàèìîäåéñòâóåò ñ àìèíîêèñëîòîé.
Ñóììàðíî ïðîöåññ íåéòðàëèçàöèè ëèçèíà âûãëÿäèò
ñëåäóþùèì îáðàçîì:
Lys + 2HClO
4
= Lys
2+
(ClO
4
-
)
2
.
Îïðåäåëåíèå àìèíîêèñëîò ìåòîäîì íåâîäíîãî òèòðîâàíèÿ
Ìåòîä íåâîäíîãî òèòðîâàíèÿ ïðèìåíÿåòñÿ â íåêîòîðûõ
äåéñòâóþùèõ íîðìàòèâíûõ äîêóìåíòàõ (ÂÔÑ è ÃÎÑÒ) íà
àìèíîêèñëîòû: ÂÔÑ 42-592-92. L-ëèçèí ãèäðîõëîðèä;
ÂÔÑ 42-1972-80. DL-ëèçèí ãèäðîõëîðèä; ÂÔÑ 42-1967-90.
Àöåëèçèí; ÃÎÑÒ 5860-75. Àìèíîóñêóñíàÿ êèñëîòà;
ÂÔÑ 42-599. Ãëèöèí.
Ïðèìåíèìîñòü ìåòîäà íåâîäíîãî òèòðîâàíèÿ â êàæäîì
îòåëüíîì ñëó÷àå îïðåäåëÿåòñÿ ðàñòâîðèìîñòüþ àìèíîêèñëîò.
×òîáû ïðèãîòîâèòü 0,1 í. ðàñòâîð àìèíîêèñëîòû â óêñóñíîé
êèñëîòå, êîìïîíåíòû ñìåñè íåîáõîäèìî âñòðÿõèâàòü, èíîãäà â
òå÷åíèå íåñêîëüêèõ ÷àñîâ. Ñêîðîñòü ðàñòâîðåíèÿ ìîæíî
52
óâåëè÷èòü íàãðåâàíèåì. Äëÿ ðàñòâîðåíèÿ àìèíîêèñëîò
èñïîëüçóþò òàêæå ñìåñü ìóðàâüèíîé è óêñóñíîé êèñëîò.
Ïîòåíöèîìåòðè÷åñêè ìîæíî îòòèòðîâàòü ñëåäóþùèå
àìèíîêèñëîòû 0,1 í. õëîðíîé êèñëîòîé â óêñóñíîé êèñëîòå (â
ñêîáêàõ óêàçàíî êîëè÷åñòâî âåùåñòâà â ìã, ýêâèâàëåíòíîå 1 ìë
0,1 í. ðàñòâîðà õëîðíîé êèñëîòû): àñïàðàãèí (13,21),
àíòðàíèëîâóþ êèñëîòó (13,71), n-àìèíîáåíçîéíóþ êèñëîòó
(13,71), ãëèöèí (7,507), D-âàëèí(11,72), èçîëåéöèí (13,12),
L-ïðîëèí (11,51), L-òðèïòîôàí (20,42).
Íåêîòîðûå àìèíîêèñëîòû ñíà÷àëà ðàñòâîðÿþò â 1-2 ìë
ìóðàâüèíîé êèñëîòû, çàòåì ðàçáàâëÿþò 20 ìë óêñóñíîé êèñëîòû
è òèòðóþò êàê îïèñàíî âûøå. Òàê òèòðóþò D-ãëóòàìèíîâóþ
êèñëîòó (14,71), D-àñïàðàãèíîâóþ êèñëîòó (13,31), D-öèñòèí
(24,03), DL-âàëèí (11,72), DL-ôåíèëàëàíèí (16,52).
Àñïàðàãèíîâóþ è ãëóòàìèíîâóþ êèñëîòû, öèñòèí è àëàíèí
(8,909), L-ñåðèí (10,51), L-ëåéöèí (13,12), L-òèðîçèí (18,12)
ðàñòâîðÿþò (ïðèáëèçèòåëüíî 0,8 ìã-ýêâ) ïðè íåáîëüøîì
íàãðåâàíèè â 12 ìë 0,1 í. õëîðíîé êèñëîòû è îáðàòíûì
òèòðîâàíèåì 0,1 í. ãóàíèäèíîì â óêñóñíîé êèñëîòå â
ïðèñóòñòâèè èíäèêàòîðà L-íàôòîëáåíçåíà îïðåäåëÿþò èçáûòîê
ñòàíäàðòíîãî ðàñòâîðà.
