Автор - доц. Тимошенко В.Ф (Кафедра фізіології та біохімії рослин
Харківського національного університету імені В.Н. Каразіна), 2011.
- 138 с.
О г л а в л е н и е.
Введение.
Клеточная инженерия.
Культура изолированных протопластов и конструирование растительной клетки.
Слияние субпротопластов.
Модификация клеток при поглощении протопластами изолированных клеточных органелл.
Генетическая изменчивость растительных клеток в связи с манипуляциями in vitro.
Селекция мутантов.
Сохранение вариантных клеточных линий.
Селекция продуктов гибридизации.
Методы анализа гибридов.
Судьба родительских геномов после гибридизации.
Межсемейственные гибриды клеток высших растений.
Использование соматической гибридизации близкородственных видов.
Искусственные ассоциации с микроорганизмами.
Трансформация растений с использованием векторов.
Векторы генной инженерии растений.
Плазмиды агробактерий как векторы для трансформации.
Препаративное выделение плазмид из Е. coli в больших объемах.
Введение чужеродных генов в хлоропластную ДНК.
Обработка ДНК ферментами рестрикции и лигирование.
Введение рекомбинантных плазмид в бактериальные клетки.
Основные методы трансформации растительных клеток с помощью агробактериальных векторов.
Трансформация с помощью онкогенных штаммов дикого типа A. tumefaciens и A. rhizogenes.
Трансформация больших гетерогенных эксплантатов с помощью неонкогенных Ti-плазмидных векторов.
Прямая регенерация трансформированных растений: трансформация листовых дисков табака.
Поддержание и размножение трансформированных побегов.
Регенерация трансформированных растений через стадию каллуса: трансформация эксплантатов проростков льна.
Получение стерильных проростков льна и регенерация из эксплантатов побегов льна.
Трансформация гипокотилей, регенерация из трансформированного каллуса, селекция, размножение и укоренение трансформированных побегов.
Выделение мезофильных протопластов табака.
Трансформация протопластов путем совместного культивирования с агробактериями.
Трансформация растительных протопластов изолированной векторной ДНК.
Трансфекция протопластов с помощью полиэтиленгликоля.
Трансформация растительных клеток путем микроинъекций.
Трансформация протопластов с помощью электропорации.
Бомбардировка микрочастицами.
Доказательство трансгенности растений.
Описание эксперимента.
Анализ хромосомной ДНК методом дот-гибридизации.
Анализ растительной ДНК по Саузерну.
Достижения генной инженерии в решении практических вопросов.
Выведение растений устойчивых к насекомым – вредителям.
Устойчивость к вирусам.
Растения устойчивые к грибам и бактериям.
Растения устойчивые к неблагоприятным климатическим условиям среды.
Созревание плодов.
Изменение пищевой ценности растений.
Растения как биореакторы.
Изменение окраски цветов.
Изменение внешнего вида плодов.
Растения устойчивые к гербицидам.
Предметный указатель.
Литература.
Введение.
Клеточная инженерия.
Культура изолированных протопластов и конструирование растительной клетки.
Слияние субпротопластов.
Модификация клеток при поглощении протопластами изолированных клеточных органелл.
Генетическая изменчивость растительных клеток в связи с манипуляциями in vitro.
Селекция мутантов.
Сохранение вариантных клеточных линий.
Селекция продуктов гибридизации.
Методы анализа гибридов.
Судьба родительских геномов после гибридизации.
Межсемейственные гибриды клеток высших растений.
Использование соматической гибридизации близкородственных видов.
Искусственные ассоциации с микроорганизмами.
Трансформация растений с использованием векторов.
Векторы генной инженерии растений.
Плазмиды агробактерий как векторы для трансформации.
Препаративное выделение плазмид из Е. coli в больших объемах.
Введение чужеродных генов в хлоропластную ДНК.
Обработка ДНК ферментами рестрикции и лигирование.
Введение рекомбинантных плазмид в бактериальные клетки.
Основные методы трансформации растительных клеток с помощью агробактериальных векторов.
Трансформация с помощью онкогенных штаммов дикого типа A. tumefaciens и A. rhizogenes.
Трансформация больших гетерогенных эксплантатов с помощью неонкогенных Ti-плазмидных векторов.
Прямая регенерация трансформированных растений: трансформация листовых дисков табака.
Поддержание и размножение трансформированных побегов.
Регенерация трансформированных растений через стадию каллуса: трансформация эксплантатов проростков льна.
Получение стерильных проростков льна и регенерация из эксплантатов побегов льна.
Трансформация гипокотилей, регенерация из трансформированного каллуса, селекция, размножение и укоренение трансформированных побегов.
Выделение мезофильных протопластов табака.
Трансформация протопластов путем совместного культивирования с агробактериями.
Трансформация растительных протопластов изолированной векторной ДНК.
Трансфекция протопластов с помощью полиэтиленгликоля.
Трансформация растительных клеток путем микроинъекций.
Трансформация протопластов с помощью электропорации.
Бомбардировка микрочастицами.
Доказательство трансгенности растений.
Описание эксперимента.
Анализ хромосомной ДНК методом дот-гибридизации.
Анализ растительной ДНК по Саузерну.
Достижения генной инженерии в решении практических вопросов.
Выведение растений устойчивых к насекомым – вредителям.
Устойчивость к вирусам.
Растения устойчивые к грибам и бактериям.
Растения устойчивые к неблагоприятным климатическим условиям среды.
Созревание плодов.
Изменение пищевой ценности растений.
Растения как биореакторы.
Изменение окраски цветов.
Изменение внешнего вида плодов.
Растения устойчивые к гербицидам.
Предметный указатель.
Литература.