Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских
наук. Специальность: 14.03.06 – фармакология, клиническая
фармакология. Первый МГМУ им. И.М. Сеченова. Москва. 2014. — 410 с.
Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор Ю. Н.
Чернов.
Цель исследования. Экспериментальное доклиническое
изучение различных видов фар- макологической активности и
обоснование возможности разработки лекарственных препаратов,
содержащих соли гуминовых кислот, получаемые промышленным путем из
различных сырьевых источников (лигногумата, сапропелевого гумата и
гумата леонардита).
Научная новизна исследования. Соли гуминовых кислот (лигногумат, гумат леонардита и сапропелевый гумат) являются умеренно токсичными (3 класс токсичности и опасности в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76 и по классификации И.В. Березовской, 2003, 2010), не кумулируют, обладают значительной широтой те- рапевтического действия (индекс широты терапевтического действия 45), не обладают органотропной токсичностью; при нанесении на кожные покровы и слизистые оболочки оказывают слабое раздражающее действие (1 класс раздражающего действия); не проявляют эмбриотоксических и тератогенных эффектов в эксперименте.
Практическая значимость и реализация результатов исследований. Для повышения точности и облегчения планиметрических измерений впервые предложена «Палетка для планиметрических измерений объектов в биологии и медицине» (Патент RU №114147). Палетка используется для измерения размеров и площади ран и ожогов в хирургических отделениях лечебных учреждений г. Воронежа (БУ ВО «Воронежская городская клиническая больница №3»; БУЗ ВО «Воронежская городская клиническая больница скорой медицинской помощи №1», при проведении научных исследований в НИИ экспериментальной биологии и медицины при ГБОУ ВПО «ВГМА им. Н.Н. Бурденко» Минздрава России, имеются Акты внедрения. Впервые для проведения доклинических исследований предложен простой, низкозатратный и имеющий высокий уровень воспроизводимости «Способ выявления психотропной активности лекарственных и нелекарственных веществ» (Патент RU №2506649), способ используется при проведении научных исследований в НИИ экспериментальной биологии и медицины при ГБОУ ВПО «ВГМА им. Н.Н. Бурденко» Минздрава России, что подтверждается Актом внедрения. Оглавление.
Список сокращений и условных обозначений.
Введение. Обзор литературы.
Исторические этапы изучения гуминовых веществ.
Определение, классификация и физико-химические свойства гуминовых веществ.
Образование гуминовых веществ в природе и промышленные способы получения.
Биологические свойства и экосистемные функции гуминовых веществ.
Перспективы использования солей гуминовых кислот для разработки лекарственных препаратов.
Заключение обзора литературы. Материалы и методы исследования.
Объекты исследования – изучаемые фармакологические вещества (соли гуминовых кислот).
Сведения о препаратах сравнения, препараты и реактивы, использованные в экспериментальных доклинических исследованиях.
Описание используемой в исследовании тест-системы.
Этические и правовые нормы доклинического исследования.
Патологоанатомические и гистологические методы исследования.
Методы токсикологических исследований.
Методы изучения острой токсичности.
Изучение кумулятивных свойств.
Методы изучения хронической токсичности.
Оценка аллергизирующих и местнораздражающих свойств.
Методы изучения эмбриотоксического и тератогенного действия.
Модели и методы изучения специфической активности.
Модели для изучения дезинтоксикационных и гепатопротекторных свойств.
Гексеналовый сон.
Мединаловый сон.
Интоксикация клозапином.
Интоксикация окисленной олеиновой кислотой.
Острая интоксикация мезоксалилмочевиной.
Токсический гепатит, вызываемый четыреххлористым углеродом.
Модели для изучения гипогликемической и антидиабетической активности.
Тест толерантности к глюкозе.
Аллоксановый сахарный диабет.
Стрептозоциновый сахарный диабет.
Модели для изучения противовоспалительных, анальгетических и регенераторных свойств.
Тест уксусные корчи.
Электрокожное болевое раздражение.
Отек лапы крыс.
Асептический формалиновый абсцесс.
Термический ожог кожных покровов.
Модели оценки адаптогенной, актопротекторной и поведенческой активности.
Тест «принудительное плавание».
Нормобарическая гиперкапническая гипоксия.
Острый иммобилизационный стресс.
Тест «открытое поле».
Модель эвристических решений для оценки психотропной активности.
Методы выявления ульцерогенного действия и модель для оценки гастропротекторных свойств.
Выявление наличия ульцерогенного действия.
НПВС-гастропатия.
Модели клеточного уровня для изучения мембранопротекторных свойств.
Методы биотестирования на инфузориях Paramecium caudatum.
Метод регистрации эритрограмм кислотного и гипоосмотического гемолиза.
Методы лабораторных исследований.
Математические методы обработки данных. Токсикологические исследования препаратов солей гуминовых кислот.
Физико-химические свойства солей гуминовых кислот.
Изучение острой токсичности солей гуминовых кислот.
Острая токсичность солей гуминовых кислот при однократном внутрижелудочном введении.
Острая токсичность солей гуминовых кислот при парентеральном введении.