Èçâåñòåí åùå îäèí ìåòîä: ê ðàñòâîðó äîáàâëÿþò èçáûòîê
õëîðíîé êèñëîòû è ÷åðåç 30 ìèí îòòèòðîâûâàþò èçáûòîê åå ñ
ïîìîùüþ ñòàíäàðòíîãî ðàñòâîðà àöåòàòà íàòðèÿ èëè
äèôåíèëãóàíèäèíà.
Òàêèì îáðàçîì, ñóùåñòâóåò áîëüøîå ÷èñëî âàðèàöèé ìåòîäà
íåâîäíîãî òèòðîâàíèÿ àìèíîêèñëîò, âûáîð èç êîòîðûõ íå
ÿâëÿåòñÿ ôîðìàëüíûì. Òåîðåòè÷åñêèõ ðàáîò â îòíîøåíèè
íåâîäíîãî òèòðîâàíèÿ ëèçèíà (à òàêæå äðóãèõ îñíîâíûõ
àìèíîêèñëîò - ãèñòèäèíà è àðãèíèíà) íåò. Ýòî îçíà÷àåò, ÷òî
53
a priori òðóäíî ïðåäñêàçûâàòü ôàêòîð ýêâèâàëåíòíîñòè ëèçèíà
â äàííîì ìåòîäå.
Êðîìå òîãî, ìåòîäû íåâîäíîãî òèòðîâàíèÿ ñâÿçàíû ñ
áîëüøèì êîëè÷åñòâîì ïîäãîòîâèòåëüíûõ îïåðàöèé è
ïîâûøåííûì òðåáîâàíèÿì ê ðåàêòèâàì è îáîðóäîâàíèþ,
íåâûïîëíåíèå êîòîðûõ ïðèâîäèò ê ñóùåñòâåííûì îøèáêàì â
îïðåäåëåíèè.
Âîçìîæíûå èñòî÷íèêè îøèáîê ïðè íåâîäíîì òèòðîâàíèè
õëîðíîé êèñëîòîé
 ìåòîäå íåâîäíîãî òèòðîâàíèè ñ èñïîëüçîâàíèåì â êà÷åñòâå
òèòðàíòà ðàñòâîðà õëîðíîé êèñëîòû â óêñóñíîé êèñëîòå
îñíîâíûå îøèáêè ñâÿçàíû ñ íàëè÷èåì â ðåàêòèâàõ
íåæåëàòåëüíûõ ïðèìåñåé.
Ïðèìåíÿåìûå â ìåòîäå ðåàêòèâû äîëæíû áûòü
áåñöâåòíûìè, áåçâîäíûìè è íå äîëæíû ñîäåðæàòü ïðèìåñåé
êèñëîò è îñíîâàíèé.
Òàáëèöà 3. Âëèÿíèå ïðèìåñåé âîäû íà ïåðåõîä îêðàñêè
êðèñòàëëè÷åñêîãî ôèîëåòîâîãî
Ñîäåðæàíèå âîäû, % Ïåðåõîä îêðàñêè
0,1 ×åòêèé ïåðåõîä: ôèîëåòîâûé - çåëåíûé
0,2-0,3 Ïåðåõîä: ôèîëåòîâûé - ñèíèé - ñèíåâàòî-
çåëåíûé - çåëåíûé
Âûøå 0,4 Íå÷åòêèé ïåðåõîä, íî îêðàñêà èçìåíÿåòñÿ,
êàê îïèñàíî âûøå
54
Åñëè â ðåàêòèâàõ ïðèñóòñòâóþò äàæå ñëåäû âîäû, òî ýòî
ñëåäóåò ñ÷èòàòü çàãðÿçíåíèåì.  ñèëüíîêèñëîòíûõ
ðàñòâîðèòåëÿõ âîäà ÿâëÿåòñÿ àêöåïòîðîì ïðîòîíîâ. Â óêñóñíîé
êèñëîòå âîäà äåéñòâóåò êàê îñíîâàíèå è íåéòðàëèçóåò õëîðíóþ
êèñëîòó.
 çàâèñèìîñòè îò ñîäåðæàíèÿ âîäû â óêñóñíîé êèñëîòå
ïåðåõîä îêðàñêè êðèñòàëëè÷åñêîãî ôèîëåòîâîãî ïðîèñõîäèò êàê
óêàçàíî â òàáëèöå 3. Òàêèì îáðàçîì óâåëè÷åíèå ñîäåðæàíèÿ âîäû
â ðåàêòèâàõ ïðèâîäèò ê ðîñòó èíäèêàòîðíîé îøèáêè, ñâÿçàííîé
ñ íå÷åòêèì ïåðåõîäîì îêðàñêè êðèñòàëëè÷åñêîãî ôèîëåòîâîãî.
Ïåðåä òèòðîâàíèåì íåîáõîäèìî ïîòåíöèîìåòðè÷åñêè
ïðîâåðÿòü ïåðåõîä îêðàñêè èíäèêàòîðà â âûáðàííîì
ðàñòâîðèòåëå îòäåëüíî â ïðèñóòñòâèè èññëåäóåìîãî âåùåñòâà è
â ïðèñóòñòâèè ñòàíäàðòíîãî âåùåñòâà, íàïðèìåð
äèôåíèëãóàíèäèíà, ïî êîòîðîìó óñòàíàâëèâàåòñÿ òèòð ðàáî÷åãî
ðàñòâîðà.
Ñëó÷àéíî îáðàçîâàâøèéñÿ àöåòàò ùåëî÷íîãî ìåòàëëà
(íàïðèìåð ïðè õðàíåíèè â ñòåêëÿííîé ïîñóäå) òàêæå îòíîñèòñÿ
ê ÷èñëó íåæåëàòåëüíûõ ïðèìåñåé, òàê êàê àöåòàò-àíèîí â ñðåäå
óêñóñíîé êèñëîòû ÿâëÿåòñÿ îñíîâàíèåì.
Ïðè òèòðîâàíèè äàæå ìèíèìàëüíûå ïðèìåñè óêñóñíîãî
àíãèäðèäà (îí ïðèìåíÿåòñÿ äëÿ îáåçâîæèâàíèÿ ðåàêòèâîâ) ìîãóò
ïðèâåñòè ê îøèáêàì â îïðåäåëåíèè, òàê êàê îíè îáðàçóþò
ñîåäèíåíèÿ íå ñâÿçûâàþùèå õëîðíóþ êèñëîòó. Óêñóñíàÿ êèñëîòà
äîëæíà áûòü îñâîáîæäåíà îò ïðèìåñè óêñóñíîãî àíãèäðèäà (äî
óðîâíÿ åãî ñîäåðæàíèÿ 0,001%), êîòîðûé ìîæåò îáðàçîâûâàòüñÿ
ïðè âûñîêèõ òåìïåðàòóðàõ äàæå â êèñëîòå, ïåðâîíà÷àëüíî
ñâîáîäíîé îò àíãèäðèäà.
55
Êðîìå òîãî, ïðè íåâîäíîì òèòðîâàíèè ñëåäóåò ïðèíèìàòü
ìåðû äëÿ çàùèòû òèòðóåìîãî ðàñòâîðà è òèòðàíòà îò äâóîêèñè
óãëåðîäà, ñîäåðæàùåãîñÿ â âîçäóõå. Äëÿ ýòîãî òèòðîâàíèå
ïðîâîäèòñÿ â àòìîñôåðå èíåðòíîãî ãàçà.
Ìèíèàëüíûå îøèáêè â îïðåäåëåíèè ñ èñïîëüçîâàíèåì
õëîðíîé êèñëîòû ñîñòàâëÿþò 0,2-0,4% ïðè óñòðàíåíèè âñåõ
èñòî÷íèêîâ îøèáîê, óêàçàííûõ âûøå.
Áåçâîäíàÿ õëîðíàÿ êèñëîòà îòëè÷àåòñÿ çíà÷èòåëüíîé
íåóñòîé÷èâîñòüþ è ïðè õðàíåíèè ñàìîïðîèçâîëüíî âçðûâàåòñÿ
(åå ìîæíî õðàíèòü òîëüêî ïðè î÷åíü íèçêèõ òåìïåðàòóðàõ).
Íàèáîëåå óñòîé÷èâà ïðè õðàíåíèè 72,5%-íàÿ õëîðíàÿ êèñëîòà.
Íî ïðèìåíåíèå òàêîé êèñëîòû ïðè òèòðîâàíèè ïðèâîäèò ê
çíà÷èòåëüíûì îøèáêàì, òàê êàê åå íåëüçÿ ïðèíÿòü ïîëíîñòüþ
áåçâîäíîé.