Определение наличия кумулятивного действия солей гуминовых кислот.
Изучение хронической токсичности солей гуминовых кислот.
Изучение местно-раздражающего и аллергизирующего действия солей гуминовых кислот.
Конъюнктивальная проба.
Метод накожных аппликаций.
Изучение эмбриотоксического и тератогенного действия солей гуминовых кислот. Изучение дезинтоксикационных и гепатопротекторных свойств солей гуминовых кислот.
Скрининг дезинтоксикационной и гепатопротекторной активности в тесте гексеналовый сон.
Изучение дезинтоксикационных свойств в тесте мединаловый сон.
Изучение дезинтоксикационных свойств при острой интоксикации клозапином.
Изучение дезинтоксикационных свойств при интоксикации окисленной олеиновой кислотой.
Изучение дезинтоксикационных свойств при острой интоксикация мезоксалилмочевиной.
Изучение дезинтоксикационных и гепатопротекторных свойств при токсическом гепатите, вызываемом четыреххлористым углеродом. Изучение гипогликемической и антидиабетической активности солей гуминовых кислот.
Скрининг гипогликемической активности на модели глюкозо-толерантного теста на здоровых животных.
Изучение гипогликемической активности лигногумата на здоровых животных.
Изучение антидиабетических свойств на модели аллоксанового сахарного диабета.
Изучение антидиабетических свойств на модели стрептозоцинового сахарного диабета. Изучение противовоспалительных, анальгетических и регенераторных свойств солей гуминовых кислот.
Скрининг анальгетической активности в тесте уксусные корчи.
Изучение анальгетических свойств на модели электрокожного болевого раздражения Изучение противовоспалительных свойств на модели отека лапы крыс.
Выявление наличия ульцерогенного действия солей гуминовых кислот.
Изучение регенераторных и противовоспалительных свойств гумата леонардита на модели термического ожога кожных покровов. Изучение адаптогенной и актопротекторной активности солей гуминовых кислот.
Скрининг адаптогенной и актопротекторной активности в тесте «принудительное плавание».
Изучение адаптогенной и актопротекторной активности лигногумата в тесте «принудительное плавание».
Изучение антигипоксантных свойств лигногумата на модели нормобарической гиперкапнической гипоксии.
Изучение адаптогенных свойств лигногумата на модели острого иммобилизационного стресса. Изучение гастропротекторных свойств солей гуминовых кислот.
Изучение гастропротекторных свойств на модели НПВС-гастропатии. Изучение мембранопротекторных свойств солей гуминовых кислот на клеточном уровне.
Скрининг биологической активности солей гуминовых кислот на тест-системе инфузорий Paramecium caudatum.
Изучение мембранопротекторных свойств солей гуминовых кислот на тест-системе мембран эритроцитов.
Обсуждение результатов исследований. Выводы.
Практические предложения.
Список литературы.
Научная новизна исследования. Соли гуминовых кислот (лигногумат, гумат леонардита и сапропелевый гумат) являются умеренно токсичными (3 класс токсичности и опасности в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76 и по классификации И.В. Березовской, 2003, 2010), не кумулируют, обладают значительной широтой те- рапевтического действия (индекс широты терапевтического действия 45), не обладают органотропной токсичностью; при нанесении на кожные покровы и слизистые оболочки оказывают слабое раздражающее действие (1 класс раздражающего действия); не проявляют эмбриотоксических и тератогенных эффектов в эксперименте.
Практическая значимость и реализация результатов исследований. Для повышения точности и облегчения планиметрических измерений впервые предложена «Палетка для планиметрических измерений объектов в биологии и медицине» (Патент RU №114147). Палетка используется для измерения размеров и площади ран и ожогов в хирургических отделениях лечебных учреждений г. Воронежа (БУ ВО «Воронежская городская клиническая больница №3»; БУЗ ВО «Воронежская городская клиническая больница скорой медицинской помощи №1», при проведении научных исследований в НИИ экспериментальной биологии и медицины при ГБОУ ВПО «ВГМА им. Н.Н. Бурденко» Минздрава России, имеются Акты внедрения. Впервые для проведения доклинических исследований предложен простой, низкозатратный и имеющий высокий уровень воспроизводимости «Способ выявления психотропной активности лекарственных и нелекарственных веществ» (Патент RU №2506649), способ используется при проведении научных исследований в НИИ экспериментальной биологии и медицины при ГБОУ ВПО «ВГМА им. Н.Н. Бурденко» Минздрава России, что подтверждается Актом внедрения. Оглавление.
Список сокращений и условных обозначений.
Введение. Обзор литературы.
Исторические этапы изучения гуминовых веществ.
Определение, классификация и физико-химические свойства гуминовых веществ.
Образование гуминовых веществ в природе и промышленные способы получения.
Биологические свойства и экосистемные функции гуминовых веществ.
Перспективы использования солей гуминовых кислот для разработки лекарственных препаратов.
Заключение обзора литературы. Материалы и методы исследования.
Объекты исследования – изучаемые фармакологические вещества (соли гуминовых кислот).
Сведения о препаратах сравнения, препараты и реактивы, использованные в экспериментальных доклинических исследованиях.