Ðåçóëüòàòû îïðåäåëåíèÿ ñîäåðæàíèÿ îñíîâíîãî âåùåñòâà â
ëèçèíå ãèäðîõëîðèäå è ëèçèíå ìåòîäîì íåâîäíîãî
òèòðîâàíèÿ
Èñïûòàíèÿ ïðîâîäèëèñü â íåçàâèñèìîé õèìèêî-
àíàëèòè÷åñêîé ëàáîðàòîðèè Âîðîíåæñêîãî íàó÷íî-
èññëåäîâàòåëüñêîãî èíñòèòóòà ñèíòåòè÷åñêîãî êàó÷óêà
(ÂÍÈÈÑÊ, ã. Âîðîíåæ). Ýòà ëàáîðàòîðèÿ èìååò íåîáõîäèìîå
îáîðóäîâàíèå äëÿ ïðîâåäåíèÿ òèòðîâàíèÿ â íåâîäíûõ ñðåäàõ è
ñåðòèôèöèðîâàíà îðãàíàìè Ãîññòàíäàðòà ÐÔ.
Ñîäåðæàíèÿ ëèçèíà îïðåäåëÿëîñü ïî ìåòîäèêå îáðàòíîãî
òèòðîâàíèÿ, ñîãëàñíî ÂÔÑ 42-1970-80. Ïàðàëëåëüíî â êàæäîé
ïðîáå îïðåäåëÿëè ñîäåðæàíèå âîäû âûñóøèâàíèåì â ñóøèëüíîì
øêàôó (ïî ÃÎÑÒ 14871-77. Ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ âîäû).
56
Ðåçóëüòàòû èñïûòàíèé è èõ ñòàòèñòè÷åñêàÿ îáðàáîòêà
ïðåäñòàâëåíû â òàáë. 4. Èç äàííûõ òàáëèöû âèäíî, ÷òî øèðèíà
äîâåðèòåëüíîãî èíòåðâàëà êîëåáëåòñÿ îò äåñÿòûõ äîëåé
ïðîöåíòà (ïðîáà 5) äî 13-14% (ïðîáû ¹ 4 è 7). Ýòî ìîæåò
îçíà÷àòü ñèëüíóþ çàâèñèìîñòü âîñïðîèçâîäèìîñòè ìåòîäèêè
íåâîäíîãî òèòðîâàíèÿ êàê îò õèìè÷åñêîé ïðèðîäû èñïûòóåìîãî
ïðåïàðàòà, òàê è îò òåõíèêè ïðîâåäåíèÿ èññëåäîâàíèÿ
(ïîäãîòîâêà îòäåëüíîé ïðîáû, ïîäãîòîâèòåëüíûå îïåðàöèè,
î÷åðåäíîñòü àíàëèçà è ò.ä.).
Òàáëèöà 4. Ðåçóëüòàòû êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ
ëèçèíà ìåòîäîì íåâîäíîãî òèòðîâàíèÿ è èõ ñòàòèñòè÷åñêàÿ
îáðàáîòêà
¹ Ïðåïàðàò Ïðîèçâîäèòåëü Âëàãîñîäå Ñðåäíåå ñîäåðæàíèå
ïðîáû ðæàíèå, % ëèçèíà è
äîâåðèòåëüíûé
èíòåðâàë (ð=0,05), %
1 LysHCl Ýëàì-Ñïåêòð 2,7 91,2±5,0
2 LysHCl Ýëàì-Ñïåêòð 1,2 89,6±4,0
3 LysHCl Merck 0,03 93,8±1,7
4 Lys Merck 6,0 81,5±6,6
5 Lys Ýëàì-Ñïåêòð 3,7* 88,6±0,6
6 Lys Ýëàì-Ñïåêòð 5,2* 88,3±3,1
7 Lys Ýëàì-Ñïåêòð 6,8* 85,0±6,6
*Âëàãîñîäåðæàíèå îïðåäåëÿëîñü â ëàáîðàòîðèè ÎÎÎ ÍÏÏ Ýëàì-Ñïåêòð
(ã. Âîðîíåæ) âûñóøèâàíèåì â âàêóóìíîì ñóøèëüíîì øêàôó ïðè 90
0
Ñ â
òå÷åíèå 4 ÷àñîâ.
57
Âëàãîñîäåðæàíèå â ÿâíîì âèäå íå âëèÿåò íà
âîñïðîèçâîäèìîñòü ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà. Ýòî ñâÿçàíî, ïî-
âèäèìîìó, ñ òåì, ÷òî ñîäåðæàíèå âîäû â îáðàçöàõ ñëèøêîì
âåëèêî äëÿ íåâîäíîãî òèòðîâàíèÿ. Êðîìå òîãî, ýòî ïîêàçûâàåò,
÷òî íàëè÷èå áîëüøîãî êîëè÷åñòâà âîäû ÿâëÿåòñÿ íå
åäèíñòâåííîé ïðè÷èíîé íåâîñïðîèçâîäèìîñòè ðåçóëüòàòîâ
íåâîäíîãî òèòðîâàíèÿ ëèçèíà õëîðíîé êèñëîòîé, à ìîæåò áûòü,
è íå ñàìîé ñóùåñòâåííîé.
Ñòàòèñòè÷åñêè çíà÷èìûì îêàçàëîñü ðàçëè÷èå â ñîäåðæàíèè
ëèçèíà ìåæäó ïðîáàìè 4 è 1, à òàêæå ìåæäó ïðîáàìè 4 è 3. Ïðîáà
4 îòâå÷àåò Lys (ëèçèíó ìîíîãèäðàòó), ïðîèçâîäñòâà Merck, ïðîáà
1 ïðåäñòàâëÿåò ëèçèí ãèäðîõëîðèä ïðîèçâîäñòâà Ýëàì-Ñïåêòð,
à ïðîáà 3 - ëèçèí ãèäðîõëîðèä ôèðìû Merck. Îñòàëüíûå ïàðíûå
ìíîæåñòâåííûå ñðàâíåíèÿ íå äàþò ñòàòèñòè÷åñêè çíà÷èìûõ
ðàñõîæäåíèé â ñîäåðæàíèè ëèçèíà â ïðîáàõ èç-çà áîëüøèõ
çíà÷åíèé äîâåðèòåëüíûõ èíòåðâàëîâ.
 çàêëþ÷åíèè äàííîãî ðàçäåëà ìîæíî ñäåëàòü ñëåäóþùèé
âûâîä: ïðè ïðèìåíåíèè ìåòîäà íåâîäíîãî òèòðîâàíèÿ âîçíèêàþò
ñóùåñòâåííûå îøèáêè, êîòîðûå ñâÿçàíû ñî ìíîãèìè ïðè÷èíàìè
(íàëè÷èå âîäû â ïðåïàðàòàõ, âîçìîæíûå çàãðÿçíåíèÿ ðåàêòèâîâ
è õèìèêàòîâ, òåõíè÷åñêèå îøèáêè íà ðàçëè÷íûõ ñòàäèÿõ
àíàëèçà, îòñóòñòâèå îïûòà ïðè ðàáîòå ñ àìèíîêèñëîòàìè, â
÷àñòíîñòè, ëèçèíîì ó ñïåöèàëèñòîâ ïî íåâîäíîìó òèòðîâàíèþ,
íåñîâåðøåíñòâî ìåòîäèêè îïðåäåëåíèÿ èìåííî ëèçèíà è ò.ä.).
Âñå ýòî íå äàåò âîçìîæíîñòè ðåêîìåíäîâàòü ìåòîä
íåâîäíîãî òèòðîâàíèÿ â êà÷åñòâå îñíîâíîé ìåòîäèêè âûõîäíîãî
êîíòðîëÿ êà÷åñòâà ëèçèíà è ëèçèíà ãèäðîõëîðèäà.
 êà÷åñòâå âîçìîæíûõ ïóòåé ðåøåíèÿ ïðîáëåìû ìîæíî
ïðåäëîæèòü ñëåäóþùåå:
58
1. îïòèìèçàöèþ ìåòîäèêè îïðåäåëåíèÿ ñîäåðæàíèÿ ëèçèíà
ìåòîäîì íåâîäíîãî òèòðîâàíèÿ íà êîíêðåòíîì ïðîèçâîäñòâå ñ
öåëüþ ñíèæåíèÿ îøèáêè îïðåäåëåíèÿ;
2. ïîèñê àëüòåðíàòèâíûõ ìåòîäîâ îïðåäåëåíèÿ ñîäåðæàíèÿ
ëèçèíà.