Описание используемой в исследовании тест-системы.
Этические и правовые нормы доклинического исследования.
Патологоанатомические и гистологические методы исследования.
Методы токсикологических исследований.
Методы изучения острой токсичности.
Изучение кумулятивных свойств.
Методы изучения хронической токсичности.
Оценка аллергизирующих и местнораздражающих свойств.
Методы изучения эмбриотоксического и тератогенного действия.
Модели и методы изучения специфической активности.
Модели для изучения дезинтоксикационных и гепатопротекторных свойств.
Гексеналовый сон.
Мединаловый сон.
Интоксикация клозапином.
Интоксикация окисленной олеиновой кислотой.
Острая интоксикация мезоксалилмочевиной.
Токсический гепатит, вызываемый четыреххлористым углеродом.
Модели для изучения гипогликемической и антидиабетической активности.
Тест толерантности к глюкозе.
Аллоксановый сахарный диабет.
Стрептозоциновый сахарный диабет.
Модели для изучения противовоспалительных, анальгетических и регенераторных свойств.
Тест уксусные корчи.
Электрокожное болевое раздражение.
Отек лапы крыс.
Асептический формалиновый абсцесс.
Термический ожог кожных покровов.
Модели оценки адаптогенной, актопротекторной и поведенческой активности.
Тест «принудительное плавание».
Нормобарическая гиперкапническая гипоксия.
Острый иммобилизационный стресс.
Тест «открытое поле».
Модель эвристических решений для оценки психотропной активности.
Методы выявления ульцерогенного действия и модель для оценки гастропротекторных свойств.
Выявление наличия ульцерогенного действия.
НПВС-гастропатия.
Модели клеточного уровня для изучения мембранопротекторных свойств.
Методы биотестирования на инфузориях Paramecium caudatum.
Метод регистрации эритрограмм кислотного и гипоосмотического гемолиза.
Методы лабораторных исследований.
Математические методы обработки данных. Токсикологические исследования препаратов солей гуминовых кислот.
Физико-химические свойства солей гуминовых кислот.
Изучение острой токсичности солей гуминовых кислот.
Острая токсичность солей гуминовых кислот при однократном внутрижелудочном введении.
Острая токсичность солей гуминовых кислот при парентеральном введении.
Определение наличия кумулятивного действия солей гуминовых кислот.
Изучение хронической токсичности солей гуминовых кислот.
Изучение местно-раздражающего и аллергизирующего действия солей гуминовых кислот.
Конъюнктивальная проба.
Метод накожных аппликаций.
Изучение эмбриотоксического и тератогенного действия солей гуминовых кислот. Изучение дезинтоксикационных и гепатопротекторных свойств солей гуминовых кислот.
Скрининг дезинтоксикационной и гепатопротекторной активности в тесте гексеналовый сон.
Изучение дезинтоксикационных свойств в тесте мединаловый сон.
Изучение дезинтоксикационных свойств при острой интоксикации клозапином.
Изучение дезинтоксикационных свойств при интоксикации окисленной олеиновой кислотой.
Изучение дезинтоксикационных свойств при острой интоксикация мезоксалилмочевиной.
Изучение дезинтоксикационных и гепатопротекторных свойств при токсическом гепатите, вызываемом четыреххлористым углеродом. Изучение гипогликемической и антидиабетической активности солей гуминовых кислот.
Скрининг гипогликемической активности на модели глюкозо-толерантного теста на здоровых животных.
Изучение гипогликемической активности лигногумата на здоровых животных.
Изучение антидиабетических свойств на модели аллоксанового сахарного диабета.
Изучение антидиабетических свойств на модели стрептозоцинового сахарного диабета. Изучение противовоспалительных, анальгетических и регенераторных свойств солей гуминовых кислот.
Скрининг анальгетической активности в тесте уксусные корчи.
Изучение анальгетических свойств на модели электрокожного болевого раздражения Изучение противовоспалительных свойств на модели отека лапы крыс.
Выявление наличия ульцерогенного действия солей гуминовых кислот.
Изучение регенераторных и противовоспалительных свойств гумата леонардита на модели термического ожога кожных покровов. Изучение адаптогенной и актопротекторной активности солей гуминовых кислот.
Скрининг адаптогенной и актопротекторной активности в тесте «принудительное плавание».
Изучение адаптогенной и актопротекторной активности лигногумата в тесте «принудительное плавание».
Изучение антигипоксантных свойств лигногумата на модели нормобарической гиперкапнической гипоксии.
Изучение адаптогенных свойств лигногумата на модели острого иммобилизационного стресса. Изучение гастропротекторных свойств солей гуминовых кислот.
Изучение гастропротекторных свойств на модели НПВС-гастропатии. Изучение мембранопротекторных свойств солей гуминовых кислот на клеточном уровне.
Скрининг биологической активности солей гуминовых кислот на тест-системе инфузорий Paramecium caudatum.
Изучение мембранопротекторных свойств солей гуминовых кислот на тест-системе мембран эритроцитов.
Обсуждение результатов исследований. Выводы.
Практические предложения.
Список литературы.