Ïåðâûé ïóòü íå ãàðàíòèðóåò äîñòèæåíèÿ ðåçóëüòàòîâ è
ñâÿçàí ñ áîëüøèìè ôèíàíñîâûìè (ñîîòâåòñòâóþùåå
îáîðóäîâàíèå ëàáîðàòîðèè, óñòàíîâêè, ðåàêòèâû, ìåòîäèêè
î÷èñòêè ðåàãåíòîâ, ñïîñîáû õðàíåíèÿ, ïîèñê ñïåöèàëèñòîâ äëÿ
îáó÷åíèÿ ïåðñîíàëà è ò.ä.) è âðåìåííûìè çàòðàòàìè (ðàçðàáîòêà
ìåòîäèêè, ïðèîáðåòåíèå íàâûêîâ).
 êà÷åñòâå àëüòåðíàòèâíîé ìåòîäèêè ìîæíî èñïîëüçîâàòü
ïðÿìîå êèñëîòíî-îñíîâíîå òèòðîâàíèå ëèçèíà â âîäíîé ñðåäå
ñîëÿíîé êèñëîòîé ñ îïðåäåëåíèåì êîíå÷íîé òî÷êè òèòðîâàíèÿ
ïîòåíöèîìåòðè÷åñêè èëè êîíäóêòîìåòðè÷åñêè.
Äëÿ òàêîé çàìåíû ìåòîäèê íóæíî ïîêàçàòü, ÷òî ìåòîä
ïðÿìîãî êèñëîòíî-îñíîâíîãî òèòðîâàíèÿ ëèçèíà â âîäíîì
ðàñòâîðå, ïî êðàéíåé ìåðå, íå óñòóïàåò ìåòîäó íåâîäíîãî
òèòðîâàíèÿ â òî÷íîñòè. Òîãäà ïîäîáíàÿ çàìåíà ñòàíåò
ýêîíîìè÷åñêè öåëåñîîáðàçíà.
3.2. Ïîòåíöèîìåòðè÷åñêîå òèòðîâàíèå ëèçèíà ñîëÿíîé
êèñëîòîé â âîäíîì ðàñòâîðå
Àìèíîêèñëîòû, îáëàäàþùèå âûðàæåííûìè êèñëûìè
(àñïàðàãèíîâàÿ è ãëóòàìèíîâàÿ êèñëîòû) èëè îñíîâíûìè
59
ñâîéñòâàìè (àðãèíèí, ëèçèí), âîçìîæíî îïðåäåëÿòü â âîäíîì
ðàñòâîðå ìåòîäàìè êèñëîòíî-îñíîâíîãî òèòðîâàíèÿ ñ
èíäèêàöèåé òî÷êè ýêâèâàëåíòíîñòè ïî ïîäõîäÿùåìó èíäèêàòîðó
èëè èíñòðóìåíòàëüíî.
Òàê, â êíèãå ïðîô. Ì.Ò. Àëþøèíà [6], ïðèâîäÿòñÿ ïðîïèñè
äëÿ êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ íåêîòîðûõ àìèíîêèñëîò â
àïòåêàõ, óòâåðæäåííûå Ìèíçäðàâîì.
Àìèíîêàïðîíîâàÿ êèñëîòà â âîäíîì ðàñòâîðå
êîëè÷åñòâåííî îïðåäåëÿåòñÿ òèòðîâàíèåì ãèäðîêñèäîì íàòðèÿ
ñ äîáàâëåíèåì ôîðìîëüíîé ñìåñè (ìåòîä Ñåðåíñåíà) è
èíäèêàòîðîì ôåíîëôòàëåèíîì (Ïðîïèñü 14).
Ãëóòàìèíîâóþ êèñëîòó îïðåäåëÿþò ïðÿìûì êèñëîòíî-
îñíîâíûì òèòðîâàíèåì ãèäðîêñèäîì íàòðèÿ ñ èíäèêàòîðîì
áðîìòèìîëîâûì ñèíèì (Ïðîïèñü 50).
Òàêèì îáðàçîì, îáîáùàÿ ëèòåðàòóðíûå äàííûå, ìîæíî
çàêëþ÷èòü, ÷òî îïðåäåëåíèå ëèçèíà â âîäíîì ðàñòâîðå ïðÿìûì
òèòðîâàíèåì ñèëüíîé êèñëîòîé âîçìîæíî, åñëè ó÷åñòü âñå
íåîáõîäèìûå ïðåäîñòîðîæíîñòè äëÿ ñëó÷àÿ òèòðîâàíèÿ ñëàáîãî
îñíîâàíèÿ ñèëüíîé êèñëîòîé
Òåîðåòè÷åñêèå îñíîâû ìåòîäà
Ìåòîä òèòðîâàíèÿ ëèçèíà ñîëÿíîé êèñëîòîé â âîäíîì
ðàñòâîðå îñíîâàí íà êèñëîòíî-îñíîâíîì âçàèìîäåéñòâèè ìåæäó
ñèëüíîé êèñëîòîé (HCl) è ñëàáûì îñíîâàíèåì (ëèçèí). Â ýòîì
ñëó÷àå ëèçèí òèòðóåòñÿ äî ïåðåõîäà åãî â îäíîçàðÿäíîå
ñîñòîÿíèå ñ îáðàçîâàíèåì â ðàñòâîðå ñîëè ëèçèíà õëîðèäà. Òàê
êàê ýòà ñîëü îáðàçîâàíà êàòèîíîì ñëàáîãî îñíîâàíèÿ è àíèîíîì
ñèëüíîé êèñëîòû, îíà ïîäâåðæåíà ãèäðîëèçó, è òî÷êà
60
ýêâèâàëåíòíîñòè ñäâèíóòà â êèñëóþ îáëàñòü îòíîñèòåëüíî
íåéòðàëüíîé ñðåäû.
Ïîòåíöèîìåòðèÿ ñî ñòåêëÿííûì ðàáî÷èì ýëåêòðîäîì
èñïîëüçóåòñÿ â äàííîì ìåòîäå äëÿ èäåíòèôèêàöèè êîíå÷íîé
òî÷êè òèòðîâàíèÿ. Ïîòåíöèîìåòðèÿ îáëàäàåò âûñîêîé
÷óâñòâèòåëüíîñòüþ, òàê êàê èìååòñÿ âîçìîæíîñòü îïðåäåëåíèÿ
âåëè÷èíû ðÍ â êîíå÷íîé òî÷êå òèòðîâàíèÿ ñ òî÷íîñòüþ äî 0,1
ðÍ. Êðîìå òîãî, ðåçóëüòàòîì ïîòåíöèîìåòðè÷åñêîãî òèòðîâàíèÿ
ÿâëÿåòñÿ íå òîëüêî êîíå÷íàÿ òî÷êà (êàê, íàïðèìåð, ïðè
êîëîðèìåòðè÷åñêîé èíäèêàöèè êîíå÷íîé òî÷êè òèòðîâàíèÿ), à
âñÿ êðèâàÿ òèòðîâàíèÿ. Ýòî äàåò âîçìîæíîñòü îöåíêè
ñîîòâåòñòâèÿ ýêñïåðèìåíòàëüíîé êðèâîé òèòðîâàíèÿ ñ
òåîðåòè÷åñêîé.
Ýêñïåðèìåíòàëüíàÿ êðèâàÿ òèòðîâàíèÿ âîäíîãî ëèçèíà
êîíöåíòðàöèè ïðèìåðíî 0,1 Ì ðàñòâîðîì ñîëÿíîé êèñëîòû (0,1
Ì) ïîêàçàíà íà ðèñ.2. Äëÿ êîíòðîëÿ ïðîöåññà
ïîòåíöèîìåòðè÷åñêîãî òèòðîâàíèÿ ðåãèñòðèðîâàëèñü òî÷êè
ïåðåõîäà îêðàñêè èíäèêàòîðîâ êèñëîòíî-îñíîâíîãî òèòðîâàíèÿ
- ôåíîëôòàëåèíà (ðÍ 8,05) è ìåòèëîðàíæà (ðÍ 4,4). Òî÷êà
ýêâèâàëåíòíîñòè, ðàññ÷èòàííàÿ äëÿ äàííîãî ñëó÷àÿ, ñîñòàâëÿåò
ðÍ 4,7.
×óâñòâèòåëüíîñòü ëþáîãî ìåòîäà òèòðîâàíèÿ ìîæåò áûòü
îöåíåíà ñ èñïîëüçîâàíèåì ïîíÿòèÿ êðóòèçíû êðèâîé òèòðîâàíèÿ,
êîòîðóþ ðàññ÷èòûâàåì ïî ôîðìóëå
∆pH
η=
∆F
ãäå F - ñòåïåíü îòòèòðîâàííîñòè [2].